荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞分离培养及冷冻保存方法研究

试验对荷斯坦奶牛耳组织成纤雏细胞的分离、体外培养及5种冷冻保存方法进行了研究。结果表明：用DMEM／F12＋20％胎牛血清＋100IU／mL双抗的完全培养液进行组织块培养，能获得良好的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞原代培养物；成纤维细胞混合培养物经Trypsin-EDTA（0．25％Trypsin，1mmol／LEDTA．4Na）消化所收集到的细胞主要为成纤维细胞，经2—3代传代，可得到纯化的荷斯坦奶牛耳组织成纤维细胞。纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的每件下，选用5种不同的冷冻保存方法进行冷冻保存，其中使用70％细胞悬液＋20％胎牛血清＋10％DMSO的冷冻保存悬液，先在4℃预冷平衡0.5h，接着在液氮罐口的气态氮中悬挂4h，然后沉入液氮的方法冻存的细胞，解冻后，经台盼蓝染色后进行细胞活力分析，活细胞率为86．68％；培养48h后细胞贴壁率为86．40％，明显高于其他几种方法。

克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育的影响

实验比较了克隆牛过程中电融合条件的改善对附殖前胚胎发育的影响.电融合强度为140V/mm,10μs/次对的效率要较100V/mm,20μs/次和180V/mm,10μs/次时高,可以降低融合后重构胚死亡率,提高克隆牛囊胚发育率.施加直流电脉冲前先给予5V交流电场预处理数秒钟,然后在电极之间通以两个直流脉冲(140 V/mm,10μs/次,间隔0.1 s)与不用交流电预处理对融合率和重构胚的发育率无显著差异.另外实验比较了甘露醇和山梨醇两种融合液对融合及重构胚发育的影响,结果表明囊胚发育率差异不显著,但山梨醇较甘露醇融合液更容易操作.实验生出的4头克隆牛存活至今.

牛卵母细胞不同时间的成熟培养可提高核移植效率

比较了成熟培养不同时间的卵母细胞的成熟率、去核率及用于核移植的效率,认为成熟培养21h的卵母细胞虽然有较高的成熟率,但不适于采用盲去法去核。成熟培养19h的卵母细胞核移植效率略高于成熟培养17h,因此认为采用盲去法去核操作大批卵母细胞时,19h的体外成熟培养时间是比较适宜的。

莎能奶山羊皮肤成纤维细胞几种冷冻保存方法的研究

以莎能奶山羊皮肤组织为材料进行细胞培养,通过分离纯化建立了莎能奶山羊皮肤成纤维细胞系。纯化培养的成纤维细胞在冷冻保护剂和血清成分相同的条件下选用5种具有不同预冷平衡方式和预冷时间的方法进行冷冻保存,5个月后通过对成纤维细胞复苏后的活力对比分析,方法3(70%细胞悬液+20％胎牛血清+10％DMSO;先在4 C预冷平衡0．5 h,接着液氮罐口气态氮悬挂4 h,然后沉入液氮)冻存细胞解冻后胎盘蓝染色细胞活力分析,活细胞率为84．8％,培养48 h后细胞贴壁率为85．4％,明显高于其他几种方法。

不同处理方法对胚胎移植受体绵羊同期发情效果的影响

本实验利用CIDR+PMSG对绵羊进行同期发情处理。并分别用不同LH剂量对86只受体绵羊进行了诱发排卵试验:方法一100IU,方法二200IU,方法三300IU的。结果表明,CIDR+PMSG法同期发情率为:95.3%,第1d的发情率(61%)显著高于第2d的发情率(39%)(P<0.01)。方法一的优质黄体率(55.2%)显著高于方法二的优质率(26.9%)(P<0.05),方法一(55.2%)与方法三(34.6%)之间的优质率差异不显著,但方法一比较节省药品。因此,方法一的效果最好。

澳洲荷斯坦奶牛在乌鲁木齐的生产表现和饲养体会

新疆金牛生物股份有限公司是以生物技术为先导，以胚胎工程产业化为龙头、以草食畜牧业和乳品加工业为支柱的股份制畜牧高科技企业，其发展方向是：1)将公司建成全国最大的良种奶牛繁育基地和胚胎生产基地；2)建成新疆最大和全国前五名乳品加工企业；3)建成畜牧高科技技术研究、推广、应用企业。公司经过近年来的快速发展。

加强疫病防制、保证牛奶安全

新疆金牛生物股份有限公司是以草饲畜牧业和乳品加工业为基础,以胚胎移植和生物技术为龙头的高科技畜牧企业,兽医防疫是公司的基础工作之一.严格执行防检疫、免疫制度和切实阻断疫病传播途径提高奶牛机体免疫力和抵抗力,是保证牛群健康和乳制品安全的重要环节.我们的具体做法是:

赴上海“光明乳业”考察报告

为适应公司高速发展的形势,本人受公司派遣去上海"光明乳业"考察、学习和参观.本次考察为期13d,主要考察光明乳业事业部、奶牛育种中心、饲料厂、奶牛超市、专业产品销售部、培训部、第9牧场、申星奶牛场和中国奶业博物馆等单位.

犊牛代乳应用试验效果观察

选择日龄为20d的小犊牛45头,随机分为对照组、试验组A、试验组B,试验组A为15头,试验组B为16头,对照组为14头。采用犊牛代乳粉和犊牛代乳料,与鲜奶做对比试验,连续饲喂70d,结果试验组B日均增重1.057±0.144kg/头,比对照组0.961±0.345kg/头增加0.096kg,提高9.99%,差异显著(P<0.05),试验组A日均增重0.980±0.3849kg/头比对照组0.961±0.345kg/头增加0.019kg,提高1.98%,差异不显著(P>0.05)

乳清蛋白的特性及其在乳制品生产中的应用

乳清蛋白是生产干酪或干酪素过程中所产生的大量液态副产品——乳清,经过分离、浓缩和干燥等特殊工艺精制而成的高蛋白产品。随着乳品和食品工业以及干酪和干酪素生产的发展,乳清蛋白的开发和利用日显重要。本文介绍了乳清蛋白的成分、营养价值和生理功能;乳清浓缩蛋白和乳清分离蛋白的种类、特点及其在乳品工业中的应用。

乳清蛋白的营养价值及其应用

乳清蛋白是生产干酪或干酪素过程中所产生的大量液态副产品乳清,经过分离、浓缩、干燥等特殊工艺精制而成的高蛋白产品。随着乳品和食品工业以及干酪和干酪素生产的发展,乳清蛋白的开发和利用日显重要。本文介绍了乳清蛋白的成分、营养价值、生理功能;乳清浓缩蛋白和乳清分离蛋白的种类、特点及其在乳品、食品工业中的应用。

犊牛代乳应用试验效果观察

选择20日龄的小犊牛45头,随机分为对照组、试验组A、试验组B,试验组A为15头,试验组B为16头,对照组为14头。采用犊牛代乳粉和犊牛代乳料,与鲜奶做对比试验,连续饲喂70天,结果试验组B日均增重1.057±0.144kg/头,比对照组0.961±0.345kg/头增加0.096kg,提高9.99％,差异显著(P<0.05),试验组A日均增重0.980±0.3849kg/头比对照组0.961±0.345kg/头增加0.019kg,提高1.98％,差异不显著(P>0.05)。

不同级别绵羊卵母细胞在春季体外培养条件下的成熟率比较

为了对在春季屠宰场所采绵羊卵母细胞的分布及不同分布的成熟率有明确的认识 ,2 0 0 3年 3月至 4月共进行15次试验 ,收集卵母细胞 14 85枚。按卵母细胞外层所含卵丘细胞及完整程度分成A ,B ,C ,D ,E 5个级别。A级 :卵丘细胞层完整且紧密 ,一般为 4层以上 ;B级 :卵丘细胞层完整 ,一般为 1～ 3层 ;C级 :有卵丘细胞包被 ,但不完全 ;D级 :裸卵 ,但细胞质均匀 ,细胞形态完好 ;E级 :退化裸卵 ,胞质不均匀 ,细胞形态消失。选择A ,B ,C ,D级卵母细胞单独进行体外成熟培养 ,培养液为TCM 199+5 %FCS +5 μg/mLLH +5 μg/mLFSH +1μg/mLβ estradiol+2 % penstrep ,培养条件为 5 %CO2 ,38.5℃ ,饱和湿度。结果显示 :A ,B ,C ,D级的分布分别为 19.8%、2 8.1%、19.6 %和 32 .4 % ,成熟率分别为81.3%、6 5 .3%、6 1.5 %和 17.0 %。总体成熟率为 5 2 .1% ,卵丘—卵母细胞复合体 (COCs)的成熟率为 6 8.9%。

阴离子盐添加剂在奶牛围产期日粮中的应用效果分析

奶牛围产期是指产前三周（产前21天）至产后两周（产后15天）的时期，这一阶段由于奶牛的免疫力下降。而且组织内的矿物质浓度要求必须稳定在很窄的适宜范围内。因而各种传染性和代谢疾病（如产褥热、胎衣不下、子宫炎、真胃移位、乳房炎等）主要发生在这一时期，不同的调查结果显示。在美国5％～7％的牛只发生产褥热（Jordan和Fourdraine，1993），产奶量降低14％，产奶寿命减少3．4年（Block，1984），66％的奶牛产后患有亚临床型低钙血症（Beede，et，al，1992），每年给美国奶牛养殖业带来1．4亿美元的损失。我国高产牛群中27％以上的奶牛患有产褥热，82％以上的经产奶牛产后患有亚临床型低钙血症，所以为保持奶牛在围产期的健康以期获得理想的生产效益。围产期奶牛的营养及管理改变了以往产前低钙产后高钙的传统饲养理念。实验研究表明，当只有低钙日粮每天提供的钙不超过15克时对预防产褥热才具有非常明显的效果（Goings等，1974），而在现实生产中含钙量如此低的日粮营养师是很难或不可能配制出来的。