新型冠状病毒mRNA疫苗与重组蛋白疫苗混合免疫在小鼠体内的免疫原性

目的 评价新型冠状病毒脂质纳米颗粒包裹的mRNA疫苗(mRNA-LNP)与重组蛋白-铝佐剂疫苗(PS-Alum)混合免疫在小鼠体内的免疫原性,为不同技术路线疫苗联合免疫提供实验数据。方法 以mRNA-LNP和PS-Alum疫苗为研究对象,比较疫苗单独免疫及联合免疫雌性BALB/c小鼠的免疫应答水平。联合免疫策略分别为双侧免疫(bilateral)和混合免疫(mix),bilateral组在小鼠一侧胫骨前肌免疫mRNA-LNP疫苗,另一侧胫骨前肌免疫等体积PSAlum疫苗,mix组将mRNA-LNP与PS-Alum疫苗等体积混合后,分别接种小鼠两侧胫骨前肌;免疫1和2针后检测抗体反应,与单独免疫mRNA-LNP疫苗进行比较,评价混合疫苗的免疫效果。将mRNA-LNP与PS-Alum疫苗等体积混合,体外4℃放置0、48 h及7、14、35 d后免疫雌性BALB/c小鼠,检测抗体应答和细胞免疫应答,初步评价混合疫苗的稳定性。结果 mix组小鼠血清IgG结合抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)在初免后第14天和加强免疫后第14天均高于mRNA、bilateral组(14 d:P分别为<0.000 1和0.243 9;35 d:P均<0.000 1);将混合疫苗体外4℃放置0、48 h及7、14、35 d后免疫小鼠,初免后放置48 h,小鼠血清IgG结合抗体GMT比0 h略有提升(P=0.017 7),随着放置时间延长,结合抗体GMT保持稳定;加强免疫后,相比0 h,随着放置时间延长,疫苗诱导的结合抗体、假病毒中和抗体和T细胞反应均未降低(P=0.421 1~0.999 9)。结论 制备mRNA-LNP与PS-Alum混合疫苗进行免疫,相比单独免疫可有效提升免疫原性,且混合疫苗在体外4℃放置35 d内免疫原性保持稳定。

猴痘治疗药物特考韦瑞研究进展

猴痘尚无特异性治疗方法,特考韦瑞(tecovirimat,TPOXX,ST-246)是全球目前唯一获批的猴痘口服治疗药物。特考韦瑞可作用于正痘病毒蛋白VP37,抑制猴痘病毒的成熟与释放。在临床试验、病例报道及回顾性研究中,特考韦瑞的有效性与安全性均良好。本综述将对特考韦瑞的疗效、安全性以及各个研究阶段的临床数据进行总结。

重组病毒载体疫苗的研究新进展

重组病毒载体疫苗是以病毒为载体递送目的抗原的一种疫苗。病毒载体技术路线早期多用于动物疫苗和难以用传统技术路线开发的病原体疫苗。我国针对新型冠状病毒感染疫苗研发布局的5条技术路线中, 因重组病毒载体疫苗具备可同时产生较强的体液和细胞免疫、可通过黏膜途径接种以及1剂完成免疫程序等优势而获批上市, 并在疫情防控中起到了重要作用。但重组病毒载体疫苗因预存免疫问题, 即存在可能降低疫苗保护效力、为增强免疫原性可能导致安全性风险提升等因素, 故上市的重组病毒载体疫苗产品较少。随着基因工程技术、分子生物学技术的发展, 病毒载体种类日渐增多, 并在多种疫苗中得到应用。此文就重组病毒载体疫苗的研发现状进行综述。

假病毒中和试验在重组脊髓灰质炎疫苗免疫原性评价和大鼠效力试验的初步应用

目的初步研究基于脊髓灰质炎假病毒的中和试验在重组脊髓灰质炎疫苗的免疫原性评价和大鼠效力试验中的适用性。方法对重组脊髓灰质炎疫苗免疫后的大鼠血清同时采用假病毒中和试验和Sabin株中和试验进行检测,分别采用Kappa检验和Spearman秩相关分析两种方法的一致性和相关性。结果针对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体,两种方法一致性检验的Kappa值分别为0.914、1.000、0.751;相关系数R值分别为0.833、0.927、0.859,P值均<0.001。结论两种方法的结果具有一致性,相关性较好,表明脊髓灰质炎假病毒中和试验可用于疫苗免疫原性评价和大鼠效力试验。

用于柯萨奇病毒A16型纯化的层析工艺缩小模型的评价

目的验证柯萨奇病毒A16型(coxsackie virus A16,CV-A16)凝胶过滤层析和离子交换层析缩小规模与生产规模的工艺性能的等价性。方法采用线性缩小的方法,分别使用缩小规模和生产规模凝胶过滤层析和离子交换层析进行3批CV-A16病毒浓缩液的纯化,并对收集液进行病毒蛋白、抗原、牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)含量、粒径、体积排阻-高效液相色谱(size exclusion column-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析。基于层析峰图和收集液检测结果,进行凝胶过滤层析和离子交换层析缩小规模和生产规模的等价检验(two-one-sided test,TOST)统计分析。结果凝胶过滤层析缩小规模和生产规模柱效均合格,层析图谱保持一致,缩小规模和生产规模抗原含量、抗原回收率、蛋白含量、杂蛋白去除率、BSA含量、BSA去除率、HCP含量和HCP去除率均等价(P均<0.05)。离子交换层析缩小规模和生产规模柱效合格,缩小规模和生产规模抗原含量、抗原回收率、蛋白含量、杂蛋白去除率、BSA含量、BSA去除率、HCP含量和HCP去除率均等价(P均<0.05)。缩小规模和生产规模粒径、SEC-HPLC和SDS-PAGE纯度相关工艺性能指标均具有可比性。层析图谱峰高只有均值等价,存在非等价风险。结论CV-A16凝胶过滤层析和离子交换层析缩小规模与生产规模工艺性能具有等价性。