牛磺酸对大鼠小肠缺血再灌注后肝、肾损伤的保护作用

目的研究牛磺酸对大鼠小肠I/R后肝、肾损伤的保护作用。方法雄性W istar大鼠随机分为3组:假手术对照组(S组)、生理盐水对照组(I/R组)和牛磺酸保护组(T组)。T组术前3 0m in经鼠阴茎背静脉注射2%的牛磺酸2 0 0mg/kg。采用肠系膜上动脉根部阻断1 h后复流行再灌注的方法制作肠I/R模型。除S组外,其余2组分别于再灌注1.5,3,6,1 2 h抽血测定ALT,AST,BUN及Cr值,评定肝、肾功能。肝、肾切片行HE染色,比较组织病理学差异。用原位末端标记(TUNEL)法测定肝、肾细胞凋亡百分率,评定平均光密度值。结果I/R组与S组相比,血清ALT,AST,BUN及Cr值均明显升高(P<0.0 5),3 h最高,以后开始下降,1 2 h仍高于S组;肝、肾病理损伤I/R组也相应严重,肝、肾细胞TUNEL阳性表达率、平均光密度值明显增加(P<0.0 5)。T组与I/R组相比,前者血清ALT,AST,BUN及Cr水平明显减低(P<0.0 5),病理损伤也相应较轻;肝、肾细胞TUNEL阳性表达率、平均光密度值明显减少(P<0.0 5)。结论牛磺酸对大鼠小肠I/R后肝、肾损伤具有明显的保护作用。

融合蛋白NrCAM-Fc的重组体的构建

目的 :构建神经原相关的细胞粘附分子 (NrCAM )和免疫球蛋白Fc片段融合基因的重组质粒并通过Baculovirus载体转染到昆虫细胞。方法 :利用RT PCR方法从神经母细胞瘤细胞系SK N SN获得NrCAM的信号肽区和跨膜区片段并直接克隆到 pGEMT载体 ,经多次酶切、连接、转化、筛选获得NrCAM Fc的重组融合基因 ,测序后将此基因通过Baculovirus载体转染至昆虫细胞。结果 :多种酶切和测序结果表明NrCAM Fc的序列与原序列符合率达 98%以上 ,NrCAM与Fc连接处序列保证了Fc的读码框架 (ORF)。结论 :Baculovirus载体转染效率高 。

B7-H3基因与三氧化二砷联合治疗肿瘤的协同效应

目的探讨联合三氧化二砷(As2O3)与B7-H3基因治疗肿瘤的协同效应。方法分别建立小鼠肝癌的大肿瘤和多发肿瘤模型,序贯法瘤内注射真核表达质粒pcDNA3.1-Flag-B7-H3和As2O3,监测大肿瘤及多发性肿瘤的生长情况;免疫组织化学和免疫印记(Westernblot)检测B7-H3基因的表达;CD31免疫组织化学染色评估抗肿瘤血管化的效果;TUNEL检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果单用B7-H3基因或As2O3治疗大肿瘤只能使肿瘤暂时缩小而不能消退;联合治疗不但可以治愈大肿瘤,而且可以根除多发性肿瘤。免疫组织化学及Westernblot检测结果表明B7-H3基因在肿瘤细胞内表达。联合治疗使肿瘤组织的微血管密度显著减少(P<0.01),肿瘤细胞的凋亡显著增加(P<0.01)。结论联合治疗可以有效地根治大肿瘤和多发性肿瘤。