选择性头部降温对胎羊缺血性脑损伤纹状体神经元凋亡和星形胶质细胞增殖的影响

目的研究选择性头部降温对缺血性脑损伤胎羊纹状体神经元凋亡和星形胶质细胞增殖的影响。方法胎羊于妊娠117~124d时通过双侧颈动脉阻塞30min造成双侧脑缺血损伤,损伤后将胎羊随机分为：损伤组（n=10）、2h低温组（损伤后2h开始亚低温治疗,n=7）和6h低温组（损伤后6h开始亚低温治疗,n=8）,另设正常对照组（n=5）。通过冷循环水进行选择性头部降温,取脑组织用免疫组化法检测胎羊纹状体caspase-3（半胱天冬氨酸酶-3）,GFAP（胶质纤维酸性蛋白）和PCNA（增殖细胞核抗原）的表达。结果①纹状体神经元凋亡：正常对照组中,caspase-3表达极少（11.00±13.77）,损伤组caspase-3免疫阳性细胞为177.70±48.69,明显增加（P=0.000）,损伤后2h治疗组（54.14±39.44,P=0.000）和损伤后6h治疗组（122.43±52.36,P=0.017）均能减少caspase-3免疫阳性细胞。②纹状体星形胶质细胞增殖：与正常对照组（163.40±21.98）相比,缺血性脑损伤组的GFAP免疫阳性细胞明显增多（433.25±66.69,P=0.000）,损伤后2h开始亚低温治疗（219.50±35.31,P=0.000）和损伤后6h开始亚低温治疗（272.50±86.20,P=0.000）均能减少GFAP免疫阳性细胞。③纹状体PCNA阳性细胞的表达：在正常对照组中,PCNA免疫阳性细胞较少,为153.40±12.46,缺血性脑损伤组的PCNA免疫阳性细胞明显增多（353.70±45.60,P=0.000）,损伤后2h开始亚低温治疗（187.14±26.26,P=0.000）和损伤后6h开始亚低温治疗（230.25±67.46,P=0.000）均能减少PCNA免疫阳性细胞。结论亚低温可以抑制纹状体神经元的凋亡和星形胶质细胞的增殖,该作用可能为选择性头部降温的脑保护作用机制之一。

选择性头部亚低温治疗对胎羊缺血性脑损伤纹状体神经元的保护作用

目的 研究选择性头部亚低温治疗对缺血性脑损伤胎羊纹状体不同表型神经元的保护作用。方法 胎羊于妊娠117～124d（足月为147d）时通过双侧颈动脉阻塞30min造成双侧脑缺血损伤，通过冷循环水进行选择性头部亚低温治疗。将胎羊随机分为：损伤组（n=10）、2h低温组（损伤后2h开始亚低温治疗，n=7）和6h低温组（损伤后6h开始亚低温治疗，n=8），另设假手术组（n=5）。用免疫组化法检测胎羊纹状体胆碱乙酰化酶（choline acetyltransferase，ChAT）标记的胆碱能神经元，谷氨酸脱羧酶（glutamate acid decarboxylase，GAD）、钙结合蛋白（calbindin-28kd）、神经肽Y（neuropeptide Y，NPY）标记的7氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid，GABA）能神经元和神经型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）标记的一氧化氮神经元的变化。结果假手术组ChAT、GAD、NPY和nNOS阳性神经元多，阳性染色主要位于胞质和树突内。损伤组纹状体ChAT阳性神经元为（118．10±74．33）个、GAD阳性神经元为（41．80±26．94）个、calbindin-28kd阳性神经元为（48．79±26．20）个／mm^2、NPY阳性神经元为（94．00±55．29）个、nNOS阳性神经元为（76．60±33．11）个，明显少于假手术组（P〈0．01）；在2h低温组明显多于损伤组（P〈0．05）；但6h低温组与损伤组差异无统计学意义。nNOS阳性神经元在2h低温组为（133．00±38．74）个，6h低温组为（127．38±68．18）个，明显多于损伤组（P〈0．05）。结论 亚低温对胎羊缺血性脑损伤纹状体不同表型的神经元具有保护作用，这一作用与低温治疗开始的时间有关。亚低温治疗可能有助于改善围产期缺血性脑损伤引起的运动和认知功能障碍。