罗氏核酸检测试剂在无锡血站的应用分析

目的评估罗氏核酸检测试剂在无锡地区献血者筛查中应用价值。方法采用美国罗氏诊断公司核酸联合检测试剂盒,对本血站ELISA检测合格的献血者129299人份血液标本进行HBV DNA、HCV RNA和HIV RNA1+2联合检测,先对6人份混样标本进行检测,如为非反应性,则该合并检测池中的标本均为非反应性,如合并检测呈反应性,再进行拆分检测。结果对酶免检测为阴性的129299人份血液标本进行核酸扩增检测,共检测出HBV DNA阳性129例,HCV RNA阳性1例,HCV RNA阳性血液病毒定量为4.27×10~6IU/ml,HIV RNA阳性1例。核酸总和阳性率为1.01‰。结论美国罗氏诊断公司核酸联合检测试剂盒应用于献血者血液筛查后,能在酶免检测阴性的血液标本中进一步筛查出乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1型+2型)核酸阳性的献血者标本,避免了临床患者因输血而感染乙型肝炎、丙型肝炎、人类免疫缺陷疾病的不良事件。

血站降低不合格血液报废率的思考

目的分析2005～2007年度因血液不合格导致报废的影响因素,寻找降低血站不合格血液报废率的办法。方法根据不合格报废血中占比例最大的项目的特点,提出相应的解决方案。结果献血者ALT升高是导致血站不合格血液报废的主要因素,占总报废血量的72.13%。结论用采集静脉血代替手指血,半自动生化仪测定ALT,可有效减少血液报废。

HBV变异对乙肝病毒标志物和DNA定量的影响

目的:了解无锡地区HBV前C/C基因变异情况,探讨基因变异对乙肝病毒标志物(HBVM)及HBV DNA定量的影响。方法:HBVM用时间分辨荧光定量试剂检测;HBV DNA定量PCR以德国Roche L ightcyc ler荧光定量扩增仪检测;HBV DNA前C/C测序使用①德国Roche M ag NA Pure LC全自动核酸提取,加样系统;②美国Beckm anCou lter CEQ 8000 Genetic Analysis System。结果:92例乙肝患者血清中有41例(44.6%)发生前C/C区nt1896位变异,41例中有34例HbeAg阴性,7例HbeAg仍为阳性;以nt1896位是否变异分组,变异组和未变异组HBV DNA定量无显著性差异。结论:nt1896位变异导致HBeAg转阴,HBV病毒变异对HBVM有决定性的影响,但该变异对HBV复制无影响。

MPX V2.0试剂在血液核酸筛查中的应用

目的通过与MPX V1.0试剂的比对,评估罗氏诊断公司MPX V2.0试剂在血液筛查中的可行性和适用性。方法在罗氏Cobas核酸检测平台上,分别使用MPX V1.0或MPX V2.0试剂对9 418人次HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、TP ELISA阴性的无偿献血者血液标本进行核酸定性检测,并对NAT阳性样本进行鉴别确认试验和电化学发光检测。结果 9 418人次标本经MPX V1.0检出混样阳性样本10例,6例拆分阳性样本,检出总阳性率0.064%;MPX V2.0检出9例混样阳性,6例拆分阳性,检出总阳性率0.064%;MPX V2.0对MPX V1.0,相对阴性符合率99.98%,相对总符合率99.96%;MPX V1.0和MPX V2.0均检测为阳性者4例,MPX1.0和MPX V2.0单独阳性者各2例。用确认试验鉴别4例HBV DNA阳性,结果1例HCV RNA阳性,3例不确定;发现1例低CT值(MPX V1.0 CT=16.4,MPX V2.0 CT=18)样本,经MPX V2.0判定为HCV感染,推测为HCV感染窗口期,之后经追踪检测证实。结论 MPX V2.0试剂与MPX V1.0试剂拆分率接近,检出总阳性率一致,相对总符合率较高;两种试剂均有对低病毒载量(<20 U/ml)样本的漏检,灵敏度仍待提高;MPX V2.0可直接区分病毒感染类型,更有利于对阳性献血者的解释和追踪随访,以指导其早期就诊。

街头无偿献血筛查岗位配置探讨

乙肝金标法测定HBsAg已经广泛应用于街头无偿献血者的筛查．乙肝金标纸条的应用使因HBsAg阳性而浪费的血液迅速下降．而各地在街头无偿献血筛查岗位上所配备的人员有所不同．有的为检验专业技术人员。有的为一般护理专业人员，

加样时标本被污染导致合格血报废一例

在血站实验室．全自动加样系统解决了大量标本加样和数据传输的问题．大大减轻了工作人员的工作强度和减少了人为误差。由于考虑检测成本问题．较多血站选择了永久性加样钢针．但永久性钢针存在的缺陷在使用过程中也渐渐显露出来．特别是存在加样拖带现象．成为工作人员急需解决的问题。我们在工作中就发现一例标本在加样时被HBsAg污染导致合格血液被报废的情况．现报告如下。

TRUST-微板法筛查梅毒试验中的离心条件探讨

目的为了获得TRUST-微板法的最佳离心条件。方法在孵育、振荡等条件相对固定下,利用样本的AV值来获得最佳离心速度和时间。结果TRUST-微板法中离心速度700 r/min,时间1.5 min为最佳离心条件。结论TRUST-微板法操作时,微板在离心前静置1min、离心时需平衡能使样本获得最佳的AV值。

微板丙酮酸氧化酶法和微板紫外连续监测法检测ALT的比较

ALT作为肝功能检测的指标之一．除在肝炎的诊断及防治方面具有重要的临床价值外．在血站系统对献血者排除肝病患者的筛查中也是一项重要指标。近年来微板紫外连续监测法被血站系统广泛应用于献血员筛查．但由于比色波长（340nm）的限制．标本溶血、脂血都会影响检测结果。而微板丙酮酸氧化酶法是在可见光（492nm）范围内比色，能较好地克服上述干扰．现将其与微板紫外连续监测法对不同标本的检测结果比较报告如下：