骨髓间充质干细胞自体移植促进缺血肢体血管生成的实验研究

目的探索骨髓间充质干细胞在血管生成中的作用,为临床建立一种简便安全的下肢动脉缺血性疾病的治疗途径。方法24只新西兰兔分为实验组(12只)和对照组(12只),分离培养实验组兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),Brdu标记,建立兔后肢缺血动物模型,将取于自体的骨髓间充质干细胞制成悬液注射于实验组兔缺血部位,对照组注射等量生理盐水。2周后行实验组和对照组兔股动脉的二维及彩色多普勒超声检测,观察移植前后的血管内径,血流峰值速度,血流加速时间等;取缺血部位肌肉组织,免疫荧光染色观察移植细胞分布及血管生成情况。结果细胞移植后2周,实验组的股动脉内径,血流峰值速度,加速时间均大于对照组,有显著性差异(P<0.01);免疫荧光染色结果显示移植部位有移植细胞存在,移植组血管生成情况明显优于未移植组。结论骨髓间充质干细胞具有促进血管生成的作用,自体移植可望成为一种简单的、有效的治疗下肢缺血的方法。

体外诱导骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的实验研究

目的探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞的可行性。方法分离培养骨髓间充质干细胞,鉴定其表面抗原,用含2%胎牛血清以及50 ng/m l血管内皮生长因子的条件培养基诱导,诱导后细胞通过内皮细胞标志物KDR、FLT-1以及v-WF染色鉴定。结果骨髓间充质干细胞表面抗原CD29、CD44、CD105阳性,CD34、CD45、CD106以及HLA-DR阴性。诱导后细胞形态明显改变,内皮细胞标志物KDR、FLT-1以及v-WF染色结果阳性。结论骨髓间充质干细胞在体外具有分化为血管内皮细胞的能力,可以作为干细胞治疗的一种有效来源。

外源性透明质酸对创面愈合病理变化的影响

目的 探讨外源性透明质酸 (hyaluronicacid ,HA)在伤口愈合中可能的作用机制以及对瘢痕形成的影响。方法 大鼠 45只 ,随机分成A、B、C(2 %、1 %HA溶液、PBS溶液 )三组 ,观察伤口愈合过程中 ,创面平均愈合时间和残留面积的大小 ,大体形态以及组织学的改变。结果 (1 )A、B、C三组的平均愈合时间分别为 1 5 2天、1 4 2天和 1 3 4天。A、B两组残留面积与C组比较有显著性差异 ,三组间比较也有显著性差异 (P <0 0 1 )。 (2 )组织学上 ,A、B两组成纤维细胞增生明显 ;胶原纤维较为纤细 ,排列整齐 ,直径较纤细。C组则显示出明显的炎性细胞浸润 ,新生血管数目增多。 (3)HA的生物学作用与其浓度有关。结论 在伤口愈合过程中 ,外源性HA可通过对细胞的调控作用有效地发挥其生物学作用 ,减少瘢痕形成。

干细胞复合纳米晶羟基磷灰石胶原修复骨缺损的研究

目的 研究纳米材料作为组织工程骨基质材料的特点。方法 分离培养人骨髓间充质干细胞 ,与纳米晶羟基磷灰石胶原材料 (nHAC/PLA)于体外联合培养 ;通过大体观察、组织学分析及电镜观察了解成骨情况 ,进一步临床应用于修复骨缺损。结果 人骨髓间充质干细胞在体外可以大量扩增 ,复合细胞的材料植入骨缺损处后 ,X光摄片动态观察可见骨缺损处连接良好。结论 骨髓间充质干细胞具有成骨细胞作用 ,纳米晶羟基磷灰石胶原材料是一种很好的构建组织工程骨的支架材料。

筋膜皮瓣的临床应用进展综述

筋膜皮瓣的临床应用进展综述万伟东１冷永成２筋膜皮瓣自问世以来［１］，因其血运丰富，操作较简便，修复效果良好而为修复重建外科所广泛重视。近几年来，随着临床的普遍应用，经验不断积累，使筋膜皮瓣的应用水平进一步提高。同时，新的筋膜皮瓣不断被发现。１筋膜皮瓣...

人骨髓间充质干细胞分离培养及多向分化的实验研究

目的:探索体外分离子与培养人骨髓间充质干细胞的方法,同时研究其细胞生物学特性,分析其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法:分离人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stemcells,hBMSCs),通过常规培养,在体外观察其生长特性、抗原表达等特征;然后通过条件培养基定向诱导,观察其分化潜能。结果:人骨髓间充质干细胞在体外可以大量增殖,常规培养条件下,原代培养需要2～3周,转代后生长速度加快;应用流式细胞仪检测MSCs的表面抗原,CD44、CD29、CD105阳性,CD45、CD06、CD34以及HLA-DR阴性;在相应条件培养基的诱导作用下,MSCs可以分化为成骨细胞、软骨细胞以及神经细胞。结论:人骨髓间充质干细胞可以从骨髓中分离并在体外培养增殖,同时在体外具有多向分化潜能,可以分化成为骨细胞,符合骨组织工程种子细胞的要求。

骨髓间充质干细胞自体移植促进兔缺血肢体的血管生成(英文)

背景:常规药物治疗、介入或血管旁路移植手术对下肢动脉闭塞症的远期疗效均不理想。近年来采用干细胞的血管再生疗法在梗死部位修复或重新建立有效侧支循环逐渐成为可能。目的:验证骨髓间充质干细胞自体移植对兔缺血后肢血管再生的促进作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-08/2006-11在江苏省血吸寄生虫病防治研究所完成。材料:选用新西兰大白兔8只,制备兔后肢缺血模型。按随机数字表法分为2组,实验组及对照组各4只。方法:分离培养实验组兔骨髓间充质干细胞,5-溴-2-脱氧尿苷标记,将骨髓间充质干细胞制成悬液注射于实验组兔后肢缺血部位;对照组注射等量生理盐水。主要观察指标:2周后行兔股动脉二维及彩色多普勒超声检测,观察移植前后的血管内径、血流峰值速度及血流加速时间等;取缺血部位肌肉组织,通过免疫荧光及苏木精-伊红染色观察移植细胞分布及血管生成情况。结果:细胞移植2周后实验组兔的股动脉内径、血流峰值速度均大于对照组(P<0.01),血流加速时间短于对照组(P<0.01)。免疫荧光染色结果显示实验组兔移植部位有抗5-溴-2-脱氧尿苷染色阳性细胞存在;苏木精-伊红染色结果显示实验组缺血部位血管密度高于对照组。结论:骨髓间充质干细胞具有促进血管生成的作用,自体移植可望成为一种简单的、有效的治疗下肢缺血的方法。

真皮下血管网薄皮瓣在手部软组织缺损修复中的应用

目的 研究真皮下血管网薄皮瓣在手部软组织缺损修复中的应用。方法 对因外伤、热电等烧伤引起的手部软组织缺损或瘢痕挛缩畸形２３ 例（ 皮瓣面积为１６ ｃｍ ×５ ｃｍ ～８ ｃｍ ×４ ｃｍ） 患者，采用真皮下血管网皮瓣修复。结果 断蒂时间最短为术后７ ｄ ，最长为术后１２ ｄ ，２３ 例患者均获得满意效果。结论 该薄皮瓣在各种原因引起的手部软组织缺损修复中有其明显优点。