国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞效果比较

目的比较国产与进口DMEM培养基培养CHO-C28细胞的效果。方法采用国产DMEM培养基与进口DMEM培养基培养同批CHO-C28细胞,收集培养上清,检测HBsAg表达水平。采用相同条件纯化培养上清中的HBsAg,比较二者的层析图谱及纯化抗原的电泳图谱。并用其抗原制备疫苗,进行异常毒性和效力试验。结果培养上清中HBsAg表达水平,国产培养基略好于进口培养基,二者纯化图谱和抗原电泳图谱一致。两种培养基制备的疫苗异常毒性试验均合格,小鼠效力试验结果差异无显著意义。结论国产培养基在细胞培养中安全、有效,达到进口培养基水平,可用于规模化生产。

OPA/FMOC柱前衍生高效液相色谱法测定细胞培养基M199中氨基酸含量

目的:该实验建立了以OPA/FMOC作为柱前衍生化试剂,采用高效液相色谱法测定细胞培养基中氨基酸含量的方法。在10～180μg.mL-1范围内线性关系良好,相关系数在0.9953～1.000之间,平均回收率95.9%～102.4%,CV%<3.8%(n=5),重复性RSD为0.08%～3.82%(n=6)。结论:该方法准确、灵敏、简便快速,适用于细胞培养基中氨基酸的含量测定。

用于人胚肺二倍体细胞培养的MEM产品比较试验

在相同实验条件下,比较了无锡市美迪生物制品有限公司生产的MEM和日本日水公司生产的MEM,在人胚肺二倍体细胞培养过程中,细胞贴壁、细胞形态、分裂速度、增殖数量、维持时间等情况,结果美迪公司MEM和日水MEM在细胞生长各个方面均无差异,完全可以支持人胚肺二倍体细胞的生长。

改良M199培养基在Vero细胞培养中的适用性

目的比较改良M199培养基与进口M199培养基培养Vero细胞及狂犬病病毒的效果,旨在筛选出更适合Vero细胞生长及其相关病毒培养的培养基。方法分别用含5%新生牛血清的改良M199培养基和进口M199培养基培养Vero细胞,于倒置显微镜下观察细胞的生长状态,并进行细胞计数,台盼蓝染色法测定细胞活力;分别用含1%新生牛生血清的改良M199培养基和进口M199培养基培养狂犬病病毒,采用小鼠脑内滴定法测定病毒滴度。结果改良M199培养基培养的Vero细胞形态更规则,增殖更快,细胞密度和活力均高于进口M199培养基培养的Vero细胞;使用改良M199培养基培养狂犬病病毒,病毒增殖更快,滴度更高,峰值可达109log LD50/ml,明显高于使用进口M199培养基培养的病毒滴度。结论改良M199培养基更适合Vero细胞以及狂犬病病毒的培养。