神经外科术后中枢神经系统感染的临床分析

中枢神经系统感染多出现在神经外科手术后,神经中枢一旦受到感染患者长期受到病痛的折磨,损伤脑神经结构恢复的完整性,不但影响原来的生理功能,若没有得到及时有效的处理还会危及患者生命[1-2]。本文主要探讨神经外科手术后中枢神经系统感染患者的主要临床特点,并分析了主要致病菌的类型,以便为临床实践提供依据,现报道如下。

重型脑损伤后神经源性肺水肿血流动力学改变的临床研究

目的 探讨重型脑损伤后神经源性肺水肿 (NPE)血流动力学的变化及多巴酚丁胺的治疗作用。方法 对 18例确诊的重型脑损伤后NPE患者进行血流动力学监测 ,其中 12例采用多巴酚丁胺治疗 ,比较治疗前 2小时、治疗时、治疗后 2小时、6小时的血流动力学参数及氧合指数 (PO2 /FiO2 )。结果 NPE患者治疗前心脏指数 (CI)、左室每搏作功指数 (LVSWI)降低 ,肺动脉楔压(PAWP)、平均肺动脉压 (MPAP)升高 ,PO2 /FiO2 低于正常。多巴酚丁胺治疗后 2小时、6小时CI、LVSWI明显上升 ,PAWP、MPAP显著下降 ,PO2 /FiO2 迅速好转。结论 重型脑损伤后NPE存在左心功能不全 ,多巴酚丁胺治疗有效。

可固定透明神经内镜鞘下双吸引技术治疗高血压性脑出血

目的探讨透明神经内镜鞘下双吸引技术治疗高血压性脑出血的应用价值。方法回顾性分析26例高血压性脑出血病人的临床资料,其中基底核区脑出血19例,脑室出血7例。设计可固定透明神经内镜鞘、固定装置和内镜吸引器,均采用可固定透明神经内镜鞘下双吸引技术。结果 26例病人头皮平均切口长度3.5 cm(3～4 cm),骨窗直径1.8 cm(1.5～2.5 cm),术中平均失血量55 ml(30～100 ml),平均手术时间60 min(40～150 min)。术后1 d头部CT复查显示平均血肿清除率90%(70%～95%)。术后6个月GOS评分:恢复良好3例,轻度残疾14例,重度残疾6例,植物生存2例,死亡1例。结论透明神经内镜鞘及固定装置可为内镜提供一个清晰、稳定的空气环境,采用双吸引技术使血肿清除、止血更有效。

神经内镜下侧脑室手术入路的应用解剖

目的研究神经内镜下侧脑室、第三脑室的重要解剖学结构,为神经内镜下治疗脑室病变提供应用解剖学基础。方法对10具成人尸头分别采用冠状缝前侧脑室前角、三角区及后角3种入路在神经内镜下观察脑室结构并测量数据。结果 (1)侧脑室前角入路可清晰显示侧脑室前角和体部,室间孔的Y形结构,且可以通过室间孔进入第三脑室。(2)冠状缝前穿刺点到侧脑室、室间孔距离为(28.7±2.6)mm、(55.1±2.8)mm,侧脑室前角到室间孔距离为(30.8±2.3)mm,室间孔长、宽径为(5.6±1.4)mm、(3.2±1.1)mm,中间块长径、宽径为(6.3±1.8)mm、(3.4±1.2)mm。(3)侧脑室后角及三角区入路可以观察到侧脑室体部结构及脉络丛。结论 (1)冠状缝前侧脑室前角入路是处理侧脑室、室间孔区及第三脑室病变的理想入路;(2)侧脑室后角入路是治疗侧脑室后角及三角区病变的理想入路;(3)侧脑室三角区入路应用价值低。

正常成人脑脊液诱导人胚来源的神经干细胞分化的实验研究

目的 观察人胚来源的神经干细胞在正常成人脑脊液中的分化情况并探讨其机制。方法 将原代培养的人胚来源的神经干细胞置入含有正常成人脑脊液培养基 (DMEM/F12 +B2 7+ 3 0 %脑脊液 )使其分化 ,在分化的不同时间对分化的细胞进行免疫细胞化学染色 ,计数产生的各类神经细胞的比例。结果 正常成人脑脊液能诱导人胚来源的神经干细胞分化成神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞 ,与其在胎牛血清中的分化相比星型胶质细胞比例增多 (P <0 0 5 ) ,而其他类型细胞比例无显著性差异。结论 正常成人脑脊液能诱导人胚来源的神经干细胞分化成神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞 ,神经干细胞在脑脊液中可以存活和分化 。

MRI活体示踪大鼠脑内超顺磁性氧化铁标记成人神经干细胞

背景:目前判断神经干细胞移植后向脑损伤部位的迁移需要处死受体动物行脑切片检查,且不能进行多点、动态的观察。目的:探讨用MRI活体示踪移植磁化标记成人神经干细胞在创伤性脑损伤模型大鼠脑内迁移和分布的可行性。方法:建立大鼠脑部左侧半球创伤性脑损伤模型,超顺磁性氧化铁体外标记成人神经干细胞。模型建立后2周将标记成人神经干细胞立体定向移植入大鼠脑部右侧半球。在移植后1d、3d、1周和2周分别行大鼠头部MRI。2周后处死大鼠取脑,用普鲁士蓝染色法进行染色,观察标记神经干细胞的迁移。结果与结论:超顺磁性氧化铁体外标记成人神经干细胞的成功率约为85%。移植后行头颅MRI可见位于右侧半球的移植部位FSET2WI和GRET2序列呈环形低信号。随时间推移,创伤性脑损伤后移植标记干细胞组大鼠头颅MRI可见脑内有一低信号线,指向对侧脑挫伤部位,而创伤性脑损伤后移植未标记干细胞组,正常大鼠移植标记干细胞组无信号线。MRI显像结果与脑切片普鲁士蓝染色观察到的结果是相符合的。结果提示用MRI活体示踪移植磁化标记成人神经干细胞在创伤性脑损伤模型大鼠脑内迁移和分布可行、有效。

Caspase-3基因过表达抑制LN-18人神经胶质瘤细胞移植瘤生长

目的观察靶向caspase-3基因过表达对LN-18人神经胶质瘤细胞移植瘤生长的影响并探讨其机制。方法化学合成caspase-3基因序列,通过同源重组,获得caspase-3基因过表达慢病毒。设置转染组、对照组和空白组,其中转染组细胞转染caspase-3基因过表达慢病毒,对照组细胞转染含阴性序列基因重组慢病毒,空白组细胞不加病毒上清液,慢病毒转染LN-18人神经胶质瘤细胞72 h后测定病毒转染效率,蛋白质印迹法评估caspase-3蛋白表达。制备裸鼠神经胶质瘤荷瘤模型,细胞接种后每3天测量肿瘤体积,21 d后处死动物,剥离肿瘤组织,比较各组瘤块大小,TUNEL法观察各组肿瘤组织内细胞凋亡情况。结果 caspase-3基因过表达慢病毒能有效感染LN-18人神经胶质瘤细胞,体外细胞转染率达到83.7%,转染72 h后,转染组caspase-3蛋白表达显著增加;转染组LN-18人神经胶质瘤细胞移植裸鼠皮下,肿瘤生长速度明显小于对照组和空白组,至移植后21 d,转染组、对照组和空白组移植瘤体积分别为(0.52±0.17)cm^3、(2.61±0.22)cm^3和(2.38±0.19)cm^3,F=104.241,P=0.021 89;移植后21 d,与对照组和空白组相比,转染组移植瘤细胞凋亡显著增加(P <0.001)。结论 caspase-3基因过表达慢病毒转染LN-18人神经胶质瘤细胞可明显促进caspase-3蛋白合成,抑制LN-18神经胶质瘤细胞体内移植后生长,显著增加肿瘤细胞凋亡,可作为神经胶质瘤治疗新手段。

全反式维甲酸联合细胞因子诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的作用

目的探索全反式维甲酸(ATRA)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)在诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为神经元样细胞过程中的作用。方法应用Ficoll分离骨髓中单核细胞,贴壁培养,观测形态并用流式细胞仪检测其细胞表面标志;用含ATRA、bFGF、EGF的条件培养基对培养的细胞向神经细胞诱导分化;采用免疫荧光染色法对分化的细胞进行鉴定。结果分离培养的贴壁细胞具有典型的BMSCs形态和细胞表面标志,诱导后细胞表达神经元和星形胶质细胞标志神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结论ATRA联合细胞因子具有诱导BMSCs在体外分化为神经元样细胞的能力。

人骨髓间充质干细胞的免疫调节作用及向神经元样细胞诱导分化

背景:骨髓间充质干细胞作为具有多向分化潜能的干细胞,属于未分化的前体干细胞,其表型分化尚不成熟,因此在同种异体移植后无排斥反应或反应较弱。但是在体外条件下通过化学和生物诱导物使骨髓间充质干细胞转化为神经元,影响骨髓间充质干细胞向神经细胞、胶质细胞系统定向分化的因素比较复杂。目的:观察人骨髓间充质干细胞的免疫调节作用,及向神经元样细胞诱导分化的能力。设计、时间及地点:对比观察,于2008-01/2009-03在无锡市第三人民医院细胞室完成。材料:骨髓来源于人髋关节手术时的松质骨碎片或髂骨游离移植。方法:首先分离和培养骨髓间充质干细胞,建立双向混合淋巴细胞反应体系,在双向混合淋巴细胞反应中,将来自2个志愿者的外周血单个核细胞(各1×105/孔)等比例加入96孔板中,根据不同效靶比E/Tratios(骨髓间充质干细胞/外周血单个核细胞)加入丝裂霉素处理过的骨髓间充质干细胞。在骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞实验中分别选择两种诱导培养基,方法1诱导:DMEM+体积分数为10%胎牛血清+1μmol/L全反式维甲酸+20μg/L碱性成纤维细胞生长因子+20μg/L表皮生长因子;方法2诱导:DMEM+2%二甲基亚砜+100μmol/L丁羟茴醚。主要观察指标:3H掺入法测定淋巴细胞增殖率,观察骨髓间充质干细胞对淋巴细胞增殖的影响;通过条件培养基定向诱导,免疫荧光和免疫组织化学染色观察其分化为神经细胞的能力。结果:①骨髓间充质干细胞与混合淋巴细胞反应体系共同培养抑制了淋巴细胞增殖,其增殖抑制率与加入骨髓间充质干细胞的数量呈正比。②方法1诱导2h后,光镜下可见骨髓间充质干细胞的细胞质向核收缩,呈典型核周体形态。3～5h后多数细胞能形成神经元样细胞形态,但细胞数目无明显增加。3d后大多数细胞转变为双极或多极神经元细胞样形态,部分细胞之间拉成网状。染色可见60%～70%神经元特异性烯醇化酶、45%～50%胶质纤维酸性蛋白阳性,巢蛋白阳性细胞下降为3.4%。方法2诱导2h即可见细胞体积变小,形成双极或多极的细胞体,可持续诱导48h,后大部分细胞浮起死亡。染色可见40%～50%神经元特异性烯醇化酶、35%～40%胶质纤维酸性蛋白阳性,巢蛋白阳性细胞在诱导2h时一过性上升到63%,48h时下降为1.6%。结论:骨髓间充质干细胞具有向神经细胞分化能力并且可以抑制混合淋巴细胞反应体系中淋巴细胞的增殖,对同种异体免疫反应具有负调节作用。

绿色荧光蛋白、菲立磁体外双标记神经干细胞及其活性的研究

目的探索用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)重组逆转录病毒和菲立磁(超顺磁性氧化铁,,Superparamagnetic Iron Oxide,SPIO)体外双标记神经干细胞的可行性及其对细胞活力的影响。方法用病毒介导的GFP基因转导大鼠胚胎神经干细胞。用SPIO和Lipofectamine体外磁化标记经GFP标记的胚胎神经干细胞。用荧光显微镜观察双标记神经干细胞,并行普鲁士蓝染色,了解转染成功率。MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测标记神经干细胞的细胞增殖活力。结果双标记神经干细胞分化的细胞荧光显微镜下观察见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阳性。而未标记神经干细胞荧光显微镜下观察未见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阴性。MTT法检测发现GFP和SPIO双标记神经干细胞的增殖活力与未标记神经干细胞相比无改变。结论绿色荧光蛋白重组逆转录病毒和菲立磁可以有效地标记体外分离培养的大鼠胚胎神经干细胞。双标记神经干细胞的增殖、分化活力与未标记神经干细胞相比无改变。

神经内镜下经纵裂胼胝体侧脑室入路的应用解剖

目的为临床开展神经内镜下经纵裂胼胝体侧脑室入路到达侧脑室及第三脑室手术提供应用解剖学基础。方法对10例成人尸头标本经纵裂胼胝体前部侧脑室入路在神经内镜下观察侧脑室、第三脑室结构并测量数据。结果 (1)胼胝体厚度(6.1±1.2)mm,室间孔长、宽径为(5.6±1.4)mm、(3.0±1.6)mm,中间块长、宽径(6.3±1.8)mm、(3.4±1.2)mm(;2)冠状缝前5cm引流静脉很少(;3)神经内镜观察侧脑室前角、侧脑室体部及室间孔的Y形结构,且可以通过室间孔进入第三脑室,进行较好的暴露和观察;(4)胼胝体切开1.5 cm,硬质内镜操作空间和观察范围受限,胼胝体切开2.0 cm时,适合神经内镜操作和观察。结论经纵裂胼胝体前部侧脑室入路按生理间隙进入,操作距离短,内镜直接指向室间孔,可同时显露对侧脑室,是处理双侧脑室、室间孔区及第三脑室病变的理想入路。

人胚脑皮层神经干细胞的分离培养及鉴定

目的从人胚脑皮层中分离培养并鉴定神经干细胞。方法利用无血清培养和单细胞克隆技术在人胚脑皮层中分离出具有单细胞克隆能力的细胞 ,并进行培养、传代、分化观察 ,采用间接免疫荧光检测克隆细胞的神经巢蛋白 (Nestin)抗原和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达。结果从胚龄10周的新鲜人胚脑皮层中成功分离出神经干细胞 ,该细胞具有连续克隆能力 ,可传代培养 ,表达神经巢蛋白抗原。分化后的细胞表达神经元细胞、胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原。结论人胚脑皮层中存在具有自我更新能力和多分化潜能的神经干细胞。

高-低密度法分离培养大胚龄人神经干细胞

目的 从大胚龄人胚脑中分离培养并鉴定神经干细胞。方法 采用高 低密度培养、无血清培养和单细胞克隆技术分离培养出神经干细胞 ,并应用免疫荧光染色鉴定。结果 从 13周龄胚脑中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞 ,它们具有连续克隆能力 ,可传代培养 ,表达神经巢蛋白抗原 ,分化后的细胞表达神经元细胞、胶质细胞和少枝胶质细胞的特异性抗原。结论 高

神经干细胞和骨髓基质细胞联合移植治疗局灶性脑缺血研究

目的:研究神经干细胞(NSCs)和骨髓基质细胞(MSCs)联合移植对脑缺血大鼠运动功能的改善效果。方法:采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,将脑缺血大鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、NSCs组及NSCs-MSCs组,分别将各组移植材料通过立体定位法植入大鼠患侧纹状体内(仅标记NSCs),术前及术后3、7、14、30d进行神经功能缺损评分,对移植部位组织进行免疫组化染色观察。结果:30d时NSCs-MSCs组和NSCs组有13.86%和2.81%的NSCs分化为神经元,差异有统计学意义(χ2=157.71,P<0.01),神经功能缺损评分NSCs组为1.58±0.16,NSCs-MSCs组为1.00±0.13,差异有统计学意义(P<0.05),NSCs移植后集中在移植位点及周围区域,有向缺血灶迁移的趋势。能存活、分化为神经元、星形胶质细胞,并向损伤区迁徙。结论:MSCs与NSCs联合移植可促进受损组织修复,改善脑缺血大鼠的运动功能。

神经内镜辅助面肌痉挛微血管减压术的围手术期护理

1对象与方法2004年1月～2008年6月,我院应用神经内镜辅助治疗特发性面肌痉挛病人106例,其中男41例,女65例;年龄26～65岁,平均44.6岁。均在全身联合麻醉下．采用神经内镜辅助经枕下乙状窦后入路行面神经微血管减压术。在面神经与责任血管之间垫以Teflon涤纶棉，以达到减压目的。本组术后面肌痉挛缓解101例（95．3％）。

脑外科患者术后气管插管的护理措施

目的:探讨脑外科术后气管插管患者定时定量向气管插管内注入生理盐水配合鱼腥草注射液的临床效果。方法:对我科脑外科手术后进行气管插管180例患者,常规护理的基础上,每隔2小时用生理盐水10mL配合鱼腥草注射液10mL由气管插管内滴入,每次15滴。或每隔4小时用生理盐水10mL配合鱼腥草注射液10mL雾化吸入,每次20分钟。结果:所有患者均能安全度过复苏期,有1例形成痰痂,但无生命危险。结论:脑外科患者术后气管插管护理时,用生理盐水配合鱼腥草注射液,可以有效地预防痰痂的形成,保持患者呼吸道畅通,值得临床推广使用。