胶原海绵促进肉芽生长与创面愈合实验研究

目的评价含胶原纤维不同的胶原海绵促进创面肉芽生长与愈合的疗效比较。方法将含胶原纤维较多的可即邦胶原海绵与较少的艾微停微纤维止血胶原海绵分别作为治疗组1与治疗组2,与对照组凡士林纱布比较,外用于兔背部机械性创面,于用药后3、7、14d分别测定创面面积愈合率、肉芽毛细血管密度、肉芽内血红蛋白含量及羟脯氨酸含量,并记录各组疮面愈合时间。结果创面愈合率及愈合时间,治疗组明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),其中第7天时创面愈合率及创面愈合时间,治疗组1优于治疗组2;创面肉芽毛细血管密度与血红蛋白含量,治疗组优于对照组(P<0.01),第7天时,治疗组1优于治疗组2,与创面愈合率一致;创面肉芽羟脯氨酸含量结果与创面愈合率一致,不同的是第14天时,治疗组1优于治疗组2。结论胶原海绵对创面具有促进愈合的疗效,作用机制之一是促进血管新生与胶原合成。含胶原纤维较高的可即邦胶原海绵更有利于创面愈合。

胶原海绵复合人脂肪干细胞促血管新生

背景:研究发现,脂肪干细胞胶原复合物可促进脂肪干细胞向成熟脂肪细胞分化、成熟,并可促进血管新生。目的:探查胶原海绵复合脂肪干细胞的生物学特性及其对血管新生的影响。方法:(1)实验组将人脂肪干细胞接种于胶原海绵上,以细胞单独培养为阴性对照组,培养24 h后,检测细胞黏附率;培养第2,4,6天,检测细胞增殖与培养液中血管内皮生长因子水平;(2)鸡胚绒毛尿囊膜实验:暴露孵育7 d的鸡胚尿囊膜,分4组,空白组向尿囊膜加入0.2 mL无菌PBS,脂肪干细胞组加入0.2 mL 2×10~8 L^(-1)第3代脂肪干细胞悬液,胶原海绵组加入胶原海绵,复合组加入2×10~8 L^(-1)第3代脂肪干细胞悬液0.2 mL与胶原海绵。孵育7 d后,测定尿囊膜周围微血管计数。结果与结论:(1)细胞黏附率:脂肪干细胞在胶原海绵上的黏附率为(93.04±0.67)%;(2)细胞增殖与培养液中血管内皮细胞生长因子水平:实验组培养第6天的细胞增殖A值高于对照组(P<0.01),培养第4,6天的血管内皮生长因子水平高于对照组(P<0.05);(3)鸡胚绒毛尿囊膜实验:脂肪干细胞组、胶原海绵组、复合组微血管计数高于空白组(P<0.05),复合组高于脂肪干细胞组、胶原海绵组(P<0.05);(4)结果表明:脂肪干细胞与胶原海绵具有良好的生物相容性,两者复合有良好的促进血管新生作用,其机制可能与促进脂肪干细胞增殖与分泌血管内皮生长因子相关。

胶原海绵促进人脐静脉血管内皮细胞生长的体外实验研究

目的探讨胶原海绵促进人脐静脉血管内皮细胞生长的疗效与机制。方法实验组在细胞培养孔中加入含8 U胶原酶的0.2 ml PBS 2 mm×2 mm×2 mm正方体胶原海绵;对照组仅加入含8 U胶原酶的0.2 ml无菌的PBS液体。培养24 h后测血管内皮细胞增殖(MTT实验)、迁移(划痕实验)、及免疫蛋白印迹检测血管生成素1(Ang1)、血管内皮生长因子(VEGF)与整合素(Integraαv)。结果细胞培养后24 h,实验组可以显著促进HUVEC的增殖,增殖率达86%;实验组血管内皮细胞细胞迁移加快,12 h细胞迁移完成,显著高于对照组(P<0.01);实验组VEGF、Ang1及Integraαv蛋白表达明显高于控制组,其中以整合素аv蛋白表达增加尤为显著,增加了80%。结论胶原海绵促进血管内皮细胞增殖与迁移,其中促进迁移的作用较强,机制之一为提高了血管内皮细胞中VEGF、ANG1、Integraαv蛋白表达。

胶原海绵在慢性下肢溃疡中应用临床疗效观察

目的评价胶原海绵促进下肢慢性溃疡愈合的临床疗效及相关作用机制。方法将40例下肢慢性溃疡患者分为治疗组和对照组,每组各20例。治疗组给予以胶原海绵覆盖创面,对照组给予以凡士林纱布覆盖创面,疗程为4周。分别于治疗后2周、4周采用照相法计算创面愈合率;治疗后1、2、4周评价疮面肉芽积分。结果治疗组创面愈合率治疗后4周高于对照组,差异有统计学意义;疮面肉芽积分在2周与4周时达到统计学差异(P<0.05或0.01)。结论胶原海绵可以促进慢性下肢溃疡肉芽生长,提高慢性疮面愈合率。

纤维化胶原蛋白海绵的制备及其自组装工艺

背景:传统的胶原蛋白海绵支架降解速度过快,机械强度低,在应用过程中容易塌陷,很难维持其固有形态,不能满足长期执行细胞支架功能的需要,常见的交联方式又存在细胞毒性或胶原蛋白变性等缺陷。目的:设计一种新的交联工艺,并对工艺条件进行优化,制备出力学性能和耐降解性能良好的胶原蛋白海绵支架材料。方法:通过体外自组装技术对胶原蛋白进行改性处理,制备具有丝状结构的胶原蛋白纤维,采用单因素分析考察初始胶原蛋白质量浓度、磷酸盐终浓度及p H值对胶原蛋白自组装转化率的影响;根据单因素实验结果,采用正交实验得到最佳胶原蛋白自组装工艺条件。将最佳工艺条件制备的胶原蛋白溶液与未进行改性处理的胶原蛋白溶液冷冻干燥得到胶原蛋白海绵,并进行表征。结果与结论:胶原蛋白体外自组装的最佳工艺为:初始胶原蛋白质量浓度为2 g/L,p H=8,磷酸盐终浓度为15 mmol/L,此时自组装转化率最大。扫描电镜显示改性处理胶原蛋白海绵具有纤维丝构成的网状结构,其溶胀率、保水率、机械强度均高于未改性处理胶原蛋白海绵(P<0.05),克服了未改性处理胶原蛋白海绵降解过快的缺陷。

胶原蛋白海绵交联工艺的优化

背景:胶原蛋白材料具有良好的生物相容性和生物可降解性,但在临床应用过程中也暴露出了机械强度低、耐降解性能差等问题。大量研究报道,通过适当的交联可以改善胶原蛋白材料的缺陷,调控其多孔网络结构、溶胀性和降解性。目的:优化胶原蛋白海绵的碳化二亚胺交联工艺,探讨其最佳工艺条件。方法:利用碳化二亚胺对胶原蛋白海绵进行交联改性,得到具有疏松、多孔网络结构的胶原蛋白海绵,同时采用正交实验对交联工艺进行优化,单因素中选择碳化二亚胺浓度(5,10,20,30,40,50,60,70,80,90,100 mmol/L)、交联时间(2,4,6,8,12,16,20,24 h)及交联温度(5,10,15,20,25,30,35℃)为实验因子,以孔径、孔隙率、吸水性、降解率来筛选胶原蛋白海绵交联的最佳工艺。结果与结论:当碳化二亚胺浓度为50 mmol/L、交联温度为20℃、交联时间为6 h时,胶原蛋白海绵的各项性能最为优越,为最优工艺条件,其中平均孔径大小为105μm,孔隙率为79.45%,吸水率为287.14%,降解率最优为15.04%(2 d)。表明通过对胶原蛋白海绵的交联改性,极大提高了海绵的吸水性能和耐降解性能。

胶原海绵对创面愈合的影响

目的 研究胶原海绵对创面愈合的影响及其对创面炎性反应干预机制.方法 将24只大鼠按笼号奇偶数随机分为对照组、实验组,每组12只,造模大鼠背部机械性全层皮肤创面,以0.9％氯化钠溶液纱布（对照组）、胶原海绵（实验组）覆盖创面,隔天更换;造模时及造模后第3、7、14、28天测定创面面积,造模后第3、7天测炎症积分,造模时及造模后第3、7天取创面组织检测TNF-d与IL-6含量.结果 治疗后7d,实验组创面面积[（0.49 ±0.08） cm2]显著小于对照组[（0.92±0.11）cm2];至28 d时,两组创面完全愈合.造模后3、7d,对照组创面肉芽炎症积分分别为（4.51±1.01）分、（2.25±0.62）分,实验组分别为（3.58±0.51）分、（1.66±0.49）分,两组差异均有统计学意义（t=2.85、2.59,均P＜0.01）.对照组造模后7 dTNF-α含量为（512 ±62）ng·L-1·g-1,高于实验组的（434±37）ng·L-1·g-1（=3.74,P ＜0.05）;对照组第3天、第7天时肉芽组织中IL-6含量分别为（2 215 ±314）ng·L-1·g-1、（1 562±174）ng·L-1·g-1,实验组分别为（1 672±161）ng·L-1·g-1、（669±75）ng · L-1·g-1,两组差异均有统计学意义（=5.33、16.33,均P＜0.01）.结论 胶原海绵可以发挥干预创面炎性反应及促进创面血管新生疗效,促进创面愈合.

胶原海绵促进创面止血与血管新生的实验研究

目的:通过对比胶原海绵和无菌纱布的疗效,阐明胶原海绵促进动物创面止血及血管新生的作用。方法:采用兔耳静脉与肝创面止血实验、鸡胚尿囊膜(CAM)血管新生实验与家兔背部全层皮肤缺损模型血管新生实验3种实验方法,分别予可即邦胶原海绵(治疗1组)、艾微停微纤维止血胶原(治疗2组)和无菌纱布(对照组)治疗。观察止血时间、出血量及创面新生血管数。结果:治疗组创面新生血管数均高于对照组(P<0.05);治疗1组创面止血速度及出血量均优于对照组(P<0.05);治疗2组对兔耳静脉出血的止血效果优于对照组(P<0.01),对肝创面止血治疗,出血量少于对照组(P<0.01),出血时间与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:胶原海绵具有促进创面止血及血管新生的作用。