促性腺激素释放激素拮抗剂在诱导HEC-1A子宫内膜癌细胞株生长抑制中MAPK的活性

目的调查促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂Cetrorelix对HEC-1A子宫内膜癌细胞株生长是否具有直接抑制作用,并探讨它的作用机制。方法应用RT-PCR法测定在子宫内膜癌细胞株促性腺激素释放激素及它的受体mRNA的表达。应用5-溴-2'-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2'-deoxyuridine,BrdU)免疫组化标记技术测定细胞增殖变化。应用Western免疫印迹技术测定与信号传导相关的丝裂原活化蛋白激酶/MAPK的蛋白水平。结果 HEC-1A细胞株表达GnRH及其受体。GnRH拮抗剂Cetrorelix在浓度10^(-5)mol/L下,体外作用24h后抑制了HEC-1A细胞的生长。Cetrorelix在浓度10^(-6)mol/L与10^(-5)mol/L之间作用于HEC-1A细胞6h,磷酸化丝裂原活化蛋白激酶/ERK1/2蛋白水平增长,并持续24h,这个增长被提前加入丝裂原或化蛋白激酶/MEK抑制剂U0126而阻止。而磷酸化p38、JNK蛋白水平没有变化。结论结果表明持续的ERK1/2活性在Cetrorelix抑制HEC-1A细胞生长中发挥重要作用。