面神经离断后Cathepsin S基因敲除小鼠小胶质细胞反应的实验研究

目的:研究面神经损伤后CS基因敲除(CS-/-)小鼠小胶质细胞的反应。方法:两种小鼠经脾分别注射CFDA,24h后离断右侧面神经。术后7d,取出含面神经核(FMN)的脑干进行切片,小胶质细胞和面神经元免疫荧光双重染色,作Westernblot分析,并进行CS、CB的RT-PCR定量分析。术后14d、50d,进行小胶质细胞免疫荧光双重染色。分别培养CS-/-和野生型小胶质细胞后进行ATP诱导小胶质细胞位移实验、游走实验、增殖实验。结果:神经离断后,CS和MMP-9在野生型小胶质细胞增生表达,而不出现在CS-/-小胶质细胞。CB仅在野生型面神经元内显著性增加。CFDA和CD3仅在野生型小鼠FMN内出现。CS和MMP-9在野生型小鼠FMN内明显增加,而CB的水平无变化,并且CB在CS-/-小鼠FMN内显著性增加。CS-/-小胶质细胞的位移和游走能力大幅降低,但增殖能力两者无明显差别。结论:面神经离断后,CS的缺失会使单核、淋巴细胞的动员游走能力受到损害,表现出了神经元毒性和吞噬作用。