鼠肝细胞溶酶体膜中性pH p-对硝基苯磷酸酶的电镜细胞化学研究

用电镜细胞化学方法研究了大白鼠肝细胞溶酶体膜的中性pHp—对硝基苯磷酸酶(p-nltrophenyl phosphatase)(p-NPPase)的活性。切片用野田等人报告的原法反应时,溶酶体膜和基质均有酶的活性。加入酸性磷酸酶(AcPase)的抑制剂氟化钠(NaF)后,基质的酶活性被抑制,膜上的则不受影响。相反,当孵育液中含有4,4′-diisothiocyanostilbene-2.2′-disulfonic acid,disodium salt(DIDS)或N—乙基顺丁稀二酰亚胺(N-ethylmaleimide)(NEM)时,溶酶体膜上的酶反应被抑制而基质反应不受影响。如将氟化钠或DIDS或氟化钠和N—乙基顺丁烯二酰亚胺同时加到孵育液中,则膜和基质的反应都消失。这些结果表明溶酶体膜上中性范围的p—NPPase活性可能代表了H^+—ATPase活性。

小白鼠肝细胞和胰腺外分泌细胞的线状溶酶体研究

用电镜酶细胞化学方法,显示了小白鼠肝细胞和胰腺外分泌细胞的线状溶酶体。该溶酶体呈酸性磷酸酶(ACPase)阳性反应,长条状,长度2～8μm,横径0.15～0.3μm,分支或不分支,多蜿蜒走行在细胞器之间。

线状溶酶体的电镜细胞化学观察

用电镜酸性磷酸酶(acid phosphatase ACPase)细胞化学方法,在半薄切片上(厚1.5～2.0μm)观察到小鼠肝细胞、胰腺外分泌细胞、小肠上皮细胞内含有ACPase反应阳性的线状溶酶体(nematolysosome),脾脏的淋巴细胞和胸腺细胞中类似的结构则没有观察到。本文描述了线状溶酶体的形态、分布等特点。