RNA干扰技术失活Rad51基因增加肿瘤细胞放射敏感性的研究

目的研究RNA干扰技术(RNAi)能否失活Rad51基因,从而使肿瘤细胞的放射敏感性增加。方法应用Psilencer U6-1．0质粒为载体在人纤维肉瘤HT1080细胞内表达短链干扰RNA (siRNA)。RNAi效应在蛋白水平用Western blot方法评价；在细胞水平用成克隆分析及放射诱导的凋亡来评价。结果所选3个靶序列均起到失活Rad51的作用,放射诱导的Rad51高表达也能被RNAi抑制。成克隆分析表明实验组存活分数在照射2、4、6、8Gy后,分别是对照组的80．5%、78．6%、69．0%、57．7%(P=0．020)；实验组放射诱导的凋亡在放射后0、6、18、24、48h分别是对照组的1．03、1．43、1．19、1．29、1．33倍(P=0．017)。结论RNAi技术能够使内源性Rad51基因及放射诱导的Rad51高表达失活,从而使人纤维肉瘤HT1080细胞放射敏感性增加；RNAi技术是一种新的研究基因功能和放射增敏的方法。