杨桃多酚氧化酶的部分纯化及其特性研究

杨桃多酚氧化酶粗酶液经过DEAE-Toyopearl650M离子交换柱层析,Butyl-Toyopearl650M疏水柱层析后,被纯化了21.6倍,回收率为45.2%。该酶能迅速地催化焦性没食子酸的酶促氧化反应,而对邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚和绿原酸则完全无催化活性。该酶对焦性没食子酸的Km值为7.92mmol/L,其最适pH为8.0,pH稳定性范围在pH4.0-11.0,最适温度为60℃,热稳定性相对较高,在≥90℃加热30min后仍残留约9%的酶活性。该酶的最佳抑制剂是抗坏血酸,其次是NaHSO3和盐酸-L-半胱氨酸,Cu2+、Zn2+、Ca2+等金属离子对该酶也有一定的抑制作用。

番石榴多酚氧化酶的部分纯化及其特性研究

番石榴PPO的粗提取液经过80％硫酸铵盐析和DEAE—Toyopearl 650M、CM-Sephadex C-50离子交换柱层析分离后，被纯化了约126倍，回收率为16．13％。该酶迅速地催化焦性没食子酸的酶促氧化反应，而对对苯二酚和绿原酸则完全无催化活性。该酶对焦性没食子酸的Krn值为4．6mmol/L，其最适pH为7．5，pH稳定性范围在pH4．0--11．0，最适温度为50℃，热稳定性相对较高，在≥90℃加热10min后仍残留约15％的酶活性。该酶的最佳抑制剂是抗坏血酸和NaHSO3，其次是植酸、盐酸-L-半胱氨酸、柠檬酸，Ca^2＋、Mg^2＋等金属离子对该PPO也有较强的抑制作用。

废食用油转化成柴油机替代燃料的试验研究

食用植物油是通过植物生产转化太阳能而形成的一种可再生资源。它不仅可食用,同时也是石化柴油的替代能源之一。随着人们生活水平的不断提高,每天将产生大量的废食用油。为解决废食用油的排放所造成环境的污染及能源的浪费问题,对废食用油制得柴油机的代用燃料进行了试验研究。提出了用废食用油经酯交换反应制成柴油替代燃料的方法和工艺流程,得到了提高反应产率的最佳工艺参数。研究表明:在反应温度70℃,油醇摩尔比为1∶6,以NaOH为催化剂且浓度为1.0%,反应时间为20～30min时,用废食用油经酯交换反应制得脂肪酸甲酯的产出率为92%。

香蕉果肉过氧化物酶初步纯化及特性研究

[目的]为控制香蕉POD引起的酶促褐变提供理论依据。[方法]采用饱和度70%硫酸铵盐析和DEAE-Toyopearl 650M离子交换柱层析分离纯化果肉POD,测定香蕉酶液中POD活性和蛋白质含量。[结果]香蕉提取酶液中POD被纯化了约7.3倍,回收率为33.8%。香蕉果肉POD对愈创木酚的Km值为5.98 mmol/L,其最适pH值为6.5,pH值稳定性为pH 6.0-10.0,最适反应温度为35℃。盐酸-L-半胱氨酸、抗坏血酸能显著地抑制香蕉果肉POD的活性,亚硫酸氢钠、植酸、柠檬酸也能有效地抑制该酶活性;而Cu^2＋对香蕉果肉POD则有明显的激活作用。[结论]香蕉果肉POD的热稳定性低于香蕉PPO热稳定性,其有效的化学抑制剂与香蕉PPO基本一致。

不同土壤水分条件下草莓果实在模拟贮运中的损伤易感性

通过模拟运输振动实验研究了种植在不同土壤水分条件下草莓果实在贮运中的损伤易感性。试验结果表明,栽培在较高土壤水分条件下的果实含有较高的水分,贮运中果实损伤易感性与果实含水量、果实鲜重、土壤湿度呈显著或极显著相关。模拟振动实验发现:在高土壤水分条件下栽培的草莓果实在振动前、振动后及贮藏后的呼吸速率分别为生长在低土壤水分果实的124.9%、119.0%和133.2%。振动的果实比未振动的果实降低了28%-36%的蔗糖,增加了4.5%-9.8%的果糖和7.1%-10.1%葡萄糖,说明运输振动促进了蔗糖降解为葡萄糖和果糖的水解过程。

稻瘟病菌原生质体制备条件优化实验研究

原生质体的制备一直是现代分子生物学研究的重要内容。以稻瘟病菌作为供试菌株,优化了其原生质体的制备条件。优化的原生质体制备条件包括:使用新鲜的菌丝进行接种;加入玻璃珠一起培养,通过振荡使菌丝体破碎分离以获得更多的生长点;菌悬液继续加入新鲜培养液进行培养;原生质体沉淀时选择3 000r/min离心10min,保证最大限度地收集原生质体。实验证明,通过这4个条件优化后,原生质体的产量有了极大的提高,每毫升酶液可制备10 8～109个原生质体。

CHEF Ⅲ型脉冲电泳仪获得清晰电泳效果的实验探索

CHEF Ⅲ型脉冲电泳仪是微生物种类鉴定、DNA大分子分离等基础科学研究中一个不可或缺的重要工具。该仪器可以快速、高效、准确地分离200 kb到6 Mb的DNA分子。因此,在染色体数目及染色体大小的确定、核型分析、遗传图谱分析、同源性检测分析等方面有关键性的作用。然而在实验过程中要使DNA分子完全、有效地分离,得到清晰、高效的条带却并非易事。本实验基于这些问题,经过一系列的探索研究,找到了稻瘟病菌及分子量标准酵母菌染色体分离所需要的最适条件,该条件能为分离其他真菌染色体提供借鉴与参考。

堆肥中大肠菌群等粪便污染指标菌的残留状况调查

从日本九州地区23处堆肥化设施采集了以牛粪、鸡粪、污泥和餐厨垃圾为原料的堆肥试样29个,调查了大肠菌群等粪便污染指标菌的残留状况。结果表明,使用DESO培养基有11个试样被检出大肠菌群,检出率达38%,菌数在102~106 cfu.g-1的范围。使用API 20E鉴定系统对4个试样中的21个分离纯化菌株进行了菌种鉴定,发现有大肠菌群属的Escherichia coli、Escherichiavulneris、Pantoea sp.和Buttiauxella agrestis,以及非大肠菌群属的Serratia marcescens等肠内细菌科细菌。采用血清凝集试验对5株E.coli的病原性检测结果均为阴性。进一步针对6处堆肥设施的堆肥发酵过程中大肠菌群的消长追踪发现,大肠菌群数从原料到成品出现了逐渐减少直至消失、暂时消失、未完全消失、完全未检出4种走势,显示即使堆肥发酵温度在60℃以上,大肠菌群也有可能通过交叉污染等途径残留在堆肥成品中。