二乙氧基乙醇诱导大鼠生精细胞凋亡及其分子机制研究

目的 观察二乙氧基乙醇 (2 - EE)诱导大鼠生精细胞凋亡及Bcl- 2家族、Fas系统和Caspase -3与细胞凋亡过程的作用 ,探讨 2- EE诱导大鼠生精细胞凋亡的分子调控机制。方法 选用SD大鼠 (8只 ,分 3个实验组和 1个对照组 ,每组 2只 )以 80 0mg kg剂量分别灌胃 1、3和 5d。提取一侧睾丸组织DNA用于DNA片段分析 ,另一侧睾丸组织RNA用于半定量RT -PCR分析Bax、Bcl -2、Fas、Fas L和Caspase- 3基因mRNA水平变化。用QuantityOne 4 1 1软件定量各条带亮度 ,以GAPDHRT- PCR定量结果为内对照得出各个基因mRNA相对定量值。结果 2 EE染毒后第 1天 ,大鼠睾丸细胞DNA片段出现明显的“DNALadder”。RT- PCR电泳结果结合QuantityOne 4 1 1定量结果显示 :Bax与FasmRNA水平在染毒后每天均升高 ,以第 3天最为显著 ,并且Bax与Bcl- 2mRNA水平的比值也在染毒后上升。结论 二乙氧基乙醇可以诱导生精细胞凋亡 ,其分子途径可能与Bax家族和Fas系统有关。

人造矿物纤维对细胞DNA损伤作用的体外研究

目的比较研究１０种人造矿物纤维（ＭＭＭＦ）对人肺泡上皮细胞（Ａ５４９细胞）ＤＮＡ的损伤及修复作用。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ），用单细胞凝胶电泳法，以Ａ５４９细胞作为靶细胞，测定了细胞ＤＮＡ链断裂、损伤后修复及ＤＮＡＤＮＡ链间交联。结果１０种ＪＦＭ纤维都可引起不同程度的ＤＮＡ链断裂、ＤＮＡＤＮＡ链间交联及抑制ＤＮＡ损伤后的修复功能。综合分析发现：微细玻璃纤维的遗传毒性最强，硅灰石的遗传毒性最低。它们的作用程度均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维均具有一定程度的体外遗传毒性，但均低于ＵＩＣＣ温石棉Ｂ。

人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞的毒作用研究

目的比较１０种人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞毒作用的差异。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ纤维），在体外用豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）作为靶细胞，分别对ＪＦＭ纤维作用于ＡＭ后超氧阴离子自由基（Ｏ－２）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的产生，谷胱甘肽（ＧＳＨ）及细胞内游离Ｃａ２＋浓度的变化进行了测定。结果１０种ＪＦＭ纤维中，大多数都可引起Ｏ－２和Ｈ２Ｏ２的产生增多、ＧＳＨ含量下降及细胞内游离Ｃａ２＋浓度升高，但其作用均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维的一般细胞毒性均低于温石棉。这些人造矿物纤维虽然作为石棉的代用品使用，但对机体仍会产生一定的有害作用。