灵芝提取物对神经元缺氧复氧损伤的保护作用及其机制的离体研究

目的:研究灵芝提取物(GLE)对原代大鼠皮层神经元氧糖剥夺-再复氧(OGD/R)损伤模型的影响,在细胞水平探讨GLE神经保护作用的机制。方法:新生SD大鼠的皮层神经元原代培养至第7d,用GLE预处理神经元OGD/R模型。选取OGD/R后的0h、3h、6h、12h、24h、48h和72h作为观察点,观察GLE干预后对各个时点的细胞形态学、细胞毒作用、细胞线粒体活性、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达量的影响。结果:GLE(0.1、1、10mg/L)能明显减少神经元LDH的释放,提高线粒体活性。流式细胞术结果证实了GLE能抑制神经元OGD/R损伤导致的凋亡,这种作用甚至能持续至OGD/R后的72h。GLE(0.1、1、10mg/L)下调caspase-3、caspase-8蛋白的表达,GLE(10mg/L)还能下调caspase-9蛋白表达。结论:GLE对OGD/R诱导的神经元损伤有一定的保护作用,可能是有效防治急性缺血性卒中的神经保护药物。

日本灵芝对Ⅱ型变态反应的抑制作用

用Ｆｏｒｓｓｍａｎ皮肤血管炎反应、Ｆｏｒｓｍａｎ休克及反向皮肤过敏反应等模型研究了灵芝对Ⅱ型变态反应的影响。结果表明，灵芝６００ｍｇ／ｋｇｉｐｑ１２ｈ×３次能明显抑制豚鼠Ｆｏｒｓｍａｎ皮肤血管炎反应，缓解Ｆｏｒｓｍａｎ休克的体症变化；灵芝６００ｍｇ／ｋｇ、３００ｍｇ／ｋｇｉｐｑ１２ｈ×３次及８００ｍｇ／ｋｇｐｏｑｄ×６天均可使大鼠反向皮肤过敏反应的皮肤肿胀率显著小于对照组。以上结果说明灵芝可抑制Ⅱ型变态反应。

灵芝防治神经系统疾病的实验研究进展

对近年来灵芝及其有效成分的神经保护作用及机制进行综述,阐明了灵芝防治神经系统疾病的临床应用前景,为其临床应用提供一定依据。

辅酶Q_(10)改善大鼠微循环障碍的实验研究

目的研究辅酶Q10 改善大鼠微循环障碍的作用。方法SD大鼠12只 ,实验组、对照组各6只。用10%高分子右旋糖酐 (MW>20万 )复制大鼠微循环障碍模型 (2～3ml/100gB .W -1·d-1) ,经口灌服CoQ10,剂量1mg·100gB .W-1·d-1,对照组用等量盐水代替。3d后作肠系膜微循环活体观察。用活体微循环显微电视电脑系统观察测量微动脉、微静脉口径、RBC流速、RBC聚集、白细胞黏附 ,并测血浆乳酸含量与乳酸脱氢酶 (LDH)活力。结果经口灌服CoQ103d后心率明显降低[实验组(326±19)次/min ,对照组(411±35)次/min,P<0.05] ,毛细血管红细胞流速明显加快[(442±102)μm/s与(210±80)μm/s,P<0.05] ,红细胞聚集积分明显减少 (1.60±0 .2与2.8±0.3,P<0.05)。白细胞黏附数降低[(10.2±4.0)个/min与(18.6±4.8)个/min,P<0.05]。与此同时血浆乳酸含量[(2.02±0.15)mmol/L与(10.57±0.17)mmol/L]和LDH[(1431.55±376.87)μ/L与(4641.67±193.42)μ/L]均有非常显著降低。结论CoQ 10 具有治疗微循环障碍 ,改善细胞缺氧 ,减轻细胞损伤的作用。

日本灵芝对小鼠脾细胞产生白细胞介素-2的影响

本实验研究日本灵芝对小鼠脾细胞产生白细胞介素-2(IL-2)的影响。结果表明在试管内氢化考的松0.025～1μg/ml及环胞霉素A 0.05μg/ml可明显抑制小鼠脾细胞产生IL-2,P<0.01。灵芝在试管内能明显对抗氢化考的松及环胞霉素A的抑制作用而促进IL-2产生增加,其作用与药物浓度有关,10μg/ml以上有显著作用,P<0.01。灵芝不同浓度与氢化考的松同时对脾细胞进行预处理8 h后,灵芝可以明显减轻氢化考的松的抑制作用。整体研究亦证明灵芝可以促进脾细胞产生IL-2,即使在同时用免疫抑制剂的条件下,IL-2的产生仍有显著增加。

日本灵芝对抗体形成细胞及变态反应的影响

日本灵芝不同制剂10～1000μg/ml在试管内对小鼠溶血空斑形成细胞(PFC)有明显抑制作用。整体给药125及500mg/kg,po qd×4能显著抑制小鼠脾脏内PFC数。灵芝500mg/kg po与环磷酰胺10mg/kg ip的抑制效率相仿。对2,4-二硝基氯苯(DNOB)引起小鼠接触性皮炎、绵羊红细胞(SRBC)引起的小鼠迟发型变态反应以及卵蛋白引起的兔子Arthus反应,灵芝均有抑制效果。对反应素引起大鼠被动皮肤过敏反应,灵芝亦有轻度的抑制作用,但无显著差别。

日本灵芝的护肝作用

日本产灵芝的热水提取物对D-氨基半乳糖联合内毒素所致小鼠肝脏损害、大鼠初代培养的肝细胞在试管内受四氯化碳引起的损害以及整体小鼠经四氯化碳中毒后引起的肝脏损害均显示明显的保护作用。

日本灵芝对自然杀伤细胞的影响

本文研究日本人工培育的灵芝(Ganderma lucidum Fr.Karst)在试管内及整体对小鼠脾脏内自然杀伤细胞(NK Cells)活性的影响。结果表明在试管内灵芝热水提取物对NK细胞活性有轻度抑制作用,对靶细胞Yac-1细胞无直接杀伤作用;整体研究表明灵芝在体内可提高NK细胞活性,以300mg/kg qd×6的作用较显著,对经环磷酰胺抑制的NK细胞活性,灵芝有提高趋势,但无统计学意义。

辅酶Q_(10)对体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞凋亡和增殖的影响

目的 :研究辅酶Q10 抑制血管内皮细胞凋亡和增殖的作用及其可能机制。方法 :用血清药理学方法和流式细胞仪法检测体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞 (bEnd .3 )中不同浓度CoQ10 对细胞凋亡和增殖的变化。用免疫细胞化学ABC法观察Fas蛋白及Bcl-2蛋白表达的变化。结果 :与对照组比 (加不含药血清 ) ,在bEnd .3细胞培养中加入 50 μL、2 5μL、12 5μL含CoQ10 的血清组细胞凋亡明显抑制 (P <0 0 5)。免疫细胞化学检验结果证明 ,此时Fas蛋白表达明显减弱 ,而Bcl-2蛋白表达明显增强 (P <0 0 5)。但CoQ10 对细胞增殖影响不显著。结论 :一定浓度的CoQ10 能通过上调Bcl-2蛋白和下调Fas蛋白表达抑制小鼠微血管内皮细胞凋亡 。

灵芝片对肺癌的临床疗效观察

目的 :研究日本产灵芝片对肺癌患者的临床效应。方法 :2 9例主要为Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者随机分组用灵芝片和安慰剂。观察灵芝对肺癌患者免疫调节、血液流变学、临床治疗效果等方面影响。结果 :灵芝组血清肿瘤坏死因子 (TNF)水平由 17.7± 4.3升至 2 8.7± 6 .6 pg/ml,明显提高 ;对照组血清可溶性白介素 2受体 (sIL 2R)水平随病程发展明显增高 ,而灵芝组保持稳定 ;灵芝组部分血液流变学指标下降。本临床实验病例不能说明灵芝能直接缩小肺癌病灶 ,但能够改善患者的全身状况。常规剂量下 ,未观察到肝、肾功能损害等严重毒副作用。结论

灵芝对小鼠的镇痛、镇静及其对耐力的作用

灵芝对化学刺激、热板刺激引起的小鼠疼痛都具有镇痛作用,化学刺激镇痛作用的ED_(50)为4.98g/kg;灵芝能减少小鼠的自发活动,其ED_(50)为2.65g/kg,此外尚能增强戊巴比妥的镇静作用;3.5g/kg能显著延长小鼠的游泳时间,5.0g/kg和7.5g/kg可提高小鼠的耐缺氧能力。

灵芝对D-半乳糖亚急性损伤的预防作用

在Ｄ半乳糖所致小鼠亚急性损伤引起衰老的模型上，以脑内ＭＡＯＢ活性和尾腱中羟脯氨酸（Ｈｙｐ）含量为指标，检测了灵芝的作用。结果Ｄ半乳糖可明显提高实验小鼠ＭＡＯＢ的活性和Ｈｙｐ含量，而２５０ｍｇ／ｋｇ和５００ｍｇ／ｋｇ的灵芝可有效的抑制Ｄ半乳糖的作用，降低ＭＡＯＢ的活性和Ｈｙｐ含量。

灵芝加降压药治疗难治性高血压时血糖、血脂、微循环和血液流变性的变化及意义

用各种血压测定法及活体微循环观察法发现，４０例难治性高血压病人（治疗组２７例，对照组１３例）口服灵芝３个月后在大动脉血压、小动脉血压和毛细血管血压下降的同时，病人血粘度（高切、低切时的全血粘度及血浆比粘度）、红细胞压积和红细胞沉降率明显下降（Ｐ＜０．０５），甲襞微血管数增多、口径扩大、流速加快（Ｐ＜０．０５），血糖明显下降（Ｐ＜０．０５），但胆固醇、甘油三酯及高密度脂蛋白下降不明显（Ｐ＞０．０５）。上述变化间相关性不显著（Ｐ＞０．０５），说明上述改变是通过相互独立的途径取得。因而认为，灵芝对治疗高血压伴高粘血症和／或高血糖的病人尤为合适，且对预防或减轻高血压并发症有益。

灵芝对阿霉素所致大鼠细胞毒性的影响

研究灵芝（Ganodermalucidum，FrKarst）对阿霉素所致大鼠细胞毒性的影响。大鼠ig灵芝62.5、125、250、500mg／kgqdx14d；第15d开始小阿霉素3mg／kg，2d1次，共4次，间隔天ig同前剂量灵芝至次，并另设正常对照组和阿霉素损伤模型组。结果：125、250、500mg/kg灵芝组能显著提高由于注射阿霉素所引起的大鼠外周血白细胞和血小板减少（p＜001）；灵芝250及500mg／kg组对阿霉素所致的大鼠心电图改变也有对抗作用（P＜001）。经心、肝、肾病理检验发现，灵芝250及50Omg／kg能显著减轻阿霉素引起的心肌、肝脏和肾小管上皮细胞的浊肿与空泡变性程度。结论：灵芝对阿霉素所致的大鼠细胞毒性有保护作用。

罗布麻提取物对神经元缺氧复氧损伤的保护作用

目的研究罗布麻提取物(Apocynum venetumL.Extract,AVLE)对神经元缺氧复氧损伤的保护作用。方法将培养7天的新生SD大鼠皮层神经元细胞随机分为空白对照组、模型组和AVLE低、中、高浓度组。除空白对照组外,其余各组制作原代培养皮层神经元氧糖剥夺(OGD)再复氧模型,AVLE各浓度干预组分别加入浓度为50μg/ml、500μg/ml、5 000μg/ml的AVLE;分别观察各组OGD复氧后的0h、3h、6h、12h、24h、48h和72h等时间点细胞形态学、细胞毒作用、细胞线粒体活性、细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达量的变化情况。结果与模型组比较,AVLE能明显减少神经元LDH的释放,提高线粒体活性,对OGD神经元的保护呈一定的浓度与时间依赖关系。AVLE能显著抑制OGD神经元的凋亡,有效抑制Bax蛋白的表达,上调bcl-2的表达。结论 AVLE对OGD诱导的神经元损伤有一定的神经保护作用,可能成为新颖有效的防治急性缺血性卒中的神经保护药物之一。

灵芝对离体豚鼠气管平滑肌的作用

实验研究灵芝对离体豚鼠气管平滑肌的作用。结果表明,其水浸液具有轻度松弛作用。

灵芝对佐剂性关节炎的作用

腹腔注射灵芝１ｇ／ｋｇ，可使佐剂性关节炎（ａｄｊｕｖａｎｔａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＡＡ）大鼠急性炎症和继发性炎症明显减轻，ＩＬ－２和ＩＬ－１的产生有一定恢复，淋巴细胞增殖反应低下状态有一定改善。

灵芝对阿霉素所致自由基损伤的预防作用

在阿霉素引起细胞自由基损伤的大鼠模型上观察了灵芝的保护作用。隔日ｉｐ阿霉素３ｍｇ／ｋｇ４次制造细胞自由基损伤的大鼠模型，以实验大鼠血液与心脏、肝脏中ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ活性为观察指标。结果表明阿霉素可明显降低实验大鼠血液与心脏、肝脏中ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ活性。ｉｇ灵芝两周可抑制阿霉素的这一作用并呈现一定的剂量依赖关系。灵芝对血液中ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ活性不仅可使之恢复至原水平，甚至有所提高。而对心、肝组织，灵芝需在较大剂量才可使其ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ活性恢复至接近原水平。表明灵芝可在一定程度上抑制阿霉素引起细胞自由基损伤作用。

灵芝对小鼠空间分辨学习与记忆的影响

本文用Y-型迷宫法测试小鼠空间分辨行为。实验结果表明,每日ig灵芝2.58/kg共7d,有明显促进学习的作用。每日ig灵芝2.5g/kg共7d或ig灵芝5g/kg共7d都能显著地拮坑东莨菪碱所致学习障碍的作用。此外,学习训练后立即ig灵芝2.5g/kg或ig灵芝5g/kg也有明显地改善东莨菪碱损害记忆巩固的作用。

灵芝对体外培养的微血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的研究不同剂量灵芝对体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞的增殖与凋亡的影响。方法在体外培养肺微血管内皮细胞中做细胞增殖曲线 ,用流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡的变化。结果培养中加入灵芝 (2.75mg/ml)后第4d开始细胞增殖 ,第7d达高峰(与阴性对照比 )。流式细胞仪分析 ,各剂量组G2-M期细胞明显增多 (与阴性对照比 ) ,但细胞凋亡百分率无显著变化。结论灵芝能促进体外培养的肺微血管内皮细胞增殖作用 ,此作用对保护内皮损伤。