流行性乙型脑炎病毒E蛋白上与病原性相关的氨基酸

目的 分析比较乙脑病毒弱毒株at222与其强毒株AT31全基因核苷酸序列，探索与乙脑病毒病原性相关的氨基酸。方法 由日本基因公司合成多核苷引物，以RT-PCR合成cDNA，筛选出阳性克隆。用Sanger法测定at222与AT31株的全基因序列。结果 全基因序列分析比较显示，非编码区3个不同核苷苷酸均出现在3’－端。编码蛋白氨基酸变化分别是E蛋白上3个，NSI蛋白上3个，NS蛋白上2个，NS4a蛋白上1个，NS4b蛋白上1个，NS5蛋白上2个。结论 强弱毒株间2个变异部位与以前报道一致，且其中AT31的E138位点上E氨基酸为强毒株JaGAr01、JaOArS982、Beijing－l和SA14所共有，而at222E138位点上K氨基酸为弱毒株SA14－14－2所共有。E蛋白上E138、E176位点上氨基酸决定了乙脑病毒病原性。

流行性乙型脑炎病毒减毒株at222的生物学特性

目的 分析乙型脑炎病毒减毒株ａｔ２２２生物学特性，并与亲代野生强毒株ＡＴ２１进行比较。方法 ａｔ２２２株和 ＡＴ３１株在伊蚊细胞Ｃ６／３６上繁殖，培养上清用作病毒液，在Ｖｅｒｏ细胞上以病毒蚀斑法测定病毒滴度，以 小鼠脑内感染法测定其神经毒力。结果ａｔ２２２株在蚊细胞上生长缀慢，但仍可达到与其亲代强毒株相似的滴度， 即ｌ０８ＰＦＵ／ｍｌ。在Ｖｅｒｏ细胞上形成蚀斑比其亲代野生强毒株ＡＴ３１明显小，脑内感染小鼠不致死，而ＡＤＩ株却表现 出了极强的神经毒力。结论 对乙型脑炎病毒减毒株出ａｔ２２２的生物学特性进行了全面分析，为研究和开发乙型脑炎 疫苗提供理论依据。

流行性乙型脑炎病毒活疫苗株SA14-14-2基因稳定性研究

目的 通过研究流行性乙型脑炎活疫苗减毒株基因稳定性 ,从分子水平证实流行性乙型脑炎活疫苗的遗传稳定性。方法 分析流行性乙型脑炎活疫苗主种子、工作种子及其相应的疫苗病毒E蛋白基因核苷酸和氨基酸序列 ,并与其强毒株和基因库中乙脑病毒减毒株 (AF315 119)比较。结果 乙脑活疫苗主种子、工作种子及其相应的疫苗病毒的E蛋白基因核苷酸序列完全相同。这些病毒E蛋白的氨基酸序列与基因库中乙脑病毒弱毒株 (AF315 119)比较显示第E4 4 7位点氨基酸有差异。结论 乙脑病毒活疫苗减毒株遗传学特性稳定。