苹果LEAFY同源基因的cDNA克隆与表达分析

从苹果的果台枝顶芽中克隆了两个长约 1 4kb的cDNA片段 ,分别定名为AFL1和AFL2。它们的碱基序列在编码区有 90 %的同源性 ,但在 3 末端非编码区仅有约 6 0 %的同源性。它们表达的肽链氨基酸序列与小叶杨、大豆、矮牵牛等有 70 %以上的同源性 ,与番茄、金鱼草、拟南芥有近 70 %的同源性 ,证明它们是LFY的同源基因。RT -PCR的结果表明 ,生长期AFL2在萼片、子房、根、茎、叶以及果台枝顶芽中都有表达 ,而AFL1只在果台枝顶芽中表达 ;在不同发育时期的果台枝顶芽中 ,AFL1在顶芽停止营养生长转向生殖生长以后才清晰表达 ,而AFL2在生长期 6～ 10月都有表达。因此认为苹果中的这两个LFY同源基因虽有共同的起源 ,但是在功能上存在差异 ,在花和营养组织的发育中起不同的作用。DNA印迹分析表明 ,在苹果属及近缘的梨属植物中LFY同源基因是多拷贝的。