慢性丙型肝炎患者HCV核心蛋白基因及其肽链的序列分析

为探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染在肝癌发生中的作用，从３５例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性的非甲非乙型肝病患者血清中提取ＨＣＶ－ＲＮＡ，经随机引物逆转录合成ｃＤＮＡ，在病毒的Ｃ基因区进行分型，再于病毒５＇－末端至Ｅ１区间以多对引物进行巢式ＰＣＲ扩增，其最终产物（４２５ｂｐ和６２１ｂｐ）分别连接ｐ－ＧＥＭ－Ｔ载体，在大肠杆菌中表达后进行测序分析。ＨＣＶ基因型表现为８２％Ⅱ型，９％Ⅲ型及９％Ⅱ＋Ⅲ混合型。核心蛋白基因（５７３ｂｐ）与已报道的其他株比较，其核苷酸同源性为：慢性肝炎株９３．０±２．４％，肝癌株９１．４±１．５％；氨基酸同源性为：前者９３．９±０．８％，后者９１．０±１．６％；核心蛋白基因中核苷酸置换在肝癌株较明显地高于慢性肝炎株。研究结果提示，ＨＣＶ核心蛋白基因的错义突变，与ＨＣＶ的慢性持续感染及肝癌发生的关系密切。