红细胞生成素介导的早期信号传递的研究

把c-fos启动子连接于Photinus Pyralis荧光素酶基因的上游,以荧光素酶基因作为报道基因,构成pfosluc2质粒,然后把此质粒导入对红细胞生成素(EPO)刺激有反应的小鼠红白血病细胞系ELM-I-1细胞内,检测EPO介导的早期信号传递过程。以Lipofectin为介质把pfosluc2质粒DNA导入ELM-I-1细胞,测定报道基因荧光素酶活性,观察转导细胞c-fos基因的表达。导入pfosluc2的细胞,可检测出光子量(3202±80/1.5×10~5细胞),光子量与检测的转导细胞数呈线性关系。经EPO刺激后,光子量明显增高(5869±321/1.5×10~5细胞)。EPO刺激后光子量的增加,存在剂量依赖性和时间相关性。本实验观察说明,EPO在刺激靶细胞时的信号传递,可能通过细胞核内c-fos基因的表达而起作用。此外,本实验介绍的方法敏感、简便,能用于快速地检测EPO或其它细胞因子的早期信号传递过程。