第30届日本肝胆胰外科学会年会胆道肿瘤研究进展解析

第30届日本肝胆胰外科学会年会于2018年6月7-9日在日本横滨隆重举行。笔者整理本次大会中胆道肿瘤领域最新研究进展与动态，涵盖胆道肿瘤外科30年发展回顾与肝胆胰外科未来展望：建立胆囊癌前瞻性数据库，从大数据角度优化早期胆囊癌治疗策略；胆道恶性肿瘤新辅助和辅助治疗临床研究进展：胆道恶性肿瘤基础研究进展等方面内容，以期与国内同道分享。

CYP3A5基因多态性与摄盐水平的交互作用对日本男性血压的影响

细胞色素P450酶系（Cytochrome P450,CYP）3A5酶参与原发性高血压的致病机制,CYP3A5基因可能是导致盐敏感性高血压的重要候选基因之一.本研究在日本男性人群中探讨CYP3A5/A6986G多态性与血压的关联,研究基因型与个体摄盐水平的交互作用对血压的影响,旨在通过探索基因-环境交互作用对血压的影响,分析CYP3A5基因对盐敏感性高血压的作用.

核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响

目的 探讨核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对db/db小鼠肝脏胰岛素抵抗的影响及机制.方法 采用随机数字表法将24只9周龄健康雄性db/db小鼠（体质量44.5～48.2 g）随机分至对照组（n1=12）和实验组（n=12）,实验组小鼠尾静脉注射核糖体蛋白S6激酶1短发夹RNA重组基因腺病毒,对照组尾静脉注射含U6启动子空载体腺病毒.注射病毒后第6天,对照组和实验组采用随机数字表进一步分为进食组（n=6）及空腹组（n=6）.在进食和空腹状态处死小鼠,提取肝脏,应用Western blot法观测胰岛素受体底物-1和胰岛素受体底物-2蛋白表达水平.提取肝脏总RNA,应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测糖异生基因mRNA表达水平.经尾静脉取血,采用酶联免疫吸附法测定胰岛素水平,采用比色法检测游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇水平.组间比较采用单因素方差分析.结果 与对照组相比,进食及空腹状态时,实验组胰岛素受体底物-1、胰岛素受体底物-2蛋白表达均增加.在空腹状态下,实验组与对照组相比,糖异生基因过氧化酶体增殖物受体共激活因子1α（分别为0.072±0.024和0.028±0.012）、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（分别为23.8±4.0和12.3±2.4）、葡萄糖6磷酸酶（分别为3.0±0.8和1.5±0.4）mRNA表达均下降（F值分别为7.58、5.76、9.15,均P＜0.01）.对照组和实验组胰岛素水平无显著差异（t=1.26,P＞0.05）.空腹及进食状态下,实验组胆固醇水平低于对照组（F=15.48,P＜0.01）.与空腹对照组相比,空腹实验组游离脂肪酸降低（t=2.56,P＜0.05）.结论 db/db小鼠肝脏核糖体蛋白S6激酶1基因沉默后,空腹糖异生和血清游离脂肪酸水平下降,胰岛素受体底物-1和胰岛素受体底物-2蛋白表达增加,提示营养过剩条件下核糖体蛋白S6激酶1可能在肝脏胰岛素抵抗中发挥重要作用.

核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对小鼠非酒精性脂肪性肝病的影响

目的 探讨核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对db/db小鼠非酒精性脂肪性肝病的影响及其作用机制.方法 根据随机数字表将12只体质量44.5～48.2 g的9周龄雄性db/db小鼠随机分至对照组（n=6）和实验组（n=6）.实验组db/db小鼠尾静脉注射制备的核糖体蛋白S6激酶1短发夹RNA重组基因腺病毒,对照组db/db小鼠尾静脉注射含U6启动子空载体腺病毒.在注射病毒后第6天处死小鼠获取肝脏,提取肝脏蛋白,利用Western blot法观察其中胰岛素受体底物1、胰岛素受体底物2、蛋白激酶B及其丝氨酸473蛋白的表达;提取肝脏总RNA用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测比较2组参与肝脏脂肪酸合成基因mRNA的表达.处死2组小鼠前1 d禁食16 h后经尾静脉取血,采用比色法检测游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇水平.组间数据比较采用t检验.结果 db/db小鼠注射病毒后6 d,苏木素-伊红染色显示实验组肝细胞胞质含脂肪滴较对照组减少,脂肪肝得到改善.Western blot检测显示实验组核糖体蛋白S6激酶1蛋白表达被抑制,与对照组相比差异有统计学意义（分别为0.12±0.01和0.87±0.06,t=5.36,P＜0.05）;实验组胰岛素受体底物1、胰岛素受体底物2、蛋白激酶B丝氨酸473的蛋白表达均较对照组增强（均P＜0.05）.和对照组相比,实验组参与脂肪酸合成的基因固醇调节元件结合蛋白1c（分别为2.33±0.29和1.34±0.39,t=3.46,P＜0.01）、脂肪酸合成酶（分别为7.8±1.2和3.4±0.4,t=4.67,P＜0.01）、硬脂酰辅酶A去饱和酶1（764±116和535±54,t=6.12,P＜0.01）mRNA表达均明显下降.血清生化测定结果显示和对照组相比实验组脂肪酸下降（t=2.64,P＜0.05）,胆固醇水平降低（t=4.25,P＜0.01）,甘油三酯组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论在营养过剩的条件下,肝脏核糖体蛋白S6激酶1过度激活,可能通过负反馈引起肝脏胰岛素信号传导下降、上调脂代谢关键调控基因固醇调节元件结合蛋白1c表达而参与了肝脏胰岛素抵抗和脂肪肝的发生.