质谱分析在遗传代谢性疾病临床检验诊断中的应用

质谱分析技术已被公认为是代谢性疾病化学诊断的有用手段。气相色谱质谱联用法可以对130余种代谢疾病进行筛查和化学诊断,串联质谱法可同时筛查30余种脂肪酸代谢异常疾患和部分氨基酸代谢异常,因而被世界各国广泛用于新生儿先天性代谢疾病的筛查。应用质谱分析技术分析诊断遗传代谢疾病的实验室逐年递增,但其实验操作较为繁杂。临床实验室国际标准化管理是保证质谱分析技术为临床检验服务的前提。网络化实验室体系可以简化实验室的操作,保证良好的实验室管理。

质谱分析技术在儿童代谢性肝病诊断方面的应用

质谱分析技术已被公认为代谢性疾病化学诊断的有用手段,气相色谱质谱连用法可以对130余种代谢疾病进行筛查和化学诊断,串联质谱法可对30余种脂肪酸代谢异常疾患和部分氨基酸代谢异常同时筛查,作为先天性代谢疾病的新生儿筛查手段被广泛的应用在世界各国。代谢性肝病涉及不同的代谢途径的紊乱,多种儿童代谢性肝病都有疾病的特征性代谢谱存在,因此通过质谱分析的代谢组学研究将会对这类疾病的临床诊断非常有用。

2甲基3羟基丁酰辅酶A脱氢酶缺陷症一家系基因突变分析

目的对一个2甲基3羟基丁酰辅酶A脱氢酶缺陷症（MHBDD）家系进行基因突变分析，为疾病的诊断及遗传咨询提供依据。方法采集患儿及父母外周静脉血，分别提取，e2,RNA及基因组DNA。应用RT—PCR方法扩增ACATl基因全编码区序列。应用PCR方法扩增ACATl基因启动子序列及HADH2基因全部外显子编码区及两侧内含子区域。所有扩增产物，均进行直接测序并与参考序列进行比对。结果患儿1岁1个月，主要表现为精神运动发育迟缓，就诊时尚不能独站，生化检测血乳酸升高（3．19mmol／L），头颅核磁提示髓鞘发育延迟，气相色谱质谱检测提示乙酰乙酰辅酶A硫解酶缺陷症。ACATl基因全编码区及启动子区域未见异常突变位点，HADH2基因第4外显子发生c．388C〉T（P．R130C）半合子改变，使编码的第130位精氨酸变成了半胱氨酸。患者母亲该位点为杂合改变，父亲正常。结论通过基因突变分析确诊了1例2甲基3羟基丁酰辅酶A脱氢酶缺陷症患儿，P.R130C是该患儿的致病突变，为准确的遗传咨询提供了可能。

遗传性代谢病高危婴幼儿4710例尿素酶预处理-气相色谱-质谱技术筛查分析

目的：通过尿素酶预处理-气相色谱-质谱法（UP-GC-MS）检测4710例高危婴幼儿遗传性代谢病（IMD）及代谢紊乱的发病率，为临床诊断和治疗提供依据。方法对高危婴幼儿尿液样本经过去尿素、加内标、除蛋白、真空干燥、三甲基硅烷基衍生等处理后，应用尿素酶预处理-气相色谱-质谱联用仪分析尿液中有机酸、氨基酸、糖类、多醇、嘌呤和嘧啶等成分，以健康儿童色谱质谱检测值作为参考值，分析质谱检测结果，并进行代谢分析，最后结合临床高危表现和一般生化检测及其他特殊检查等临床资料进行代谢诊断。结果4710例高危儿中，确诊 IMD 98例（2.1％）、疑诊 IMD 患儿326例（6.9％）、代谢异常患儿2610例（55.4％），其余1676例未见异常。其中确诊 IMD 包括甲基丙二酸尿症57例，丙酸血症12例，戊二酸血症7例，高苯丙氨酸血症、枫糖尿症和多种羧化酶缺陷症各5例，异戊酸血症4例，4羟基丁酸尿症3例。结论 UP-GC-MS 是诊断高危婴幼儿 IMD 和代谢紊乱的有效方法，广东地区常见的 IMD 为甲基丙二酸尿症、丙酸血症、戊二酸血症、高苯丙氨酸血症、枫糖尿症和多种羧化酶缺陷症，检测结果可为患儿的诊断和治疗提供有效指导。

儿童L-2-羟基戊二酸尿症4例临床特征及基因诊断

目的 探讨儿童L-2-羟基戊二酸尿症（L-2-HGA）的临床特征及基因诊断依据.方法 对2015年4月至2018年3月首都医科大学附属北京儿童医院诊治的4例L-2-HGA患儿的临床表现、辅助检查结果进行回顾性分析,并对其进行3个月 ～3年2个月的随访.结果 本组患儿男1例,女3例,其中2例为同胞姐弟,起病年龄8个月 ～3岁.4例患儿均以抽搐为首发症状,发育里程碑均正常,其中3例渐出现智力发育停滞,3例走路稍欠稳,2例持物轻抖,2例锥体束征阳性.4例患儿头颅磁共振成像（MRI）均示双侧大脑皮质下白质、基底核区及小脑齿状核对称性异常信号,1例有脑萎缩样改变.3例气相色谱-质谱法（GC/MS）尿有机酸分析均提示2-羟基戊二酸水平明显升高.4例患儿采用目标捕获高通量测序法均检测出L2HGDH基因的致病性变异,例1检测出复合杂合变异c.845G〉A（p.Arg282Gln）及c.800_801delCA（p.Ser267Ter）,例2、例3检测出纯合错义变异c.584A〉G（p.Tyr195Cys）,例4检测出纯合移码变异c.407delA（p.Lys136SerfsTer3）,其中,c.800_801delCA及c.407delA为未见报道的新变异,家系验证显示4例患儿的父母均为杂合携带者.随访研究显示2例未接受特殊治疗的患儿病情相对稳定,另2例接受大剂量维生素B 2和左旋肉碱治疗的患儿无智力倒退,未再抽搐,共济失调表现略有好转.结论 智力发育迟滞、抽搐发作和共济失调是L-2-HGA的常见临床表现,头颅MRI示双侧大脑皮质下白质、基底核和小脑齿状核对称性异常信号是本病的特征性影像学表现,尿2-羟基戊二酸水平显著升高是本病的基本特点,基因诊断应作为确诊本病的金标准,大剂量维生素B2和左旋肉碱治疗可能对部分病例有效.

急诊患者遗传代谢病的快速识别与急救

遗传代谢病患者一旦急性发病,多陷于严重中毒、能量代偿不足、神经意识昏睡状态,诊断治疗不及时会导致严重的脑损伤或发育障碍,因此就诊时需要快速有效的代谢检测来明确诊断、决定治疗方案.急诊就诊30 min之内的紧急实验室一线检查结果是鉴别诊断和制定抢救治疗方案的重要参考依据,相继24 h内根据一线检查结果完善相应的遗传代谢病的二线实验室检查是明确诊断遗传代谢病和采取有效治疗方案的关键.

代谢性疾病与电解质紊乱

代谢性疾病引起的电解质紊乱多见于肾小管功能异常性代谢疾病。这类疾病既有其原发代谢障碍引起的代谢紊乱，同时伴有特殊的临床特点和不同程度的电解质紊乱。代表性的电解质紊乱为特征的代谢性疾病有Fanconi综合征、胱氨酸贮积症、Lowe综合征、原发性果糖不耐受症、酪氨酸血症、肝豆状核变性等。正确理解其原发病特点和电解质紊乱表象是临床纠正电解质紊乱和解除生命危象的关键。