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博尔纳病病毒在动物中感染的研究现状
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作者 李桂梅 张凤民 +1 位作者 谷鸿喜 生田和良 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2002年第2期114-116,共3页
关键词 博尔纳病病毒 动物 感染 研究现状
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EHF病毒B-1、PH、Pu株对大鼠及新生大鼠的感染实验研究
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作者 袁孝纯 山之内孝尚 堂前嘉代子 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 1991年第2期138-140,共3页
应用3种EHF病毒株对成年大鼠及新生大鼠进行了感染实验,根据鼠的死亡率,免疫荧光抗体效价和体重增长来判定毒力。结果表明,B-1株强于PH和Pu株,同时提示,可以应用新生大鼠来检测流行性出血热病毒的毒力或作为病毒分离用动物。
关键词 流行性出血热 接种 毒力 病毒
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用巢式RT-PCR检测精神分裂症患者血液标本中博尔纳病病毒p24基因 被引量:7
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作者 李桂梅 马培林 +3 位作者 张凤民 林玉奇 谷鸿喜 生田和良 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期71-72,75,共3页
目的 :检测精神分裂症患者外周血单个核细胞 ( peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)标本中博尔纳病病毒 ( Borna Disease Virus,BDV) p2 4基因 ,探讨 BDV感染与精神分裂症的关系。方法 :用巢式 RT- PCR方法检测黑龙江省精神分裂... 目的 :检测精神分裂症患者外周血单个核细胞 ( peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)标本中博尔纳病病毒 ( Borna Disease Virus,BDV) p2 4基因 ,探讨 BDV感染与精神分裂症的关系。方法 :用巢式 RT- PCR方法检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人 PBMCs中 BDV- p2 4基因片段 ,同时扩增 β-肌动蛋白 ( β- actin)作为内参照。结果 :6 6例精神分裂症患者中 ,BDV- p2 4基因的阳性检出率为 2 8.8% ( 19/6 6 ) ;4 7例正常人中 ,BDV- p2 4基因的阳性检出率为 6 .3% ( 3/47) ,经比较两者间阳性率差异有显著性 ( P<0 .0 5 )结论 :证实中国存在 BDV感染 ,黑龙江省精神分裂症的发生可能与 展开更多
关键词 巢式RT-PCR 精神分裂症 血液标本 博尔纳病病毒 p24基因 单个核细胞 检测
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博尔纳病病毒自然感染状况及其核苷酸序列 被引量:8
4
作者 马培林 张凤民 +4 位作者 李桂梅 杨爱英 李懿宏 谷鸿喜 生田和良 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期408-410,共3页
目的 探讨中国黑龙江地区正常人和马博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus ,BDV)自然感染状况 ,进而比较分析中国自然感染的BDV与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株及标准株He/80在种系发生中的关系。方法 用巢式RT -PCR方法检测中... 目的 探讨中国黑龙江地区正常人和马博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus ,BDV)自然感染状况 ,进而比较分析中国自然感染的BDV与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株及标准株He/80在种系发生中的关系。方法 用巢式RT -PCR方法检测中国黑龙江地区正常人和马匹单个核细胞 (peripheralbloodmononuclearcells ,PBM Cs)中BDV - p2 4基因片段 ,分别随机选取每种样本部分阳性扩增产物进行克隆测序 ,测序结果与国外精神分裂症患者和患病马的BDV分离株以及标准株He/80进行序列比较。结果  76例正常人、34匹马的标本中BDV - p2 4基因的阳性检出率分别为 9 2 % (7/76 )和 2 3 5 % (8/34)。序列分析结果表明 ,中国黑龙江地区正常人和马感染的BDV的核苷酸序列除与一个新亚型株No/98差别较大 (大于 15 % )外 ,与其他国外精神分裂症患者和马源BDV分离株同源性均大于 94 % ,与标准株He/80同源性达到 98%以上。结论 证实黑龙江地区正常人和马中存在BDV的自然感染。该地区感染的BDV与标准株He/80存在高度的同源性。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 巢式RT-PCR 精神分裂症
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博尔纳病病毒持续感染细胞系中病毒RNA的原位PCR检测
5
作者 杨爱英 张凤民 +4 位作者 马培林 林志国 刘玉芳 谷鸿喜 生田和良 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期170-171,共2页
目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的原位PCR方法。方法首先设计BDV特异性引物以及检测BDV-RNA的原位PCR扩增系统,然后对BDV持续感染细胞(BDV/OL)和正常细胞(OL细胞)爬片进行原位PCR扩增,进而分别用DNA酶或RNA酶消化处理BDV/OL细胞爬片... 目的建立检测博尔纳病病毒(BDV)RNA的原位PCR方法。方法首先设计BDV特异性引物以及检测BDV-RNA的原位PCR扩增系统,然后对BDV持续感染细胞(BDV/OL)和正常细胞(OL细胞)爬片进行原位PCR扩增,进而分别用DNA酶或RNA酶消化处理BDV/OL细胞爬片后,再进行原位PCR扩增。结果经原位PCR扩增后,约60%~70%的BDV持续感染细胞核中出现了阳性反应信号,但正常细胞无信号出现,并且病毒感染细胞中的阳性信号在RNA酶消化作用下消失,但不受DNA酶作用的影响。结论该研究建立的PCR检测方法具有BDV和RNA特异性,可以应用于检测相关动物或神经精神疾病患者的脑组织中BDV-RNA,为进一步证明BDV的致病性奠定基础。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 持续感染 原位 细胞系 PCR扩增 PCR检测方法 正常细胞 感染细胞 RNA酶 PCR方法 特异性引物 消化处理 阳性反应 消化作用 精神疾病 DNA 细胞核 无信号 性信号 酶作用 脑组织 致病性 神经 动物
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内蒙地区发热患者血清中冠状病毒抗体的检测
6
作者 包丽丽 钱钧 +6 位作者 福泉 李桂梅 宋武琦 李小光 贾丽娜 生田和良 张凤民 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期16-18,共3页
目的分析内蒙地区发热患者中冠状病毒的感染情况。方法以SARS冠状病毒感染Vero细胞涂片为冠状病毒抗原片,用间接免疫荧光法分别检测55例发热患者和68例正常人血清中冠状病毒的IgG、IgM抗体。结果发热患者血清中冠状病毒IgG抗体和IgM抗... 目的分析内蒙地区发热患者中冠状病毒的感染情况。方法以SARS冠状病毒感染Vero细胞涂片为冠状病毒抗原片,用间接免疫荧光法分别检测55例发热患者和68例正常人血清中冠状病毒的IgG、IgM抗体。结果发热患者血清中冠状病毒IgG抗体和IgM抗体阳性率分别为29.1%(16/55)和10.9%(6/55),而正常人血清中只检测到2.9%(2/68)的IgG抗体,且未检测到IgM抗体,2组患者的IgG和IgM抗体阳性率比较差异均有显著性;随机选取7例患者的IgG阳性血清进行SRAS冠状病毒的特异性抗体封闭实验,结果有6例血清仍为阳性,有1例血清转为阴性,说明冠状病毒IgG抗体阳性血清中85.7%为普通冠状病毒特异性,14.3%为SARS冠状病毒特异性。结论普通冠状病毒是内蒙地区发热患者的主要病原体之一,部分患者还存在SARS冠状病毒的既往感染。 展开更多
关键词 发热患者 冠状病毒 间接免疫荧光 抗体
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碱性磷酸酶标记寡核甘酸探针检测致病性大肠杆菌成束菌毛基因
7
作者 毕振强 本田武司 《中国卫生检验杂志》 CAS 1997年第6期323-325,共3页
An alkaline phosphatase-conjugated 27 - basc oligonucleotide probe was developed to detect the gene, bfPA, encoding the bundle-- forming pilus of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC). The probe was proven to be hi... An alkaline phosphatase-conjugated 27 - basc oligonucleotide probe was developed to detect the gene, bfPA, encoding the bundle-- forming pilus of enteropathogenic Escherichia coli (EPEC). The probe was proven to be highly specific to EPEC, hybridizing only toEPEC strains, but not to Salmonella spp. Shigella spp., Vibrio spp., and other E. coli isolates. one hundred seventy eight E. colistrains belonging to traditional EPEC sergroups isolated from patients with diarrhoea were tested the probe, the prevalence rate of bfpAgene was 25. 28%. The frequency of the bfpA gene in relation to serogroups varied widely among EPEc The bfPA gene was morecommonly detected in strains of class l serogroups of EPEC(41.0% ) than in class I serogroups of EPEC(11.6% 6 % ). HEP- 2 cell adhesion assay and the fluorescent actin staining (FAS) test are 100% argreement, with all the localized adherence (LA) positive strainsproucing positive FAS activity. The results of bfpA probe hybridization were of 98.9% agreement with those obtained by using HEP- 2 cell adhesion assay and the FAS test. the sensitivity and specifity of the probe versus the FAS test and the HEP- 2 cell assay were95.7% and 100%, respectively. This probe was proven to be useful in identifying EPEC which carries the bfpA gene. 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 成束菌毛 寡核甘酸探针
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对基因组科学的贡献和人类基因组治疗技术的展望
8
作者 今本文男 中辻宪夫 《生物产业技术》 2010年第1期59-60,共2页
日本大阪大学微生物病研究所分子生物学捐助研究部门的今本文男教授.是基因组研究的权威,他运用Invitrogen公司提供的MultiSiteGatewayDNA克隆技术,构建了一种将2-3种cDNA同时导入活细胞的载体。由于将多个基因的表达克隆混合后,很... 日本大阪大学微生物病研究所分子生物学捐助研究部门的今本文男教授.是基因组研究的权威,他运用Invitrogen公司提供的MultiSiteGatewayDNA克隆技术,构建了一种将2-3种cDNA同时导入活细胞的载体。由于将多个基因的表达克隆混合后,很难稳定地导入细胞内,因此人们把多种cDNA同时插入一个分子载体中. 展开更多
关键词 人类基因组 克隆技术 分子生物学 展望 治疗 科学 日本大阪大学 CDNA
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用蛋白印迹试验检测精神分裂症患者血清中博尔纳病病毒-p24抗体的研究 被引量:21
9
作者 杨爱英 张凤民 +4 位作者 李均辉 李桂梅 马培林 谷鸿喜 生田和良 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期85-87,共3页
目的 探讨博尔纳病病毒 (BDV)感染在我国的流行情况及其与精神分裂症的相关性。方法 在对优化表达的GST BDV p2 4融合蛋白进行特异性鉴定的基础上 ,通过确定融合蛋白与第一抗体、第二抗体间的最佳反应条件 ,建立可行的检测BDV p2 4特... 目的 探讨博尔纳病病毒 (BDV)感染在我国的流行情况及其与精神分裂症的相关性。方法 在对优化表达的GST BDV p2 4融合蛋白进行特异性鉴定的基础上 ,通过确定融合蛋白与第一抗体、第二抗体间的最佳反应条件 ,建立可行的检测BDV p2 4特异抗体的蛋白印迹 (Western blot)方法 ,进而对黑龙江地区精神分裂症患者和正常人对照血清中BDV p2 4特异性抗体进行了检测 ,并通过血清 GST蛋白吸收后Western blot实验对阳性血清进行了确认。结果  116例精神分裂症患者中检出BDV p2 4阳性血清 10例 ,阳性检出率为 8.6% ,而正常人血清标本中未检出阳性。结论 我国存在博尔纳病病毒的感染 ,博尔纳病病毒的感染可能与精神分裂症的发生有关。 展开更多
关键词 博尔纳病病毒 蛋白质印迹法 精神分裂症
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破伤风毒素及其片段的免疫效果 被引量:8
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作者 雷殿良 梁宝华 +8 位作者 顾磊 董联珠 赵建荣 叶玲仙 俞永平 李京平 乐嘉静 徐锡荣 松田守弘 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1991年第3期109-112,共4页
本文首次报道了破伤风毒素及其片段和片段组合对小鼠的免疫效果。通过凝胶过滤和离子交换等方法提纯了破伤风毒素及其片段。各片段中残余素素的污染率为0~0.8%。将各片段给小鼠免疫均能诱导产生保护性抗体,用破伤风毒素攻击后能使部分... 本文首次报道了破伤风毒素及其片段和片段组合对小鼠的免疫效果。通过凝胶过滤和离子交换等方法提纯了破伤风毒素及其片段。各片段中残余素素的污染率为0~0.8%。将各片段给小鼠免疫均能诱导产生保护性抗体,用破伤风毒素攻击后能使部分小鼠免于死亡。当免疫小鼠的血清抗体滴度>1∶4(0.01HAU/ml)时,小鼠在毒素攻击后一般可免于死亡,当血清抗体滴度>1∶128(0.5HAU/ml)时,则小鼠经攻毒后一般不表现出任何中毒症状,当血清抗体滴度处于二者之间时,小鼠一般表现有破伤风中毒症状,但大部分可以存活。毒素的三个片段均能诱导产生保护性抗体,但存在着明显的差别。 展开更多
关键词 破伤风毒素 毒素片段 免疫效果
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精神分裂症患者BDV-p24基因的扩增及其产物的测序鉴定 被引量:5
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作者 李桂梅 张凤民 +5 位作者 马培林 杨爱英 谷鸿喜 温捍淑 刘雪峰 生田和良 《神经疾病与精神卫生》 2002年第6期321-322,共2页
目的 扩增精神分裂症患者PBMCs标本中博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,并对基因扩增产物进行测序鉴定,分析其与标准株之间的差异。方法 用巢式RT—PCR方检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人PBMCs中BDV-p24基因片段,对2例... 目的 扩增精神分裂症患者PBMCs标本中博尔纳病病毒(Borna Disease Virus,BDV)p24基因,并对基因扩增产物进行测序鉴定,分析其与标准株之间的差异。方法 用巢式RT—PCR方检测黑龙江省精神分裂症患者及正常人PBMCs中BDV-p24基因片段,对2例BDV—p24基因阳性的巢式RT-PCR产物进行测序,并与标准株比较。结果 9例精神分裂症患者中有2例BDV-p24基因阳性,7例正常人标本中未发现BDV—p24基因阳性。测序结果进一步证实扩增产物为BDV—p24基因,其序列与标准株高度同源。结论 用巢式RT—PCR方法可以特异性扩增出BDV—p24基因,扩增产物序列与标准株高度同源,提示黑龙江省的精神分裂症的发生可能与BDV感染有关。 展开更多
关键词 精神分裂症 BDV-p24基因 产物 测序 鉴定 基因扩增
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10株分泌HSV-Ⅱ型单克隆抗体的杂交瘤细胞系的建立
12
作者 赵玉坤 加藤四郎 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第6期417-419,共3页
用HSV-ⅡUW268株免疫BALB/c鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆化后获得10株分泌抗HSV-ⅡUW268株单克隆抗体的细胞系。其中1株仅与HSV-ⅡUW268株发生特异免疫反应,9株与HSV-Ⅱ和HSV-IF_(17)均发生免疫反应。用免疫沉淀试... 用HSV-ⅡUW268株免疫BALB/c鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选、克隆化后获得10株分泌抗HSV-ⅡUW268株单克隆抗体的细胞系。其中1株仅与HSV-ⅡUW268株发生特异免疫反应,9株与HSV-Ⅱ和HSV-IF_(17)均发生免疫反应。用免疫沉淀试验检测单克隆抗体的Ig类型为IgG_1。保存的杂交瘤细胞仍能稳定地分泌抗HSV-ⅡUW268株的单克隆抗体。 展开更多
关键词 HSV-Ⅱ型 单克隆抗体 杂交瘤细胞
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鼠细胞角蛋白Endo B的核苷酸序列分析
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作者 张凤蕴 一濑勇规 《生物技术》 CAS CSCD 1992年第3期17-19,共3页
本文报导了由编码细胞角蛋白的基因组DNA文库中筛选的克隆的特点,介绍了其亚克隆和核苷酸序列分析.序列分析发现,Endo B基因由七个外显子和六个内含子组成.Endo B 基因家族至少由一个结构基因和一个假基因组成.
关键词 细胞角蛋白 EndoB 序列分析
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博尔纳病病毒感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响 被引量:3
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作者 董云霞 李小光 +5 位作者 宋武琦 李玉军 李桂梅 马培林 生田和良 张凤民 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期321-323,共3页
目的分析博尔纳病病毒(BDV)感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响。方法选择病毒滴度为2·0×106FFU/ml的BDV病毒液对新生大鼠进行颅内接种,接种量为10μl/只新生大鼠。30d后用RT-PCR和间接免疫荧光方法确定BDV感染情况... 目的分析博尔纳病病毒(BDV)感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响。方法选择病毒滴度为2·0×106FFU/ml的BDV病毒液对新生大鼠进行颅内接种,接种量为10μl/只新生大鼠。30d后用RT-PCR和间接免疫荧光方法确定BDV感染情况;并采用半定量RT-PCR方法检测BDV感染大鼠脑组织中多巴胺2(D2)受体和5-羟色胺2α(5-HT2α)受体基因的mRNA转录情况。结果病毒接种后新生大鼠的BDV感染阳性率为88·89%。病毒感染大鼠脑组织中5-HT2α受体和D2受体基因的mRNA转录水平均明显低于对照组,差异有统计学意义。结论BDV感染可以明显抑制新生大鼠脑组织中D2受体和5-HT2α受体基因的mRNA转录,提示单胺类受体基因的转录与表达参与BDV感染的致病过程。 展开更多
关键词 Boma病病毒 逆转录聚合酶链反应 受体 血清素 多巴胺 转录 遗传
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腹泻儿童粪便分离的大肠杆菌中eaeA基因的检测及携带eaeA菌株的特性研究 被引量:4
15
作者 毕振强 永山宪市 +1 位作者 A.KMwangudza 本田武司 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期305-308,共4页
用碱性磷酸酶标记的eaeA基因寡核苷酸探针,对37个血清群的221株从肯尼亚5岁以下腹泻患儿粪便中分离的大肠杆菌进行检测,并对eaeA基因阳性菌株进一步做了bfpA和slt基因检测,HEp-2细胞粘附及荧光肌纤蛋白染... 用碱性磷酸酶标记的eaeA基因寡核苷酸探针,对37个血清群的221株从肯尼亚5岁以下腹泻患儿粪便中分离的大肠杆菌进行检测,并对eaeA基因阳性菌株进一步做了bfpA和slt基因检测,HEp-2细胞粘附及荧光肌纤蛋白染色(FAS)试验。结果表明,eaeA基因的携带率为19.5%,EPEC、EHEC和其它血清群中eaeA基因的携带率分别为31.6%、66.7%和8.9%,根据bfpA和slt基因检测及HEp-2细胞粘附和FAS试验的结果,可将携带eaeA基因的大肠杆菌分成5种类型。提示eaeA基因的分布不仅限于EPEC和EHEC,而且携带eaeA基因菌株含有多种毒力决定因子。 展开更多
关键词 大肠杆菌 eaeA基因 腹泻 儿童
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HHV-6核糖核苷酸还原酶基因克隆表达和功能研究
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作者 钱利生 山西弘一 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第5期370-373,共4页
本文报道应用分子生物学技术,对人疱疹病毒-6型(HHV-6)核糖核苷酸还原酶(RiR)基因克隆表达和功能的研究。选用已作全序列测定的pSTY28DNA片段,用核酸蛋白分析软件作分析,发现含有RiRORF(开读框架),... 本文报道应用分子生物学技术,对人疱疹病毒-6型(HHV-6)核糖核苷酸还原酶(RiR)基因克隆表达和功能的研究。选用已作全序列测定的pSTY28DNA片段,用核酸蛋白分析软件作分析,发现含有RiRORF(开读框架),全长为2414个核苷酸,与HCMV(人巨细胞病毒)相关,最适记分达459。应用PCR(多聚酶链反应)和分子克隆技术,获得重组质粒pSTrc28,引入RiR缺损突变菌株JE7511,成功地表达RiR蛋白。在标准测定系统,该蛋白催化NADPH氧化能力类似大肠杆菌JM109株RiR。证实HHV-6RiRORF编码的蛋白质,具有RiR功能,由此可从RiR的核酸和蛋白质水平,为研究HHV-6的致病和防治提供新途径。 展开更多
关键词 人疱疹病毒 6型 核糖核苷酸 还原酶 基因表达
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中国慢性疲劳综合征患者血浆中BDV-p24抗体的检测 被引量:14
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作者 李永杰 王得新 +3 位作者 张凤民 刘占东 杨爱英 生田和良 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期330-333,共4页
目的检测博尔纳病病毒(BDV)对中国慢性疲劳综合征(CFS)患者和健康对照者感染的情况,探讨CFS与BDV感染之间的相关性。方法按美国CDC 1994年标准,搜集来自全国十一省市的CFS患者61例和健康对照73例,使用蛋白印迹法(WB)对其血浆进行BDV-p2... 目的检测博尔纳病病毒(BDV)对中国慢性疲劳综合征(CFS)患者和健康对照者感染的情况,探讨CFS与BDV感染之间的相关性。方法按美国CDC 1994年标准,搜集来自全国十一省市的CFS患者61例和健康对照73例,使用蛋白印迹法(WB)对其血浆进行BDV-p24抗体检测。结果 病例组有7例为阳性结果(11.48%),对照组均为阴性(0%),统计学处理两组间差异有显著意义(P<0.010)。结论中国CFS患者存在BDV感染,病例组感染率明显高于对照组,CFS与BDV感染存在相关性。 展开更多
关键词 中国慢性疲劳综合征 博尔纳病病毒 BDV CFS 病因学 抗原 血清
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基于L-2细胞系检测HIV-1血清抗体的间接免疫荧光试验 被引量:1
18
作者 赖伟红 尹跃平 +1 位作者 李永刚 生田和良 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期294-295,共2页
关键词 L-2细胞系 检测 HIV-1 血清 抗体 间接免疫荧光试验
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继承性免疫治疗的最新进展 被引量:4
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作者 田口铁男 董海东 《国际肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 1991年第6期327-329,共3页
此文根据日本大阪大学微生物病研究所田口铁男教授1991年5月在济南召开的第二届全国肿瘤生物治疗学术会议上的演讲稿译出。
关键词 免疫治疗 杀伤活性 免疫疗法 肿瘤学 抗原抗体复合物 学术会议 介导免疫 性因子 单克隆抗体 实体瘤
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