应用活体冷冻技术分析急性高血压时免疫球蛋白G在小鼠近端肾小管中的分布变化

目的应用活体冷冻技术结合免疫组织化学方法形象化地研究急性高血压血流动力学条件下,小鼠免疫球蛋白G(IgG)及其轻、重链经肾小球毛细血管袢滤过后,在近端小管再吸收的病理过程。方法分别在正常血流、急性高血压和心脏骤停等血流动力学条件下,进行小鼠肾脏活体冷冻及冷冻置换。连续的石蜡切片后,分别进行苏木精-伊红(H-E)染色和IgG、kappa轻链和IgG1重链免疫组织化学染色。结果正常血压和心脏骤停情况下,IgG在血管内清晰定位,只有极少量出现在近端小管顶端的细胞质内。而在急性高血压情况下,kappa轻链几乎免疫定位于所有近端小管,无IgG1重链表达。并首次展示了小鼠活体内血清IgG的轻链而非重链通过肾小球滤过后,迁移至近端肾小管重吸收的过程。结论活体冷冻技术结合冷冻置换方法能够原位瞬间捕获不同血流动力学条件下血清IgG在活体肾组织中的分布状态,可视化活体组织细胞的功能形态学特征。

应用活体冷冻技术动态观察各种血流动力学改变时血清白蛋白在小鼠近端肾小管的分布变化

目的应用活体冷冻技术结合免疫组织化学的方法形象化表现各种血流动力学条件下小鼠血清白蛋白经肾小球毛细血管袢滤过后,在近曲小管再吸收的病理生理过程。方法分别在正常血流、急性高血压和心脏骤停等血流动力学条件下,对模型小鼠的左肾进行活体冷冻及冷冻置换。连续的石蜡切片后,分别进行苏木精-伊红染色和抗小鼠白蛋白抗体免疫组织化学染色。结果正常血压和心脏骤停情况下,血清白蛋白在血管内清晰定位,少量出现在近端小管顶端的细胞质部分,但在急性高血压情况下,血清白蛋白明显地免疫定位于所有近端小管。结论活体冷冻技术结合冷冻置换方法可以原位捕获瞬间被活体功能状态的近端肾小管上皮细胞再吸收的血清白蛋白,可视化活体组织细胞的功能形态学特征。