两株钩端螺旋体16s rRNA基因部分核苷酸序列分析

本文采用聚合酶链反应技术对爪哇型和帕托克型两株钩端螺旋体(简称钩体)的部分16s rRNA基因进行扩增和核苷酸序列分析,并与已报道的犬型钩体序列加以比较。结果发现爪哇型钩体与犬型钩体的16s rRNA基因核苷酸序列具有高度同源性,而在爪哇型与帕托克型之间则存在着较明显差别。

伤寒沙门菌Vi抗原作为毒力因子的特性研究

目的 探讨伤寒沙门菌Vi抗原作为毒力因子在致病机理中的作用。方法 选用Vi阳性和Vi阴性伤寒沙门菌作为实验菌株 ,体外考查了Vi抗原在抵抗渗透压 (NaCl)和过氧化物 (H2 O2 )中的作用 ,以及抵抗单核吞噬细胞内化和胞内杀伤的作用。结果 高浓度NaCl明显减少Vi阴性伤寒沙门菌的存活 ;低浓度的H2 O2 对Vi阴性伤寒沙门菌的存活有显著的影响 ;单核吞噬细胞内化和胞内杀伤伤寒沙门菌明显高于对照组。结论 伤寒沙门菌的Vi抗原作为一种毒力因子对其存活于体内及逃避机体的防御机理具有重要作用。

单核细胞-巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性

目的探讨人类单核细胞巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性。方法采用体外培养的THP1细胞和PMA诱导分化的THP1细胞,测定其内在化和杀伤伤寒沙门氏菌的活性,以及以伤寒沙门氏菌诱导的上述两种细胞产生TNFα和IL12的情况。结果PMA诱导的THP1细胞可分化成巨噬细胞;THP1细胞和PMA诱导分化的THP1细胞的内在化,杀伤伤寒沙门氏菌的能力及其产生细胞因子的能力显箸不同。结论人类巨噬细胞可能是机体抗御伤寒沙门氏菌感染的重要细胞。

伤寒沙门氏菌肠毒素基因突变株的构建

目的 为探讨伤寒沙门氏菌肠毒素的致病机理。方法 根据已知的鼠伤寒沙门氏菌的肠毒素基因序列， 设计 Ｐ Ｃ Ｒ 引物， 扩增并克隆了伤寒沙门氏菌的肠毒素结构基因。双酶切造成部分序列缺失， 亚克隆于自杀质粒后， 通过电穿孔转化， 同源重组替换野生型肠毒素基因。结果 Ｐ Ｃ Ｒ 及序列分析证实， 缺失突变株的肠毒素基因缺失４０３ 个碱基。经血清学鉴定， 该突变株保持母系菌株的 Ｖｉ 抗原表型。 结论 该突变株的构建为研究肠毒素基因在至于致病机制中的作用奠定了基础。

单核吞噬细胞应答伤寒沙门菌的实验研究

目的 研究单核吞噬细胞应答伤寒沙门菌的机理。方法 采用体外培养的PMA分化的THP - 1细胞 ,检测其内化和杀伤胞内伤寒沙门菌的活性 ,以及伤寒沙门菌诱导PMA分化的THP - 1细胞产生TNF -α和IL - 12的情况。结果 PMA分化的THP - 1细胞内化和杀伤Vi 阴性伤寒沙门菌的活性明显高于内化和杀伤Vi阳性伤寒沙门菌的活性。IFN -γ明显增强此活性。伤寒沙门菌诱导PMA分化的THP - 1细胞可以产生一定量的TNF -α和IL - 12 ,然而 ,IFN -γ活化的PMA分化的THP - 1细胞产生TNF -α和IL - 12的量明显增加。结论 伤寒沙门菌在单核吞噬细胞中的存活可能与Vi 抗原的存在有关 ;IFN -γ在调节机体细胞免疫 。

IFN-γ调节THP-1细胞应答沙门氏伤寒菌

目的：为了探讨ＩＦＮγ在增强宿主防御沙门氏伤寒菌感染中的作用机制。方法：采用体外细胞培养方法研究了ＩＦＮγ对ＴＨＰ１细胞应答沙门氏伤寒菌的调节作用。结果：发现ＩＦＮγ显著促进ＴＨＰ１细胞及ＰＭＡ分化的ＴＨＰ１细胞内化和杀伤沙门氏伤寒菌，并明显增强沙门氏伤寒菌诱导ＰＭＡ分化的ＴＨＰ１细胞产生ＴＮＦα和增强诱导ＴＨＰ１细胞及ＰＭＡ分化的ＴＨＰ１细胞产生ＩＬ１２。

伤寒沙门氏菌诱导不同分化和活化状态的THP-1细胞产生TNF-α和IL-12的研究

为探讨伤寒沙门氏菌诱导宿主细胞产生细胞因子,以及细胞因子在宿主防御伤寒沙门氏菌感染中的调节作用,我们应用人类单核白血病细胞系—THP1细胞,对伤寒沙门氏菌诱导不同分化和活化状态的THP1细胞产生TNFα和IL12进行了研究。结果表明,伤寒沙门氏菌不能诱导THP1细胞产生TNFα,但可诱导PMA分化的THP1细胞产生TNFα和IL12;TNFγ既可增强伤寒沙门氏菌诱导THP1细胞产生IL12,又可增强伤寒沙门氏菌诱导的PMA分化的THP1细胞产生TNFα和IL12。以上结果提示,TNFα的产生可能与单核细胞的分化状态有关;TNFα和IL12的产生可能存在着不同的诱导机制;IFNγ对TNFα和IL12的产生具有调节作用。