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肺炎支原体16SrRNA基因引物A(201)B(629)多聚酶链式反应特异性和敏感性的研究
被引量:
6
1
作者
陈庆学
李娜
江崎孝行
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1992年第4期255-258,共4页
用肺炎支原体16S rRNA基因序列A(201)B(629)做引物,以肺炎支原体、生殖支原体、口腔支原体、唾液支原体和人型支原体DNA为模板进行多聚酶链式反应(PCR),检测引物的特异性和敏感性。结果肺炎支原体呈阳性,但与生殖支原体有交叉;可检出标...
用肺炎支原体16S rRNA基因序列A(201)B(629)做引物,以肺炎支原体、生殖支原体、口腔支原体、唾液支原体和人型支原体DNA为模板进行多聚酶链式反应(PCR),检测引物的特异性和敏感性。结果肺炎支原体呈阳性,但与生殖支原体有交叉;可检出标本中肺炎支原体最少菌量小于10~3/ml,敏感性高于核酸杂交。
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关键词
枝原体
核糖核酸
多聚糖链反应
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职称材料
耐热AKP在高GC含量细菌染色体杂交方法中的应用
2
作者
黄新祥
许化溪
+7 位作者
王卉放
王胜军
王锁英
喻杰
夏圣
马洁
许文荣
江崎孝行
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2004年第416期465-469,共5页
目的应用耐热碱性磷酸酶(AKP)于微孔板DNADNA杂交技术,建立高G+C含量细菌染色体DNA同源性测定的特异性方法,为此类细菌的分类与鉴定奠定基础。方法细菌染色体DNA经分离纯化并变性后,直接非共价结合于固相微孔板中,与标有光标生物素的DN...
目的应用耐热碱性磷酸酶(AKP)于微孔板DNADNA杂交技术,建立高G+C含量细菌染色体DNA同源性测定的特异性方法,为此类细菌的分类与鉴定奠定基础。方法细菌染色体DNA经分离纯化并变性后,直接非共价结合于固相微孔板中,与标有光标生物素的DNA探针进行杂交。借助抗生物素蛋白与生物素的特异性结合,通过与板上带有生物素的杂交体作用,使得链霉亲和素连接的耐热AKP固定于板上,根据底物加入后的酶促反应强度,定量判读杂交结果。结果微孔板中1μg/孔DNA的包被浓度与25~50ng/孔的生物素探针呈现较为理想的杂交结果,pH95TrisHcl缓冲液系耐热AKP的最佳作用条件。应用该法于高G+C含量的分枝杆菌种间染色体同源性分析表明,方法具有敏感、特异、简便等优点。结论耐热AKP应用于微孔板定量杂交,可不受较高杂交和测定温度的影响,适用于高G+C含量的结核杆菌等分枝杆菌属以及假单胞菌属的定性检测和同源性的定量分析。
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关键词
耐热AKP
定量杂交
细菌
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职称材料
题名
肺炎支原体16SrRNA基因引物A(201)B(629)多聚酶链式反应特异性和敏感性的研究
被引量:
6
1
作者
陈庆学
李娜
江崎孝行
机构
中国医科
大学
微生物学
教研室
日本岐阜大学医学部微生物学讲座
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1992年第4期255-258,共4页
文摘
用肺炎支原体16S rRNA基因序列A(201)B(629)做引物,以肺炎支原体、生殖支原体、口腔支原体、唾液支原体和人型支原体DNA为模板进行多聚酶链式反应(PCR),检测引物的特异性和敏感性。结果肺炎支原体呈阳性,但与生殖支原体有交叉;可检出标本中肺炎支原体最少菌量小于10~3/ml,敏感性高于核酸杂交。
关键词
枝原体
核糖核酸
多聚糖链反应
Keywords
mycoplasma
16S rRNA
polymerase chain reaction(PCR)
分类号
R375.2 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
耐热AKP在高GC含量细菌染色体杂交方法中的应用
2
作者
黄新祥
许化溪
王卉放
王胜军
王锁英
喻杰
夏圣
马洁
许文荣
江崎孝行
机构
江苏
大学
医学
技术学院
生物
化学与临床生化教研室
江苏
大学
检验
医学
研究所免疫研究室
江苏
大学
附属医院儿科
日本岐阜大学医学部微生物学讲座
出处
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2004年第416期465-469,共5页
基金
江苏省自然科学基金资助(BK2000029)
江苏省"333工程"资助
江苏省六大人才高峰项目
文摘
目的应用耐热碱性磷酸酶(AKP)于微孔板DNADNA杂交技术,建立高G+C含量细菌染色体DNA同源性测定的特异性方法,为此类细菌的分类与鉴定奠定基础。方法细菌染色体DNA经分离纯化并变性后,直接非共价结合于固相微孔板中,与标有光标生物素的DNA探针进行杂交。借助抗生物素蛋白与生物素的特异性结合,通过与板上带有生物素的杂交体作用,使得链霉亲和素连接的耐热AKP固定于板上,根据底物加入后的酶促反应强度,定量判读杂交结果。结果微孔板中1μg/孔DNA的包被浓度与25~50ng/孔的生物素探针呈现较为理想的杂交结果,pH95TrisHcl缓冲液系耐热AKP的最佳作用条件。应用该法于高G+C含量的分枝杆菌种间染色体同源性分析表明,方法具有敏感、特异、简便等优点。结论耐热AKP应用于微孔板定量杂交,可不受较高杂交和测定温度的影响,适用于高G+C含量的结核杆菌等分枝杆菌属以及假单胞菌属的定性检测和同源性的定量分析。
关键词
耐热AKP
定量杂交
细菌
Keywords
Heat-resisting alkaline phosphatase
Quantitative hybridization
Bacteria
分类号
R33-33 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肺炎支原体16SrRNA基因引物A(201)B(629)多聚酶链式反应特异性和敏感性的研究
陈庆学
李娜
江崎孝行
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
1992
6
下载PDF
职称材料
2
耐热AKP在高GC含量细菌染色体杂交方法中的应用
黄新祥
许化溪
王卉放
王胜军
王锁英
喻杰
夏圣
马洁
许文荣
江崎孝行
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2004
0
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职称材料
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0
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