三氧化二砷诱导慢性髓系白血病细胞G_2/M周期停滞及其机理

目的 研究三氧化二砷对慢性髓系白血病细胞的体外作用特点及其机理。方法 将三氧化二砷与慢性髓性白血病细胞系K562作用后 ,测定细胞的生长曲线及活性 ,流式细胞测量术检测细胞凋亡和细胞周期分布的改变 ;同时 ,采用RT PCR方法检测药物作用前后细胞周期相关基因表达的变化。结果 ①三氧化二砷明显抑制K562细胞的生长 ,其作用呈时间和浓度依赖性 ;②三氧化二砷诱导K562细胞凋亡的作用较弱 ,但可明显诱导K562细胞在G2 /M期停滞 ,此效应也呈时间和浓度依赖性 ;③三氧化二砷作用后 ,细胞周期抑制基因p57表达明显上调 ,而细胞周期促进基因cyclinB的表达受到抑制。结论 三氧化二砷能有效抑制慢性髓系白血病细胞的生长 ,其机理主要为诱导细胞G2 /M期周期停滞 ;

多药耐药逆转剂增加去甲柔红霉素对正常造血干细胞的毒性

目的 探讨多药耐药逆转剂是否增加化疗药物对正常造血干细胞的毒性。方法 采用甲基纤维素半固体培养方法，培养正常人粒细胞－ 巨噬细胞克隆形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）。测定去甲柔红霉素对ＣＦＵ－ＧＭ 的抑制率。将多药耐药逆转剂ＭＳ－２０９及去甲柔红霉素与骨髓细胞共同短期作用后，了解去甲柔红霉素对ＣＦＵ－ＧＭ 抑制率的变化。结果 去甲柔红霉素对ＣＦＵ－ＧＭ 的平均抑制率为２９．６％ ，在ＭＳ－２０９作用下，其抑制率增加为４３．４％ ，有显著性差异（Ｐ＜ ０．０５）。结论 多药耐药逆转剂ＭＳ－２０９ 增加了化疗药物对造血干细胞的毒性。提示该类药物在临床应用中可能对造血系统具有一定副作用。

O_2~■对心肌细胞膜流动性、钙泵和肌酸激酶活性的影响

用噁唑烷氮氧基硬脂酸(5—DSA)标记大鼠心肌细胞膜(SL),通过标记膜ESR光谱观察O_2~■)发生系统(X/XO)对SL膜流动性、Ca^(2+)泵和CK活性的影响。结果表明:X/XO引起SL膜流动性、Cu^(2+)泵和CK活性显著下降,均呈明显的量效关系;两个酶活性的下降与膜流动性降低密切相关;引起CK活性降低的X/XO浓度低于引起膜流动性降低的X/XO浓度。本研究表明:O_2~■)可引起心肌SL膜流动性降低,后者进一步导致膜Ca^(2+)泵活性下降。而O_2~■)引起CK活性下降所导致的能量代谢紊乱,可能会促进和加重膜流动性下降。这些变化可能是O_2~■)引起缺血再灌注性心肌损伤的早期环节。

造血干细胞多药耐药P-糖蛋白的表达及多药耐药逆转剂对其功能的影响

目的 :了解多药耐药 P-糖蛋白 ( P- gp)在造血干 /祖细胞的表达 ,探讨多药耐药逆转剂在临床应用过程中可能对造血干细胞的损害。方法 :采用 MRK16单克隆抗体 ,利用流式细胞仪测定健康人骨髓 CD34 阳性细胞表面 P- gp的表达 ;将多药耐药逆转剂 MS- 2 0 9作用于造血细胞 ,检测 MS- 2 0 9对 CD34 阳性细胞摄取染料 Rhodamin- 12 3的影响。结果 :骨髓 CD34 阳性细胞的 P- gp表达率为13.3% ,MS- 2 0 9明显增加 CD34 阳性细胞对 Rhodamin- 12 3的摄入 ( 18.1% )。结论 :造血干细胞表达P- gp蛋白并且具有活性功能 ;多药耐药逆转剂可以抑制其 P- gp的膜泵出功能 ,提示在临床应用中可能会增加化疗药物对造血干细胞的损害。