脐血来源树突状细胞的体外诱导及扩增

本研究的目的是分析脐血的细胞组成 ,研究加入细胞因子培养前后脐血树突状细胞的变化 ,探索体外诱导、扩增树突状细胞的方法并进行表型鉴定。选择正常成人外周血 9份 ,脐血 12份 ,分离单个核细胞。在脐血单个核细胞中加入细胞因子GM CSF、IL 3、SCF和EPO ,培养 4周。应用流式细胞仪和CD4、CD8、CD19、CD34、CD38、CD1a、CD11c及CDw12 3单克隆抗体测定正常成人外周血、培养前后 1,2 ,3,4周脐血细胞表面抗原及树突状细胞情况。结果表明 :正常成人外周血CD34+ 细胞 0 .0 2× 10 5 ml,CD1a+ 细胞 0 .0 1× 10 5 ml,CD11c+ 细胞 4 .32×10 5 ml,CD83+ 细胞 1.31× 10 5 ml,CDw12 3+ 细胞 1.4 1× 10 5 ml。新鲜脐血中CD34+ 细胞 0 .2 2× 10 5 ml,CD1a+ 细胞 0 .2 7× 10 5 ml,CD11c+ 细胞 5 .87× 10 5 ml,CD83+ 细胞 1.94× 10 5 ml,CDw12 3+ 细胞 2 .73× 10 5 ml。加入细胞因子GM CSF ,IL 3,SCF ,EPO后培养 1- 4周的脐血单个核细胞分化为CD1a+ ,CD11c+ ,CD83+ ,CDw12 3+ 树突状细胞 ,在培养的 2 - 4周 ,脐血树突状细胞数量明显增多 ,此后逐渐减少。通过培养 ,树突状细胞数量增加 ,CD1a+ 细胞达 11.0 2× 10 5 ml,CD11c+ 细胞 2 8.2 4× 10 5 ml,CD83+ 细胞 10 .5 7× 10 5 ml,CDw12 3+ 细胞 18.7× 10