去氢表雄酮及其代谢产物对人肿瘤细胞系的抗增殖作用

目的:研究去氢表雄酮(DHEA)及其代谢物去氢表雄酮硫酸酯(DHEAs)对HepG2和HT-29细胞增殖的抑制作用及其机制。方法:HepG2和HT-29细胞分别分为对照组、不同浓度(1、10、50、100及200μmol·L-1)DHEA组和DHEAs组,孵育8、24、48及72h后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法和BrdU测定法检测DHEA对肿瘤细胞的生长抑制率,同时测定3-羟基-3-甲基戊二酸单酰A还原酶(HMGR)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)及乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:①MTT法结果显示,与对照组比较,不同浓度DHEA组HepG2和HT-29细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05)。作用24h时,100μmol·L-1DHEA组细胞增殖抑制率降低最显著(P<0.05),而DHEAs组差异无显著性(P>0.05)。②BrdU法结果显示,当DHEA浓度在50、100和200μmol·L-1时细胞的生长均显著受到抑制,尤其以HepG2细胞的生长抑制率最高(P<0.05)。③DHEA对HepG2细胞HMGR活性抑制率为62%,对HT-29细胞HMGR活性抑制率为51%,而DHEAs则无明显作用。④100μmol·L-1DHEA抑制G6PD的效力为85%,而DHEAs的抑制效力仅为6%。⑤DHEA和DHEAs对细胞LDH的活性影响组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论:DHEA对HepG2和HT-29两种肿瘤细胞系均具有较强的抗增殖作用,能明显降低细胞的G6PD或HMGR活性,DHEAs则无明显作用。

去氢表雄酮通过调节丝／苏氨酸蛋白激酶信号传导通路抑制大鼠Morris肝细胞瘤生长

目的探讨去氢表雄酮（DHEA）的体内抗癌作用及其机制。方法Buffalo大鼠21只随机分为空白对照组、肿瘤对照组（把Morris肝细胞瘤移植到大鼠的两肋皮下，建立Morris肝细胞瘤移植的Buffalo大鼠的体内模型，基础饲料喂养）、DHEA肿瘤组（建立Morris肝细胞瘤移植模型后，在喂养的基础饲料中添加DHEA）和去氢表雄酮硫酸酯（DHEAs）肿瘤组（建立Morris肝细胞瘤移植模型后，在喂养的基础饲料中添加DHEAs）。分别喂养4周后，Westernblot和免疫组织化学方法检测磷酸化丝／苏氨酸蛋白激酶（Akt）、PTEN等蛋白的表达，流式细胞术检测大鼠CD3、CD4、CD8和CD4／CD8。单因素方差分析对数据进行处理。结果DHEA肿瘤组的肝细胞瘤的质量为（8．31±0．61）g，较肿瘤对照组的（14．57±0．56）g显著减轻（P〈0．05）。Westernblot及免疫组织化学染色结果显示，DHEA肿瘤组的磷酸化Akt蛋白表达量降低，而PTEN蛋白表达增强；CD3阳性细胞百分率（74．97％±8．29％）较肿瘤对照组（56．45％±6．12％）明显提高（t=4．92，P〈0．05），CD4／CD8比值升高（1．75±0．22）。而DHEAs肿瘤组CD3阳性细胞百分率（60．04％±6．69％）较空白对照组（75．38％±9．76％）明显降低（t=3．87，P〈0．05），同时CD4／CD8比值也降低（1．48±0．56）。结论DHEA对体内的肿瘤具有明显的抑制作用，此作用可能是其通过调节体内的Akt信号传导通路和免疫功能来完成的。