阶梯式诱导法建立抗5-FU细胞株MiaPaca2-5-FU

目的：建立稳定可传代的抗化疗药物5-FU或gemeitabine的MiaPaca2细胞株。方法：MiaPaca2细胞株暴露于浓度逐步升高的化疗药物5-FU或gemcitabine中(阶梯式诱导)，经过40周的筛选，XTT法测定吸光率，得出IC50值，算出诱导细胞株相对于母细胞株的耐药指数。结果：96孔培养板中，MiaPaca2细胞数约为1×10^4／孔，加入XTT后培养约2h后测XTT吸光率。根据药物浓度-细胞生存率曲线算出5-FU在亲代细胞株的IC50值为0．044±0．011mg／ml，在耐药株的IC50值为0．39±0．02mg／ml，算出MiaPaca2-5-FU的耐药指数RI>8倍；而MiaPaca2-gemeitabine的RI<8。亲代细胞株呈圆形，MiaPaca2-5-FU耐药株呈梭形。结论：通过阶梯式诱导法可以获得稳定的抗5-FU的MiaPaca2-5-FU细胞株。