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乙脑病毒prME与E蛋白编码基因重组构建的DNA免疫试验研究
被引量:
7
1
作者
冯国和
赵桂珍
+3 位作者
竹上勉
窦晓光
乔光彦
周子文
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期505-509,共5页
目的 研究乙脑病毒prME、E蛋白的体外表达特点 ,比较不同重组质粒所进行的DNA免疫效率。方法 分别将乙脑病毒 (JaGAr 0 1株 )prME、E蛋白编码基因 (2 0 0 1bp、15 0 0bp)构建于融合FLAG标记基因的真核表达载体pcDNA(FLAG) 3上 (pJME、...
目的 研究乙脑病毒prME、E蛋白的体外表达特点 ,比较不同重组质粒所进行的DNA免疫效率。方法 分别将乙脑病毒 (JaGAr 0 1株 )prME、E蛋白编码基因 (2 0 0 1bp、15 0 0bp)构建于融合FLAG标记基因的真核表达载体pcDNA(FLAG) 3上 (pJME、pJE) ,脂质体法将二重组质粒转染于HepG2及COS 1细胞系 ;采用不同抗体系统 (anti FLAG、anti E) ,经Westernblot法检测乙脑病毒prME[相对分子质量 (Mr)约 72× 10 3]与E(Mr 约 5 4× 10 3)蛋白表达水平 ;将质粒肌注BALB c鼠 ,二次免疫后 3周 ,腹腔注射乙脑病毒 (10 5PFU 10 0 μl)作为病毒攻击并观察 2 1d。 80 %空斑减少中和实验法检测中和抗体滴度变化。结果 anti FLAG可检测到由质粒pJME、pJE编码的相应蛋白产物在转染细胞内表达 ,同时在pJME转染的细胞内检测到一个新的 11× 10 3的低Mr 蛋白。anti E仅在pJME转染的细胞内检测到E蛋白。肌注pJME可产生高水平中和抗体滴度以及诱导有效的保护性免疫 ,效果等同于普通灭活JE疫苗 ,但优于pJE。结论 pJME的体外表达水平优于pJE。DNA免疫实验结果与prME。
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关键词
DNA免疫试验
流行性乙型脑炎病毒
重组质粒
蛋白表达
流行性乙型肝炎
原文传递
题名
乙脑病毒prME与E蛋白编码基因重组构建的DNA免疫试验研究
被引量:
7
1
作者
冯国和
赵桂珍
竹上勉
窦晓光
乔光彦
周子文
机构
中国
医科
大学
第二临床学院感染科
日本金泽医科大学综合医学研究所热带医学研究部门
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第5期505-509,共5页
基金
日本金泽医科大学High TechnologycenterH2 0 0 0 2项目资助
文摘
目的 研究乙脑病毒prME、E蛋白的体外表达特点 ,比较不同重组质粒所进行的DNA免疫效率。方法 分别将乙脑病毒 (JaGAr 0 1株 )prME、E蛋白编码基因 (2 0 0 1bp、15 0 0bp)构建于融合FLAG标记基因的真核表达载体pcDNA(FLAG) 3上 (pJME、pJE) ,脂质体法将二重组质粒转染于HepG2及COS 1细胞系 ;采用不同抗体系统 (anti FLAG、anti E) ,经Westernblot法检测乙脑病毒prME[相对分子质量 (Mr)约 72× 10 3]与E(Mr 约 5 4× 10 3)蛋白表达水平 ;将质粒肌注BALB c鼠 ,二次免疫后 3周 ,腹腔注射乙脑病毒 (10 5PFU 10 0 μl)作为病毒攻击并观察 2 1d。 80 %空斑减少中和实验法检测中和抗体滴度变化。结果 anti FLAG可检测到由质粒pJME、pJE编码的相应蛋白产物在转染细胞内表达 ,同时在pJME转染的细胞内检测到一个新的 11× 10 3的低Mr 蛋白。anti E仅在pJME转染的细胞内检测到E蛋白。肌注pJME可产生高水平中和抗体滴度以及诱导有效的保护性免疫 ,效果等同于普通灭活JE疫苗 ,但优于pJE。结论 pJME的体外表达水平优于pJE。DNA免疫实验结果与prME。
关键词
DNA免疫试验
流行性乙型脑炎病毒
重组质粒
蛋白表达
流行性乙型肝炎
Keywords
Japanese encephalitis virus
Recombinant plasmid
Protein expression
DNA immunization
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
乙脑病毒prME与E蛋白编码基因重组构建的DNA免疫试验研究
冯国和
赵桂珍
竹上勉
窦晓光
乔光彦
周子文
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
7
原文传递
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