氧化应激在醛固酮/盐慢性灌注致肾损害中的作用

目的:探讨氧化应激在醛固酮诱导肾损害中的作用。方法:SD大鼠随机分为单纯氯化钠组、醛固酮/盐慢性灌注组、eplerenone组、Tempol组。采用RT-PCR法检测肾皮质NA(D P)H氧化酶亚基p22phox和Nox-4 mRNA水平。结果:醛固酮/盐慢性灌注组大鼠的血压(165±5)mmHg,24 h尿蛋白排泄率(101±24)mg/d,肾皮质脂类过氧化反应产物TBARS水平(0.23±0.02)nmol/mg,与单纯氯化钠组大鼠的(118±3)mmHg、(9±3)mg/d及(0.09±0.01)nmol/mg比较,明显升高(P<0.05);肾皮质NAD(P)H氧化酶亚基p22phox和Nox-4 mRNA表达分别升高(2.8±0.2)倍和(3.9±0.8)倍(P<0.05)。eplerenone或Tempol明显降低了醛固酮/盐灌注组大鼠的血压,分别降低至(127±2)和(125±5)mmHg,尿蛋白排泄率分别降低至(10±2)和(10±3)mg/d,肾皮质TBARS水平分别降低至(0.08±0.01)和(0.11±0.01)nmol/mg(P<0.05)。结论:氧化应激在醛固酮诱导的肾损害中发挥重要作用。

法舒地尔抑制醛固酮对单侧肾切除大鼠的肾损伤作用

目的观察Rho/Rho激酶通路是否参与醛固酮加氯化钠诱导的肾脏损伤并探讨可能的机制。方法把单肾切除、进饮1%氯化钠的SD大鼠随机分为3组：对照组（2%乙醇皮下泵入）、醛固酮组（2%乙醇＋醛固酮0.75μg/h皮下泵入）和醛固酮＋法舒地尔（fasudil）组（2%乙醇＋醛固酮0.75μg/h皮下泵入＋fasudil 10 mg·kg^-1·d^-1皮下注射）。5周后,检测3组大鼠血压、尿蛋白改变;PAS染色和Masson三染法观察肾脏组织学变化;放射免疫方法检测肾皮质血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平;Western印迹法检测血管紧张素转化酶（ACE）、磷酸化（p）RhoA及p-MYPT1水平;实时定量PCR检测转化生长因子β1（TGF-β1）及胶原Ⅰ、ⅢmRNA表达。结果与对照组比较,醛固酮诱发了严重的高血压[（193±3）mm Hg比（130±4）mm Hg,P〈0.05]、大量尿蛋白量（24 h）[（362±93）mg比（22±3）mg,P〈0.05]及肾小球、肾小管间质损伤,同时伴随肾皮质AngⅡ水平[（154±16）pmol/g比（81±8）pmol/g,P〈0.05]及ACE表达增高,RhoA及Rho激酶活性增强,肾皮质TGF-β1、胶原Ⅰ、胶原ⅢmRNA表达增加。而fasudil在抑制Rho激酶活性的同时,在没有影响血压的情况下,显著减少了尿蛋白量（24 h）[（96±22） mg],减轻了肾小球及肾小管间质损伤,并且减少了肾皮质TGF-β1、胶原Ⅰ、胶原ⅢmRNA表达。但肾内AngⅡ水平[（148±11）pmol/g]、ACE及RhoA表达无改变。结论Rho/Rho激酶通路参与了醛固酮加氯化钠诱导的肾损伤。fasudil对醛固酮加氯化钠肾脏损伤的保护作用并非通过抑制肾内ACE过表达及AngⅡ增多而实现。