不同荧光探针检测微囊藻毒素-LR诱导的氧自由基

目的研究微囊藻毒素-LR(MC-LR)对人肝细胞内超氧阴离子自由基(O2.-)、羟自由基(.OH)水平的影响,探讨不同荧光探针的检测效果。方法调整人肝癌HepG2细胞密度为5×104/mL,分别设终浓度为10,30,100μmol/L的MC-LR染毒组和去铁敏(DFO,1 mmol/L)对照组以及MC-LR(100μmol/L)+DFO(1 mmol/L)染毒组,另设溶剂对照组(0.1%DMSO),培养4 h后应用荧光探针氢化乙啶(HE)和2-[6-(4'-羟基)苯氧基-3H-占吨醇-3-on-9-yl]-苯甲酸(HPF)分别检测细胞内O2.-和.OH含量。结果 30～100μmol/L的MC-LR染毒4 h后细胞内O2.-和.OH含量明显高于溶剂对照组(P<0.05),染毒剂量与.OH含量之间呈现剂量-反应关系,去铁敏和MC-LR联合染毒组的O2.-和.OH含量明显低于100μmol/L MC-LR染毒组(P<0.05)。结论 MC-LR可引起人肝癌HepG2细胞内O2.-和.OH含量升高,用荧光探针HE和HPF能够快速、灵敏地检测细胞内的超氧阴离子自由基和羟自由基水平。