ESAT6蛋白与结核菌素纯蛋白衍生物联合ELISA法诊断结核病的研究

目的探讨早期分泌性抗原靶6(early secretory antigenic target-6,ESAT-6)、结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)联合进行血清学诊断结核病的效果。方法 ESAT6基因被插入到原核表达载体pGEX-5T中,与谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)融合进行表达。表达的GST-ESAT6融合蛋白经亲和层析和分子筛进行纯化。针对64例结核患者血清和40例健康人血清,进行了ESAT6、PPD抗体反应性实验,评估二者血清学诊断的敏感性和特异性。结果融合表达的ESAT6蛋白保持天然的免疫原性,在Western blot实验中,可以被结核病人血清所识别。PPD抗体诊断敏感性是84.4%,特异性是65%。ESAT6抗体诊断敏感性是68.75%,特异性是95%。ESAT6、PPD-酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)联合诊断,敏感性是93.4%,特异性是95%。结论 ESAT6、PPD抗体联合判断可以提高结核病诊断的准确性。