嘌呤核苷磷酸化酶检测体系优化及芒果苷对其活性的影响

目的优化体外嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,PNP)活性检测体系,研究芒果苷及芒果苷元对PNP活性的影响。方法采用紫外分光光度法,通过考察酶浓度、底物浓度、二硫苏糖醇(DTT)浓度对酶促反应的影响,确定检测酶活性的最适反应条件,以此为基础研究芒果苷和芒果苷元对PNP活性的影响。结果成功建立并优化了体外PNP活性检测体系,反应温度为25℃时,在磷酸钾盐缓冲液中,当PNP浓度为250 U·L-1、底物鸟苷为400μmol·L-1、DTT为0.5 mmol·L-1的反应条件下于波长258nm处动态监测15 min,芒果苷及其代谢产物苷元在浓度高达100μmol·L-1时,对PNP活性无明显抑制作用。结论以优化的PNP活性检测体系研究发现芒果苷及芒果苷元体外对PNP活性无影响。

内皮素在脑缺血大鼠脑内激活的小胶质细胞中的表达

目的：研究大鼠局灶性脑缺血后内皮素 （ETs） 在激活的小胶质细胞中的表达变化,探讨ETs与脑缺血的关系.方法：采用微创开颅法建立大鼠大脑中动脉闭塞 （MCAO） 模型,分为缺血组和假手术组.应用荧光双标和激光共聚焦显微镜观察脑缺血后小胶质细胞的变化及ETs在激活的小胶质细胞的表达变化;应用Real time PCR分析脑缺血后大脑皮层ETs mRNA的表达.结果： 在缺血中央区可见大量坏死细胞,在半暗区可见大量激活的小胶质细胞,以缺血后3d、1周数量最多,达高峰,正常灌注区小胶质细胞与对照组及缺血对侧脑组织相似,为静息状态的小胶质细胞.荧光双标染色可见激活的小胶质细胞与ETs免疫阳性细胞有共表达,静息状态的小胶质细胞则呈阴性.Real time PCR分析显示,缺血侧皮层ET-1 mRNA和ET-3 mRNA水平与对侧及假手术组皮层比较均升高,高峰分别在缺血后12h和2h.结论： 脑缺血后激活的小胶质细胞如胚胎时期和生后早期的阿米巴样小胶质细胞一样表达ETs,成为ETs的一个重要细胞来源,可能参与了脑缺血的病理过程.

微量单道可调移液器的日常使用及维护

微量单道可调移液器是实验技术人员在工作中常用的设备,其使用、维护和校准直接影响着对样品检验的结果[1,4],是实验技术人员必须掌握的一项基本技能.近年来,随着本科学生、研究生参与科研的机会越来越多,指导教师往往会忽视一些对小仪器的培训,为此。

有关高校大型仪器使用效率的探讨

大型仪器设备是高等学校从事教学、科研的必备工具,也是反映高等学校办学水平和综合实力的重要指标之一[1-4].近年来,昆明医学院在国家和省政府的大力支持下,大型仪器的拥有量不断扩大,为了管理好、使用好这些大型仪器。