癌性胸腹水TIL体外抗肿瘤作用研究

采用不连续密度梯度分离法分别从３例肺癌胸水和１例胰头癌腹水中分离、诱导培养出肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ），并用乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放法分析了白细胞介素Ⅱ培养前后ＴＩＬ的体外抗肿瘤作用．结果表明：新鲜分离的ＴＩＬ对自体肿瘤细胞，Ｋ（５６２）细胞及Ｒａｊｉ细胞杀伤力很低，经ＩＬ－２培养后对上述肿瘤细胞的杀伤能力增强，并随培养时间增强，培养到第１５～２０ｄ杀伤力较强，以后逐渐减弱．ＴＩＬ在体外可生长４０余天．ＴＩＬ对自体肿瘤的杀伤活性明显高于对异体肿瘤的杀伤活性（Ｐ＜０．０５）．对Ｒａｊｉ细胞的杀伤率高于对Ｋ（５６２）细胞的杀伤率．研究认为新鲜分离的ＴＩＬ可能处于一种免疫抑制状态，白细胞介素Ⅱ培养可能解除了这种抑制，而提高了抗瘤活性．这种活性以ＬＡＫ样作用为主．同时，ＩＬ－２培养提高了ＴＩＬ对自身肿瘤的特异细胞毒作用．

放疗加热疗治疗体表恶性肿瘤的研究

为了探讨热疗配合放疗对恶性肿瘤的杀伤作用和机制 ,用移植胰腺癌的小鼠行热疗实验 ,热疗加放疗治疗鼻咽癌颈淋巴结转移灶 2 0例 ,单纯放疗 (对照 ) 2 0例 ,单纯热疗乳腺癌术后胸壁复发 5例 .结果表明 :热疗后荷瘤小鼠肿瘤体积缩小 ,肿瘤周边部细胞活率及再接种小鼠的成瘤率明显下降 .热放疗组的病灶全消率提高 ,放射剂量减少 ,组织学检查证实热疗后癌细胞核碎裂、坏死 .结论 :热疗对肿瘤有明显抑制杀伤作用 ,配合放疗能有效提高肿瘤全消率 ,减少放疗剂量 .

金荞麦根体外培养人肿瘤细胞的抗癌研究

利用直接杀伤细胞法，集落培养抑制法及ＤＮＡ前体物质参入法研究金荞麦根对体外培养的多种人癌细胞的抗癌作用。结果：此药在１ｇ·Ｌ－１时对多种人癌细胞的杀伤率均超过一个对数杀灭，浓度降低至０．１２５ｇ·Ｌ－１的杀伤率仍接近一个对数杀灭达７４．３％～９２．ｌ％。金荞麦根中的提取物具有明显抗癌作用，其浓度为０．１，０．０５ｇ·Ｌ－１对多种癌细胞的集落抑制率达１００％，浓度为０．０１２５ｇ·Ｌ－１时抑制率达７５．ｌ％～８９．２％。再用３Ｈ－ＴｄＲ标记法观察发现：金Ｅ能明显抑制癌细胞内的核酸代谢，其抑制作用与同浓度的阳性对照氟尿嘧啶近似。

斑蝥素衍生物与铂络合物抗癌活性的实验研究

目的：研究４种斑蝥素衍生物与铂络合物（斑铂，Ｄｐｔ）对实验动物的抗癌作用，力图开发一种新型的铂族金属抗癌药。方法：以Ｓ１８０肉瘤、Ｈ２２肝癌实体瘤及其腹水瘤小鼠为实验动物，通过腹腔或静脉给予不同剂量的４种化合物Ｄｐｔ１－１５、Ｄｐｔ５－１０、Ｄｐｔ１２－３、Ｄｐｔ６－２，分别观察药物对小鼠瘤重及存活天数的影响，以顺铂为阳性对照，生理盐水为阴性对照。所有数据进行ｔ检验。结果：４种斑铂（Ｄｐｔ１－１５、Ｄｐｔ５－１０、Ｄｐｔ１２－３、Ｄｐｔ６－２）均有抗癌活性。其中Ｄｐｔ５－１０、Ｄｐｔ１－１５对小鼠Ｓ１８０肉瘤及Ｈ２２实体瘤的抑制率与顺铂相似；Ｄｐｔ５－１０对Ｈ２２腹水瘤小鼠生命延长率与顺铂相似；Ｄｐｔ１－１５的有效剂量毒性较大。结论：斑铂是有效的新型抗癌化合物，其中Ｄｐｔ５－１０抗癌作用较好，应进一步改进药物溶解性，并从与顺铂抗药性不同方面开发利用。

晶状体上皮细胞凋亡与过氧化氢诱导白内障形成研究

目的探讨晶状体上皮细胞凋亡与皮质性白内障形成的关系。方法用２００μｍｏｌ／Ｌ过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导离休兔晶状体白内障形成，ＴＵＮＥＬ法检测 Ｈ２Ｏ２作用 １，６，１８，２４，４８ ｈ的晶状体上皮凋亡细胞，同时测定晶状体超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。结果 Ｈ２Ｏ２作用 １ｈ，晶状体保持透明，未发现凋亡上皮细胞。随着作用时间的延长，凋亡上皮细胞数量逐渐增多，晶状体逐渐变混浊。 ＳＯＤ活性早期无变化，１８ ｈ后逐渐降低。结论晶状体上皮细胞凋亡是皮质性白内障形成的细胞学基础，其发生先于晶状体抗氧化机制的变化。

复方抗癌合剂的体外实验研究

目的 :为了寻找效高、毒低的抗癌中草药 ,我所通过十余年的抗癌中草药筛选 ,将其中的十余种组成方剂。复方抗癌剂为三七、半枝莲半夏、白茅根、黄芪、柴胡、土茯苓、川芎、莪术、白花蛇舌草、桂枝等十余味中草药组成的复方水煎剂。方法 :本文通过体外癌细胞杀伤实验 ,癌细胞集落形成抑制实验 ,MTT检测细胞毒性实验。结果 :三项实验指标显示复方抗癌合剂对 GL C肺癌细胞、SGC胃癌细胞、Hela宫颈鳞癌细胞均有明显的抑制杀伤效果 ,对肿瘤干细胞集落形成也有明显的抑制作用。 MTT检测说明复方抗癌合剂的量效关系为阳性对照药长春新碱的 1/10 ,而复方抗癌合剂为水煮粗提液 ,今后可通过化学提纯有效成份 。

肺癌细胞相关蛋白分子N35的实验研究

目的分析肺癌相关蛋白N35的有关特性 ,探讨其潜在的临床应用价值。方法以抗人肺癌mAbN 35作为免疫探针 ,用免疫沉淀和免疫印迹法 ,测定其相关抗原在肺癌组织、肺癌细胞系GLC 82 ,宫颈癌细胞系HeLa ,肝癌细胞系HepG 2 ,乳腺癌细胞系PMC ,正常人心脏及肺组织的存在与分布情况 ;用N 聚糖酶酶解方法确定肺癌相关蛋白N35与糖蛋白分子的关系 ;用差速离心技术分离出肺腺癌细胞系GLC 82亚细胞结构中的胞膜、胞核及线粒体成分 ,经免疫印迹法测定相关蛋白N35在亚细胞结构中的分布状况 ;用免疫荧光技术检测肺癌相关蛋白N35在肿瘤细胞有丝分裂过程中的功能结构定位。结果肺癌相关蛋白N35是一种糖蛋白分子 ,不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中 ,而是以不同分子质量的形式分布于GLC 82 ,HeLa,HepG 2和PMC细胞蛋白中 ;在亚细胞结构中主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布最少 ,不支持其以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ;在肿瘤细胞有丝分裂进入S至G2 期时 ,明确地定位于中心粒(centriole)结构上 ,提示其功能可能与肿瘤细胞的无限制增殖有关。结论肺癌相关蛋白N35是一种只存在于肿瘤细胞并与其无限增殖密切相关的蛋白分子 ,有可能具有调节肿瘤细胞生长的作用。

肿瘤细胞库建立18年及其低温冻存技术

Objective In order to establish tumour cell line and screen anticancer drugs. Methods We froze cell line in liquid nitrogen container with 10% glycerin. Some of them were kept more than 15 years. Results Cell livability rate arrived at 80%～90% after anabiosis. Conclusion Our cell store is suitable to offer cell line for scientific research and for complete task of investigation.

基因重组构建MDR基因表达载体及其表达研究

利用基因重组技术，成功地构建了人ＭＤＲＩ基因片断的表达载体ｐＧＥ－Ｈｍｄｒ－１，用氯化钙方法转化Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１，挑选２０个克隆扩增培养，经提质粒，酶切，Ａｇａｒｏｓｅ电泳检测证实：其中４个克隆含有重组质粒，选用含重组质粒载体的菌株扩增培养，经ＩＰＴＧ诱导，超声波破碎，抽提蛋白，ＧＳＨ－ａｇａｒｏｓｅ亲和层析纯化，ＳＤＳ－ｐＡＧＥ电泳检测证实：此重组载体已表达所需的目的蛋白（ＧＳＴ－ｍｄｒ融合蛋白）．该表达载体的构建，为基因工程制备人ＭＤＲ基因产物Ｐ－糖蛋白奠定了基础，纯化的Ｐ－糖蛋白将用作抗原制备特异的抗Ｐ－糖蛋白的单克隆抗体，也可用于筛选逆转ＭＤＲ药物的底物。

肺癌单抗识别的肿瘤相关抗原特性分析

用免疫沉淀和免疫印迹法测定肿瘤相关抗原N - 35在不同肿瘤细胞及正常人心脏和肺组织的存在和分布情况 ;用N -聚糖酶酶解方法确定与单克隆抗体N - 35相对应的相关蛋白为一糖蛋白分子 ,不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中 ,而以不同分子量形式分布于不同肿瘤细胞的蛋白组分中 .采用差速离心技术分离出肺腺癌细胞系GLC - 82亚细胞结构中的胞膜、胞核及线粒体成分 ,确认N - 35相关蛋白主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布量少 ,主要不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ;经免疫荧光检测发现肿瘤相关抗原N - 35定位于肿瘤细胞有丝分裂S期的中心粒 (centriole)结构上 ,其功能很可能与肿瘤细胞无限增殖活动有关 .

宫颈癌细胞膜抗原的制备及其免疫原性研究

采用逐级高渗盐溶液处理小鼠宫颈癌细胞，获得结构似花环状的宫颈癌影细胞即膜抗原。形态学观察显示该影细胞形状、大小均与宫颈癌细胞相似，核为空泡状，其胞膜连续完整，与核膜、胞浆组成一个空泡状的影细胞。该影细胞已失去分裂增殖能力。用其免疫小鼠可诱导显著的细胞和体液免疫反应，提示该影细胞保留了原有的肿瘤免疫原性，用该影细胞预先接种免疫小鼠可有效地抑制宫颈癌细胞的攻击力，该项研究对于宫颈癌疫苗的研制具有重要意义。

N35肺癌相关蛋白的特性

目的：分析和确定N35肺癌相关蛋白的有关特性及其潜在的临床应用价值。方法：利用抗人肺癌单克隆抗体N35作为免疫探针，经免疫沉淀和免疫印迹法测定其相关抗原在肺癌细胞系GLC82、宫颈癌细胞系Hela、肝癌细胞系HepG2、乳腺癌细胞系PMC、正常人心脏及肺组织中的存在及分布情况；用N聚糖酶酶解方法确定肿瘤相关蛋白N35与糖蛋白分子的关系；采用差速离心技术分离出肺腺癌细胞系GLC82亚细胞结构中的胞膜、胞核及线粒体成分，分别取样经免疫印迹法测定肿瘤相关蛋白N35在亚细胞结构中的分布状况并与免疫组化结果相印证；用免疫荧光技术探测肿瘤相关蛋白N35在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位；用多种免疫亲和层析技术尝试获得大量纯化肿瘤相关蛋白N35的有效方法。结果：肿瘤相关蛋白N35是一种糖蛋白分子，不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中，而以不同分子量形式分布于GLC82、Hela、HepG2和PMC细胞蛋白中；在亚细胞结构中主要分布于胞核，线粒体次之，胞膜上分布最少，似不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在；在肿瘤细胞有丝分裂进入S至G2期时明确地定位于中心粒（centriole）结构上，强烈提示其功能可能与肿瘤细胞无限制增殖活动有关；麦芽凝集素亲和层析法是大量纯化肿瘤相关蛋白N35最有效的途径。结?

免疫组化和PCR方法检测乳癌腋窝淋巴结微转移的比较

目的 :探讨通过不同方法检测腋窝淋巴结MUC 1基因表达 ,以提高微转移灶诊断率。方法 :收集 10 8个常规组织学检查阴性的腋窝淋巴结 ,分别用免疫组化及RT -PCR法测定MUC 1蛋白及MUC 1mRNA的表达。结果 :MUC 1mRNA阳性检出率为 6 6 % ,明显高于蛋白表达检出率 2 1%。 (P <0 0 5 )。结论 :建立起MUC 1基因的RT -PCR分析法 ,进一步提高微转移灶诊断率 。

单克隆抗体N35对肺癌相关抗原的识别

研究和确定肺癌相关抗原的有关特征及其意义。方法 :利用抗人肺癌单克隆抗体N 35作为免疫探针 ,经免疫沉淀和免疫印迹法测定其相关抗原在肺癌细胞系GLC 82、宫颈癌细胞系HeLa、肝癌细胞系HepG 2、乳腺癌细胞系PMC、正常人心脏及肺组织的存在及分布情况 ;用N 聚糖酶酶解方法确定肿瘤相关蛋白N35与糖蛋白分子的关系 ;用差速离心技术分离肺腺癌细胞系GLC 82亚细胞结构中的胞膜 ,胞核及线粒体成分 ,分别取样经免疫印迹法测定肿瘤相关抗原N35在亚细胞结构中的分布状况 ;用免疫荧光技术探测肺腺癌相关抗原N35在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位 ;用 2种免疫亲和层析技术尝试获得大量纯化肿瘤相关蛋白N35的有效方法。结果 :肺腺癌相关抗原N35是一种糖蛋白分子 ,不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中 ,而以不同Mr形式分布于GLC 82 ,Hela,HepG 2和PMC细胞蛋白中 ;在亚细胞结构中主要分布于胞核 ,线粒体次之 ,胞膜上分布最少 ,主要不以膜蛋白或跨膜蛋白的形式存在 ;在肿瘤细胞有丝分裂进入S至G2 期时明确地定位于中心粒 (centriole)结构上。结论 :肿瘤相关蛋白N35可能是一种只存在于肿瘤细胞并与其增殖活动密切相关的重要的肿瘤细胞生长调节蛋白 。

人癌细胞短期培养预测敏感药物的探索

近年来,我们利用患者的肿瘤组织进行短期培养,做自身抗肿瘤药物的敏感性检验,预测肿瘤对化疗药物的个体差异,企图为患者选择较敏感的抗癌药。经实践,此法可用于多种肿瘤类型,能快速地筛选化疗有效药物,使临床用药个体化。 材料和方法 一、材料 1、标本:肿瘤标本取自1988年9月—1990年4月我院及外院送检手术切除的新鲜肿瘤组织,包括活检组织,转移淋巴结、癌性胸、腹水、心包积液。

云南个旧肺癌相关蛋白特性分析

目的分析和确定云南个旧肺腺癌细胞系CLC－82肿瘤相关蛋白的有关特性及其潜在的临床应用价值。方法利用抗人肺癌单克隆抗体N—35作为免疫探针，经免疫沉淀和免疫印迹法测定了其相关抗原在肺癌细胞系CLC－82，宫颈癌细胞系Hela．肝癌细胞系HepG－2，乳腺癌细胞系PMC、正常人心脏及肺组织的存在及分布情况；用N-聚糖酸酶解方法确定肿瘤相关蛋白N35与糖蛋白分子的关系；采用差速离心技术分离出肺腺癌细胞系CLC－82亚细胞结构中的胞膜，胞核及线粒体成分，分别取样经免疫印迹法测定肿瘤相关蛋白N35在亚细胞结构中的分布状况；用免疫荧光技术探测肿瘤相关蛋白N35在肿瘤细胞有丝分裂过程中的染色体结构定位；用多种免疫亲和层析技术尝试获得大量纯化肿瘤相关蛋白N35的有效方法。结果肿瘤相关蛋白N35是一种糖蛋白分子，不存在于正常人心脏及肺组织蛋白组分中．而以不同分子量形式分布于CLC－82，Hela，HevG－2和PMC细胞蛋白中；在亚细胞结构中主要分布于胞核，线粒体次之，胞膜上分布最少，似不以胰蛋白或跨胰蛋白的形式存在；在肿瘤细胞有丝分裂进入S至G2期时明确地定位于中心粒（centrotriol）结构上，强烈提示其功能可能与肿瘤细胞无限制增殖活动有关；

小鼠胰腺泡细胞癌瘤株长期保种传代探讨

目的 以昆明种小鼠胰腺腺泡细胞癌瘤株作为动物模型 ,对小鼠胰腺腺泡细胞癌做长期保种传代。方法 经细胞瘤株复苏后移植接种于小鼠腋部皮下 ,并对冻存的瘤细胞前后进行了生物学特性的比较研究。结果 延续保种传代达到 2 2 0代 ,癌细胞的生物学特殊性与原代细胞比较没有丢失和改变。结论 本文方法证明该瘤株细胞可移植性强。

猪胰岛移植物制备与异种移植治疗糖尿病

目的 增加胰岛收获量及减少移植后的宿主免疫排斥， 异种移植治疗糖尿病。方法 利用机械法分离成年猪胰岛， 葡聚糖离心纯化， 移植物用羊膜囊包裹移植于糖尿病人大网膜。结果 每个成年猪胰腺可收获胰岛６１～９０ 万个， 纯度达９０％ ； 胰岛形态完整， 对葡萄糖刺激反应胰岛素释放量是基础分泌的４ 倍； 异种移植后病人不用免疫抑制剂即可保持正常血糖１～３ 月， 半年后仍可减少胰岛素用量６０％ ～８０％ 。