CXCL12/CXCR4生物学轴在泌尿系肿瘤中的研究进展

趋化因子受体4(CXCR4)与其配体CXCL12结合组成的生物学轴具有高度特异性,在肿瘤细胞中广泛表达。对CXCL12/CXCR4生物学轴干扰可以影响肿瘤细胞的侵袭及转移,研究CXCL12/CXCR4生物学轴和泌尿系肿瘤之间的关系,可为泌尿系肿瘤的治疗开辟新的途径。现就CXCL12/CXCR4生物学轴与泌尿系肿瘤侵袭转移的关系进行综述。

血管紧张素Ⅱ及其受体在泌尿系肿瘤中的研究进展

血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其受体在心血管领域方面的作用已经有了非常广泛而深入的研究,但是在泌尿系肿瘤的治疗方面尚属新的领域。近年来研究表明,AngⅡ及其受体在肿瘤的发生、发展以及转移中发挥着重要作用,且在泌尿系肿瘤方面也有了一些研究进展。该文就AngⅡ及其受体在泌尿系肿瘤中的研究进展予以综述。

泌尿系肿瘤的微创治疗

近年来，随着影像学及内镜技术的发展及其在外科领域的成功实践，微创外科的概念日益深入人心，微创外科与外科微创化已成为21世纪外科的潮流。由于泌尿系统是通过尿道与外界相通的管道系统，为各种窥镜设备和技术的发展提供了便利条件，依靠各种窥镜，泌尿外科医生可以通过尿道对整个泌尿系统进行检查诊断和治疗，因此泌尿外科成为最早应用微创技术的学科。

经尿道等离子前列腺电切术治疗晚期前列腺癌膀胱出口梗阻37例

目的:探讨晚期前列腺癌膀胱出口梗阻的治疗方法。方法:经尿道等离子前列腺电切术姑息治疗37例患者,建立宽敞的通道,并且联合行睾丸切除去势和间歇内分泌治疗。结果:本组手术均获成功,无尿失禁和电切综合征等严重并发症发生,下尿路梗阻症状均明显改善或消失。术后2个月国际前列腺症状评分(IPSS)由术前的(21.2±3.5)下降至(9.1±1.8)(P<0.05),生活质量评分(QOL)由治疗前(4.6±1.2)降至(2.1±0.4)(P<0.05),最大尿流率由(8.1±2.8)mL/s上升为(18.9±2.1)mL/(sP<0.05)。结论:经尿道等离子前列腺电切术具有微创、恢复快和并发症少的优势,能有效改善晚期前列腺癌患者的膀胱出口梗阻症状和生存质量;联合睾丸切除去势和间歇内分泌治疗还可以抑制肿瘤生长、延长患者生存时间。

下尿路症状合并勃起功能障碍联合用药的有效性和安全性

目的:评价多沙唑嗪、非那雄胺和西地那非联合治疗BPH相关的LUTS和ED的有效性和安全性。方法:采用双盲、随机、安慰剂对照的临床研究,84例患者随机分入A、B、C组,A组服用多沙唑嗪、非那雄胺和安慰剂,B组服用多沙唑嗪、安慰剂和西地那非,C组服用多沙唑嗪、非那雄胺和西地那非。16周后比较各组的IIEF-5、IPSS、Qmax、夜尿次数和残余尿等,并记录不良反应。结果:A、B、C组的IIEF-5分别提高10.2%、57.1%和57.6%,IPSS分别降低22.2%、20.8%和20.1%。18例(21.4%)患者有较轻的不良反应。结论:多沙唑嗪、非那雄胺和西地那非联合治疗BPH相关的LUTS和ED是安全有效的。

膀胱癌组织及血、尿中血管生成因子和抑制因子表达的意义

目的探讨膀胱癌患者血清、尿液及癌组织中血管生成因子和抑制因子的表达水平与膀胱癌分级、分期的相关性,为运用内源性血管生成抑制因子抗膀胱癌治疗提供依据。方法采用ELISA法检测20例不同分级、分期膀胱癌患者血清、尿液中血管内皮生长因子(VEGF))、血管抑素(AS)、内皮抑素(ES)和Kringle5(K5)水平,免疫组织化学法检测膀胱癌组织标本中VEGF、AS、ES和K5表达情况。结果高分级、高分期组膀胱癌患者血清、尿液中VEGF、AS、ES和K5水平均高于低分级、低分期组(均P<0.05);在膀胱癌组织中,VEGF、AS、ES和K5主要着色部位为癌细胞胞质和癌细胞周围微血管内皮细胞,除K5外,VEGF、AS和ES在高分级、高分期膀胱癌组织中的表达均较低分级、低分期膀胱癌组织中的表达要高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论膀胱癌组织及血清、尿液中VEGF、AS和ES表达水平与肿瘤分级、分期呈正相关。

不同型号经皮肾通道治疗复杂性上尿路结石效果观察

目的比较不同型号的经皮肾通道联合钬激光治疗复杂性上尿路结石的临床疗效.方法 16 F经皮肾通道组纳入患者32例,20 F经皮肾通道组纳入患者20例.按常规方法建立经皮肾通道后,以钬激光碎石并洗出.比较2组间一期手术结石清除率、平均手术时间、术后血色素下降水平及输血率.结果 16 F经皮肾通道组一期手术结石清除率为47%(15/32),20 F经皮肾通道组一期手术结石清除率为65%(13/20),差异无统计学意义(P>0.05);16 F组平均手术时间为(2.3±0.6)h,20 F组平均手术时间为(1.5±0.5)h,差异有统计学意义(P<0.05);16 F组术后血色素下降水平为(16±7.5)g/L,20 F组术后血色素下降水平为(18±8.5)g/L,差异无统计学意义(P>0.05);16F组输血率为6%(2/32),20F组输血率为10%(2/20),差异无统计学意义(P>0.05).结论 20 F经皮肾通道治疗复杂性上尿路结石具有高效、快速、安全等优点,值得采用.

肿瘤相关抗原在不同病理分级膀胱尿路上皮癌中的表达

目的利用免疫组化法检测组织芯片中不同病理分级人膀胱尿路上皮癌组织中肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen,TAA)的表达。方法含不同病理分级的人膀胱尿路上皮癌组织芯片两张,免疫组化(Elivision)法检测膀胱尿路上皮癌组织中TAA的表达,并对不同病理分级膀胱尿路上皮癌组织中TAA表达程度、阳性表达率进行比较。结果膀胱尿路上皮癌TAA的阳性染色主要位于细胞膜,116块人膀胱尿路上皮癌组织中TAA的总阳性表达率为56.9%(66/116)。不同病理分级的膀胱尿路上皮癌组织中TAA的表达程度比较,差异无统计学意义(P>0.05);TAA的阳性表达率分别是:G1 50.0%(7/14)、G2 53.6%(22/41),G3 60.7%(37/61),不同病理分级TAA阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论膀胱尿路上皮癌组织中TAA的表达程度及阳性表达率与肿瘤的病理分级无关,组织芯片技术检测膀胱癌TAA的表达高效、快捷。

膀胱全切除后不同尿流改道术治疗肌层浸润性膀胱癌的辩证思考

肌层浸润性膀胱癌在膀胱全切后尿流改道术经过了3个重要阶段,即不可控尿流改道术、可控性尿流改道术以及原位膀胱重建术,这三种术式在治疗目的、手术和解剖技术上有共同之处,但在手术适应证、手术方式、手术并发症发病率上又有很大的不同。这种对立统一的关系对指导临床工作有重要意义。

树突状细胞与泌尿系肿瘤免疫治疗研究现状

树突状细胞（DC）是体内具有最强抗原提呈能力的专职性抗原提呈细胞（APC），由DC激活的T细胞免疫在机体抗肿瘤中起重要作用。近来各种DC疫苗及其应用于肿瘤治疗的研究应运而生，基于DC而研制的泌尿系肿瘤疫苗治疗的基础与临床研究结果显示，DC疫苗在泌尿系肿瘤治疗中具有良好的应用前景。

膀胱癌EJ细胞的CD44异常糖基化及其单抗KMP1的生物学功能研究

目的:研究EJ细胞单抗KMPl的结合抗原CD44的变化和KMPl对EJ细胞生物学功能的影响。方法:采用人膀胱癌EJ细胞株免疫BALB/c小鼠,获得单抗KMPl,免疫荧光检测KMPl的亲和性、结合部位及效价。流式细胞检测KMPl对膀胱癌细胞的特异性。免疫组化检测对膀胱癌组织的特异性。亲和层析分离纯化特异性抗原,检测抗原的氨基酸序列。糖基转化酶抑制剂和过碘酸氧化后分析抗原决定簇的理化性质改变。软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验检测KMPl对EJ细胞株的增殖和迁移功能的影响。结果:获得的单抗KMPl是IgGl,能与EJ、BIU-87、T24膀胱癌细胞和膀胱癌组织特异性结合,而与Lovo、HeLa、K562、HepC2、Jurkat、293、HCV29、人的红细胞和白细胞无结合性,也不能结合正常膀胱黏膜。其结合EJ细胞的抗原是异常糖基化的CD44,糖基转化酶抑制剂BC作用EJ细胞7d,KMPl对EJ细胞结合性降低,过碘酸氧化后Western blot显示KMPl对CD44结合性降低,软琼脂培养克隆形成实验和细胞划痕实验结果示KMPl还能减弱EJ细胞的增殖和迁移功能。结论:膀胱癌的高复发性、易转移可能与出现异常糖基化的CD44高表达具有一定的相关性,KMPl可结合异常糖基化的CD44,并抑制EJ细胞的增殖和迁移。

改良型TAT-凋亡素体外抗人膀胱肿瘤活性的研究

目的:探讨改良型TAT-凋亡素(TAT-VP3)融合基因在不同人膀胱癌细胞中的表达及诱导凋亡的效应方法:利用改良型TAT-VP3原核表达载体pGEX-6p-1-TAT-VP3构建真核表达载体PcDNA3-TAT-VP3,经BamH I/Xho I双酶切鉴定和基因测序无误后采用脂质体介导的基因转染法转染人膀胱癌BIU-87及EJ细胞,利用RT-PCR技术检测改良型TAT-VP3基因在细胞中的表达状况。通过透射电镜扫描观察转染后不同时段肿瘤细胞的超微结构变化,MTT法检测转染重组质粒后对人膀胱癌细胞的增殖活性的影响,流式细胞术TUNAL法检测转染重组质粒24、48、72h后BIU-87及EJ细胞的凋亡率,对实验结果进行统计学分析。结果:成功构建重组质粒PcDNA3-TAT-VP3并经测序无误,转染人膀胱癌细胞后的RT-PCR结果证实改良型TAT-VP3基因在人膀胱癌细胞中获得表达。透射电镜观察到BIU-87及EJ细胞凋亡早期染色质聚集,线粒体固缩,凋亡中晚期核固缩及凋亡小体等超微形态学改变。MTT法检测结果显示转染重组质粒PcDNA3-TAT-VP3后的BIU-87及EJ细胞增殖活性明显下降(P<0.01)。流式细胞术TUNAL法检测显示BIU-87及EJ细胞发生早期凋亡,其凋亡率随时间的推移呈逐渐上升趋势,转染72 h后BIU-87和EJ细胞的凋亡率分别为(30.44±1.47)%、(42.27±2.66)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01) 结论:改良型TAT-VP3基因的表达能早期、高效地诱导不同人膀胱癌细胞发生凋亡,为纯化改良型TAT-VP3融合蛋白以及将其应用于膀胱灌注治疗膀胱转移肿瘤的研究奠定实验基础。

VP3基因联合吉西他滨诱导人膀胱癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨鸡贫血病毒VP3基因在人膀胱癌EJ细胞株中的表达,观察VP3基因联合吉西他滨诱导人膀胱癌EJ细胞株凋亡的效应。方法用真核表达载体PcDNA3-VP3转染人膀胱癌EJ细胞株,利用RT-PCR技术检测VP3基因在EJ细胞中的表达状况。观察VP3基因和10-7mol/L、10-8mol/L、10-9mol/L浓度吉西他滨在体外单独或联合用药对人膀胱癌EJ细胞的增殖活性的影响,检测VP3基因和10-8mol/L浓度吉西他滨在体外单独或联合用药对人膀胱癌EJ细胞的凋亡作用。结果转染PcDNA3-VP3后VP3基因在EJ细胞中表达。转染重组质粒PcDNA3-VP3、吉西他滨各浓度、VP3基因联合吉西他滨各浓度的EJ细胞株的增殖活性明显下降(P<0.01)。透射电镜下观察到凋亡细胞的典型形态学特征。TUNAL法检测EJ细胞株凋亡率表现为:转染PcDNA3-VP3组高于对照组(P<0.01),10-8mol/L浓度的吉西他滨组高于对照组(P<0.01),联合组高于转染PcDNA3-VP3组(P<0.01)。结论VP3基因表达能高效诱导人膀胱癌EJ细胞株细胞凋亡,联合10-8mol/L浓度的吉西他滨能增加VP3基因诱导的人膀胱癌EJ细胞株凋亡。

酒石酸托特罗定治疗双极等离子前列腺剜除术后膀胱不适症状临床研究

目的评估酒石酸托特罗定治疗双极等离子前列腺剜除术后膀胱不适症状的疗效和安全性.方法采用前瞻双盲随机对照的临床研究,376例行双极等离子前列腺剜除术后的前列腺增生症患者被随机分入试验组(n=172)和对照组(n=204),试验组术后服用酒石酸托特罗定片,对照组术后服用安慰剂,均为2mg,Bid,连续6d.记录术后6d内患者的膀胱不适症状,并将膀胱不适症状分为轻、中、重度.结果对照组膀胱不适症状发生率为52.0%(106/204),高于试验组的41.3%(71/172)(P<0.05);并且试验组的膀胱不适症状的严重程度也低于对照组,但是试验组(10.5%)的尿潴留发生率高于对照组(2.0%);61.0%试验组患者有口干等不良反应.结论Tolterodine能安全有效的降低双极等离子前列腺剜除术后的膀胱不适症状的发生率和严重程度,但可能增加的尿潴留的风险.

RNA干扰靶向Survivin促进膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡的研究

目的针对凋亡抑制因子Survivin应用RNA干扰技术(RNA interference,RNA)i抑制膀胱癌细胞株BIU-87细胞内源性Survivin基因的表达进而促进膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡.方法构建重组质粒pshRNA-survivin1、pshRNA-surv-ivin2和pshRNA-survivin 3并转染BIU-87细胞株,应用免疫组化法检测细胞中Survivin蛋白的表达,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长增殖抑制率,利用流式细胞术检测细胞凋亡率.结果重组质粒转染BIU-87细胞后,Survivin蛋白表达明显下调,细胞凋亡率显著增加,细胞生长明显受抑.结论膀胱癌细胞高表达Survivin,RNA干扰特异性抑制Survivin表达,可以促进膀胱癌细胞凋亡和增殖活性明显下降.

膀胱肿瘤BIU-87细胞耐药诱导及逆转的实验研究

目的诱导BIU-87细胞对羟基喜树碱(HCPT)产生耐药,检测多药耐药相关蛋白和交叉耐药,观察维拉帕米(VPM)逆转耐药性的效果.方法用间隙给药法诱导BIU-87细胞对HCPT产生耐药,MTT法测定交叉耐药性,细胞免疫组化染色检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、Bcl-2和生存素Survivin,MTT法和流式细胞仪测定VPM逆转耐药性的效果.结果耐药诱导5个月,BIU-87/HCPT细胞对HCPT、长春新碱(VCR)、丝列霉素(MMC)和顺铂(CDDP)的耐药性均有提高,其中HCPT为55倍,VCR为26.88倍,而对阿霉素(ADM)耐药性提高不明显.经检测P-gp和MRP1均为++,Bcl-2和Survivin均为+++.VPM逆转耐药性有一定效果.结论BIU-87/HCPT细胞具有多药耐药性,对VCR的耐药指数最大,VPM能逆转其耐药性,但逆转效率低于文献报道,这些结果都可能与肿瘤细胞产生多药耐药的机制复杂和BIU-87/HCPT细胞的Bcl-2与Survivin的表达量比P-gp与MRP1高有关.

荷瘤SCID-hu鼠模型及其肿瘤实验研究现状

严重联合免疫缺陷鼠(severe combined immune deficiency mice,SCID)具有T、B淋巴细胞联合免疫缺陷等生物学特性,可以将人类有关免疫细胞、免疫组织和器官移植入其体内进行人免疫功能重建-SCID-hu鼠。荷瘤SCID-hu鼠模型为人类肿瘤的发病机制、生物治疗等方面的研究提供了良好的实验平台。

新的肿瘤转移抑制基因LASS2在不同侵袭潜能的膀胱癌细胞中表达的体外研究

目的探讨新发现的肿瘤转移抑制基因人源性长寿保障基因Ⅱ型(homo sapiens longevity assurance homologue2,LASS2)与人膀胱癌细胞侵袭潜能的关系。方法通过细胞生长曲线和体外侵袭实验,确定膀胱癌BIU-87、EJ、T24和EJ-M3细胞的增殖和侵袭能力;运用实时定量PCR法和Western blot法检测4株细胞中LASS2基因的表达。结果 4株膀胱癌细胞中,EJ-M3的增殖和侵袭能力最强;增殖和侵袭能力高的细胞系EJ-M3和BIU-87的LASS2mRNA表达降低(P<0.001),而在低转移能力的人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中则相对较高表达。结论 LASS2基因表达的降低,可能与膀胱癌细胞的增殖和侵袭有关。

膀胱肿瘤侵袭转移分子机制的研究进展

膀胱肿瘤的发病率近几年呈增长趋势,其发生发展、侵袭转移受很多因素的影响。关于膀胱肿瘤分子机制的研究有很多,包括趋化因子、基质金属蛋白酶、肿瘤转移相关基因、生长因子及血管紧张素等,但具体的作用机制到目前为止尚不明确,各种可能存在的分子机制仍在探索研究中。了解膀胱肿瘤侵袭转移的分子机制,对膀胱肿瘤的预防和治疗有很重要的临床意义。