逻辑思维在药理学教学中的应用

将传统逻辑思维方法（即比较和分类、分析和综合）及现代的形象思维有机的结合应用于药理学教学，使重点内容具体化、难点内容形象化、混淆内容对比化、零乱内容条理化，可在一定程度上提高药理学的教学效果。

红外线在医学中的应用

红外线具有热效应,并能使生物体分子产生共振吸收效应,辐射人体后可改善局部血液循环、解痉止痛等,能辅助治疗多种疾病, 尤其在肿瘤治疗方面,显示了其良好的应用前景。红外线的技术和仪器对人体无损害,对环境无污染,具有其他影像诊断设备所无法做到的人体器官代谢功能影像显示,开辟了以功能学为主的医学影像技术新领域,为疾病诊断和医学研究提供了影像显示手段和技术支撑,在医学实践及总结中发挥着重要作用。

药理量效关系曲线实验中常见错误分析

分析了药物量效关系曲线实验中常见错误,提高了药理学实验教学的质量。通过分析学生在实验中存在的常见问题,采取实验前针对性的讲解和实验中的指导,提高了实验成功率。该文中提到的理论基础知识和系统、规范的实验操作技能的训练,是达到提高学生动手能力和创新素质的重要环节。

滇白芷的药理研究(Ⅰ)

滇白芷总香豆素的药理实验结果为:①急性毒性实验,给小鼠po,LD50为2110±22mg/kg;②用热板法和化学刺激法作镇痛实验,显示镇痛作用;③能对抗乙酰胆硷对家兔离体及原位小肠的兴奋作用;④对豚鼠离体子宫正常收缩松弛作用,并能对抗垂体后叶素或麦角新硷对豚鼠离体子宫的兴奋;⑤对家兔原位子宫的正常收缩有松弛作用,并能对抗垂体后叶素或麦角新碱对家兔原位子宫的兴奋;⑥对兔心脏,滇白芷香豆素po后2h内心率稍减慢,但心电图并无异常。

云南几种中草药的药理作用及应用(文献复习)

本文报道云南中草药的部分制品、化学成分、药理及临床方面的研究结果,即:1.降压药,从云南萝芙木根中提出的总生物碱降压灵。2.治疗闭塞性脑血管病所致瘫痪的药物,从短亭飞蓬中提出的灯盏乙素。3.抗疟药,从青蒿中提出的青蒿素,本品尤对脑型疟疾有效,可作为抢救脑型疟疾的首选药。4.治疗婴幼儿轮状病毒性肠炎的药物,用马蹄香制成马蹄香药液(又名秋泻灵)。5.治疗急性及慢性肝炎的药物,从青叶胆提取的獐牙莱甙。6.治疗脑血栓形成、脑血管栓塞及脑血管病后遗症的药物,从三七根中提出的三七总皂甙,商品名为血塞通注射液。以上药物均开过鉴定会,鉴定结果成功。

三七皂苷Rg_1对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及机制探讨

目的探讨三七皂苷R g1对局灶性脑缺血-再灌注损伤大鼠大脑皮质中脑源性神经营养因子(BDNF)阳性蛋白的水平和阳性神经元数目是否具有上调作用。方法选取成年雄性SD大鼠60只,随机分为脑缺血-再灌注模型组、三七皂苷R g1高、中、低剂量(200、100、50 m g/kg)组和阳性对照(尼莫地平,1 m g/kg)组,采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型,各组ig给药并分别于给药后1、3、7 d随机取4只大鼠,以灌注法取脑组织,冰冻法切片,免疫组织化学ABC法染色,用高清晰度彩色病理图文报告分析系统测量、分析各组大鼠大脑皮质中BDNF阳性蛋白的水平和阳性神经元数目的变化,并观察大鼠脑缺血-再灌注后的神经功能缺失症状。结果与模型组相比,三七皂苷R g1高、中、低剂量均能明显改善脑缺血-再灌注的神经功能缺失症状,并能上调大鼠脑缺血-再灌注损伤的大脑皮质中BDNF阳性蛋白的水平和阳性神经元数量(P<0.05);各剂量的作用强于或相当于阳性对照。结论三七皂苷R g1能上调BDNF阳性蛋白的表达,通过BDNF对脑缺血-再灌注神经元损伤所起的保护作用,从而发挥其对脑缺血的治疗作用。

普鲁托品的抗实验性心律失常作用

采用８种动物实验性心律失常模型观察了普鲁托品（ｐｒｏｔｏｐｉｎｅ）的抗心律失常作用。结果表明，普导托品对由乌头碱、氯化钙、苯－肾上腺素引起的大鼠心律失常、氯仿所致的小鼠心室纤颤、电刺激所致的家兔心室纤颤均有保护作用。其作用机制似主要与其阻滞心肌细胞Ｎａ￣＋通道，延长有效不应期有关。

三七皂苷Rg_1对大鼠脑缺血再灌注损伤海马部位保护作用机制的研究

本文探讨三七皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠海马部位的脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophic factor,BDNF)阳性蛋白的含量和阳性神经元数目是否具有上调作用。实验结果表明三七皂苷Rg1高、中、低剂量组和阳性对照组均能明显改善脑缺血的神经缺失症状,并能上调大鼠脑缺血再灌注损伤海马部位的BDNF阳性蛋白的含量和阳性神经元数量(P<0.05);与阳性对照组(尼莫地平1 mg/kg)相比,用药7 d时,Rg1中剂量组(100 mg/kg)在改善脑缺血的神经缺失症状以及上调大鼠脑缺血再灌注损伤海马部位的BDNF阳性蛋白的含量和阳性神经元数量方面,作用上强于尼莫地平(P<0.05)。三七皂苷Rg1能上调BDNF阳性蛋白的表达,通过BDNF对脑缺血再灌注神经元损伤所起的保护作用,从而发挥其对脑缺血的治疗作用,这可能是三七皂苷Rg1对脑缺血保护作用的机制之一。

三七皂苷Rg_1对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨三七皂苷Rg1对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后大脑皮质中BDNFmRNA表达的影响。方法♂SD大鼠36只随机分为脑缺血再灌注模型组、三七皂苷Rg1组和尼莫地平组,采用线栓法制作模型,各组分别于术后1、3、5 d随机取4只大鼠处死后,取出脑组织,经石蜡包埋切片,片厚5μm。用地高辛标记的寡聚核苷酸探针进行原位杂交实验,用HPIAS-100高清晰度彩色病理图文报告分析系统测量分析大鼠大脑皮质的BDNFmRNA的含量和阳性神经元数目的变化。结果在脑缺血再灌注后不同的时间段上,与模型组比较,三七皂苷Rg1均能增加大脑皮质的BDNFmRNA含量及其阳性神经元的数量。用药3 d时,三七皂苷Rg1的作用达到高峰,且其作用在各时间段上均强于尼莫地平;5 d后,虽然BDNFmRNA的含量及阳性神经元的数量有一定程度的下降,但仍与三七皂苷Rg1组1 d时的表达水平相当,且三七皂苷Rg1组5 d时的表达水平仍强于模型组1 d和3 d时表达的水平及尼莫地平组1 d时的水平。结论三七皂苷Rg1通过上调大鼠脑缺血再灌注损伤后,大脑皮质BDNFmRNA的含量和阳性神经元的数量,可发挥其治疗作用,疗效强于阳性对照药尼莫地平。

在常规运动试验中以时域法微伏级T波电交替筛查冠心病的价值

目的:探讨在常规运动试验中以时域法微伏级T波电交替(MTWA)筛查冠心病的价值。方法:经冠状动脉(冠脉)造影确诊的冠心病患者152例为冠心病组。对照组为非冠心病者共140例。采用美国GEMarquette Case 800系统MTWA分析程序以时域法连续分析MTWA及最大MTWA时的心率(HR)为频率阈值,并计算MTWA/HR值。结果:冠心病组时域法MTWA、MTWA/HR值明显高于对照组[(22.04±7.22)μV比(10.63±6.71)μV,P<0.01]、(0.21±0.08比0.09±0.06,P<0.01);频率阈值低于对照组[(107.61±12.06)次/分比(126.23±9.42)次/分,P<0.01]。MTWA筛查冠心病的接收者操作特征曲线下面积为0.908(95%可信区间0.87～0.95,P<0.01),最佳切点为11.5μV(敏感性为97.66%,特异性为71.43%);MTWA/HR值筛查冠心病的接收者操作特征曲线下面积为0.934(95%可信区间0.90～0.97,P<0.01),最佳切点为0.12(敏感性为98.03%,特异性为82.86%)。结论:冠心病患者时域法MTWA的幅度明显高于非冠心病者,频率阈值明显降低,MTWA/HR比值可在运动试验中作为冠心病的筛查指标。

脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法效果比较

目的探讨脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法的效果。方法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,脑组织冰冻切片,采用兔抗BDNF(1∶500)抗体,同时运用漂片法和贴片法进行免疫组化ABC法染色。结果漂片法阳性神经元数目和灰度值与贴片法比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论脑组织切片免疫组化技术采用漂片法效果更为可靠。

人胚胎干细胞在血清和无血清培养体系中的特性比较

目的探讨血清培养体系和无血清培养体系对人胚胎干细胞(hES cells)生长特性的影响。方法将人胚胎干细胞株BG02接种在丝裂霉素C处理灭活的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,分别在含血清hES完全培养基或无血清培养基中连续培养25～30代。在不同培养体系下比较人胚胎干细胞形态、集落贴壁率;运用BrdU掺入法检测人胚胎干细胞增殖,用细胞计数法计算细胞倍增时间;采用免疫荧光染色检测人胚胎干细胞特异性分子标志的表达;用流式细胞仪检测人胚胎干细胞Oct-4,Nanog阳性的比例;RT-PCR检测成纤维细胞生长因子(FGFs)家族基因的表达。结果在两种培养体系的BG02细胞都具有人胚胎干细胞的形态特征。在含血清培养体系下,BG02细胞集落贴壁率和表达OCT-4,Nanog的阳性细胞明显高于无血清培养体系(P<0.05)。无血清培养体系中,BG02细胞生长速度明显高于含血清培养体系,细胞倍增时间分别为(33.8±4.3)h、(45.9±5.7)h,(P<0.05)。无血清培养体系的BG02细胞高表达FGF2、FGFR2、FGFR4。结论两种不同培养体系中人胚胎干细胞的体外培养特性存在一定的差异,可能与BG02细胞FGFs家族基因激活有关。

人胚胎干细胞无血清无饲养层培养体系的建立

背景:研究表明FGF2,TGFβ/activin/nodal和IGF信号通路是人胚胎干细胞保持其多能性所必需的,然而直接添加外源性碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β和胰岛素是否能够维持人胚胎干细胞的自我更新目前尚无报道。目的:拟建立人胚胎干细胞无饲养层无血清条件下的培养体系。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-09/2009-02在中国科学院昆明动物研究所完成。材料:12.5～13.5d龄清洁级ICR孕鼠2只,由昆明医学院动物中心提供。人胚胎干细胞株BG02购自美国Bresagen公司。方法:①消化离心BG02细胞,重悬于无饲养层过渡培养基后接种,常规培养5～7d,挑去分化的人胚胎干细胞,加入分散酶消化,切割成小团块,离心重悬后按1∶3比例重新接种预铺层粘连蛋白的4孔板,此时培养基换成无血清无饲养层培养基,由80%DMEM/F12、20%KSR、2mmol/Lglutamine、1%非必需氨基酸、0.1mmol/Lβ-巯基乙醇、ITS(×1)、106U/L青霉素、100mg/L链霉素、4μg/L碱性成纤维细胞生长因子、0.12μg/L转化生长因子β1组成。②无菌条件下取出ICR胎鼠,组织块胰酶消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞,接种在0.1%明胶包被的6孔板中即为饲养层。将生长在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上的人胚胎干细胞株BG02预铺至有层粘连蛋白的培养板上,加入含碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1及ITS的无血清培养基连续培养。主要观察指标:观察BG02细胞在无血清无饲养层培养体系中的形态,采用细胞免疫组化法检测人胚胎干细胞特异性分子标志的表达,检测BG02细胞体外分化能力及其核型,比较BG02细胞在无血清无饲养层和小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养体系中的生长情况、细胞集落分化率。结果:在无血清无饲养层培养体系中,BG02细胞连续传代20代,细胞呈典型的人胚胎干细胞形态特征;BG02细胞表达SSEA-4,SSEA-3,TRA-1-60,TRA-1-81,Oct-4,但不表达SSEA-1;培养20d后,BG02细胞进一步分化成3个胚层的细胞,分化细胞能够表达甲胎蛋白、巢蛋白、α-肌动蛋白;培养至20代细胞核型均正常(46XY)。与在饲养层培养体系下比较,无血清无饲养层条件下BG02细胞BG02细胞生长速度减慢,细胞倍增时间明显延长(P<0.05),集落分化率明显升高(P<0.05)。结论:实验初步建立了人胚胎干细胞无血清无饲养层的培养体系,添加碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1和ITS可以维持人胚胎干细胞的自我更新。

10－羟基－2－癸烯酸对小鼠T淋巴细胞及其亚型和白介素2产生的影响

观察了１０－羟基－２－癸烯酸（１０－ＨＤＡ）对小鼠Ｔ淋巴细胞及其亚型和白介素２产生的影响．结果表明，１０－ＨＤＡ１，５，２５ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１ｉｐ，５ｄ可拮抗环磷酰胺１００ｍｇ·ｋｇ－１对小鼠迟发型超敏反应（ＤＴＨ）的抑制作用．体外给药，１０－ＨＤＡ可促进刀豆球蛋白Ａ诱导的Ｔ淋巴细胞增殖反应；促进小鼠脾细胞产生白介素２．采用单克隆抗体间接免疫荧光法证明１０－ＨＤＡ可增加小鼠胸腺Ｌ３Ｔ＋４细胞数，而对Ｌｙｔ－２＋细胞无明显影响．结果提示１０－ＨＤＡ可调节Ｔ淋巴细胞参与的免疫反应．

人胚胎干细胞在人源和鼠源饲养层上的生长特性比较

背景:不同来源饲养层条件下,人胚胎干细胞是否具有相同或相似的生物学特性尚不清楚,该问题的解决有利于建立标准化的饲养层体系。目的:观察比较人胚胎干细胞在人源和鼠源饲养层上的生长特性是否相同?设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-09/2009-02在中国科学院昆明动物所完成。材料:清洁级孕12.5～13.5d的ICR小鼠2只,由昆明医学院动物中心提供。永生化人成纤维细胞由美国约翰霍普金斯大学医学院建系并赠送,人胚胎干细胞株BG02由中国科学院昆明动物所提供。方法:无菌条件下取ICR胎鼠,组织块胰酶消化法分离培养小鼠胚胎成纤维细胞,永生化人成纤维细胞按常规培养,两种细胞经γ射线处理后,以2.5×104/cm3接种在明胶包被的6孔板中。取人胚胎干细胞,分别接种在小鼠胚胎成纤维细胞或永生化人成纤维细胞饲养层上,加入含β-巯基乙醇的DMEM/F12培养基,使用前添加碱性成纤维细胞生长因子。主要观察指标:两种饲养层上的人胚胎干细胞的形态、特异性标记表达、Oct-4阳性率、细胞倍增时间。结果:培养在小鼠胚胎成纤维细胞和永生化人成纤维细胞饲养层上的人胚胎干细胞,其形态相似,呈圆形或椭圆形集落;均表达SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81和Oct-4,但不表达SSEA-1。与小鼠胚胎成纤维细胞饲养层比较,永生化人成纤维细胞饲养层上人胚胎干细胞Oct-4阳性细胞率明显升高(P<0.05),倍增时间明显延长(P<0.05)。结论:人源和鼠源成纤维细胞饲养层上的人胚胎干细胞体外培养生物学特性存在明显差异。

人参皂苷Rh1对免疫功能降低小鼠的免疫调节作用研究

目的通过研究人参皂苷Rh1对免疫功能低下模型小鼠的免疫调节作用,为研发人参皂苷Rh1作为免疫调节剂提供实验依据.方法建立环磷酰胺(CY)所致免疫功能低下ICR小鼠模型,研究人参皂苷Rh1对小鼠脾指数、胸腺指数、巨噬细胞吞噬功能和淋巴细胞增殖的影响.结果人参皂苷Rh1低、中、高剂量组均可明显增加小鼠的脾指数(P<0.01);人参皂苷Rh1低、中剂量组可显著增加小鼠的胸腺指数(P<0.01);人参皂苷Rh1低、中、高剂量组均对小鼠MΦ吞噬功能有增强作用(P<0.01);人参皂苷Rh1低、中、高剂量组均可显著促进ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖(P<0.01),以低剂量组效果最佳;人参皂苷Rh1低、中、高剂量组对LPS诱导的小鼠B淋巴细胞增殖均无明显促进作用(P>0.05).结论人参皂苷Rh1具有明显增加小鼠的脾及胸腺指数、增强MΦ吞噬功能、促进T淋巴细胞增殖等作用,上调免疫功能低下模型小鼠的免疫功能.

肝细胞生长因子减轻皮质神经元的缺氧/复氧损伤

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对缺氧/复氧诱导大鼠皮质神经元凋亡的保护。方法分离培养SD大鼠皮质神经元,经HGF(15、30和60μg/L)预处理后经缺氧/复氧诱导凋亡,用MTT比色法检测细胞存活率;用Hoechst33258染色法和流式细胞仪检测神经元的凋亡;用比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)和caspase-3活性变化。结果与正常对照组相比,缺氧/复氧组神经元的细胞存活率显著下降,细胞凋亡率和caspase-3活性升高(均P<0.05);而HGF预处理12 h可显著逆转缺氧/复氧所致的细胞存活率降低、凋亡率增加、LDH活性上升、caspase-3活性升高的改变(均P<0.05),且这些效应与HGF剂量正相关。此外,HGF的抗凋亡效应可被PI3K/Akt通路抑制剂LY294002阻断。结论HGF减轻缺氧/复氧所诱导的神经元凋亡可能与其激活神经元的PI3K/Akt信号通路、减少caspase-3表达有关。

人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上定向分化为血管内皮细胞

背景:胚胎干细胞在体外可诱导分化为血管内皮细胞,进而形成血管,因而成为血管组织工程理想的种子细胞来源之一。目的:探讨建立定向诱导人胚胎干细胞向血管内皮细胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养人胚胎干细胞H1,将H1细胞团块转移到鼠尾胶原包被的培养板,贴壁24-48h后,培养基换为含不同辅助因子和内皮细胞生长添加剂的EGM-2内皮细胞培养基。结果与结论:①在EGM-2内皮细胞培养基诱导下,细胞逐步表达内皮细胞特异性标记基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化细胞表达内皮细胞特异性标记VE-cadherin、CD31。③分化细胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。说明将人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上,通过EGM-2内皮培养体系诱导,可直接分化为功能性血管内皮细胞。为研究胞外基质对诱导胚胎干细胞血管内皮细胞分化的作用以及相关信号分子机制打下了基础。