hMSC对异体DC-CIK细胞分泌细胞因子的影响

目的:通过检测人骨髓间充质干细胞(hMSCs)对共培养的异体树突状细胞活化的细胞因子激活的杀伤细胞(DC-CIK细胞)分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-6、IL-4和IL-2的影响,探讨hMSCs的免疫调控机制。方法:从健康人骨髓液中分离、培养hMSCs,通过观察细胞形态,检测其分化为神经元样细胞的神经元烯醇化酶(NSE),脂肪样细胞的油红O染色以及CD29和CD44的表达鉴定hMSCs。从健康人的外周血分离、培养DC,CIK细胞。用流式细胞术(FCM)检测CD1α,HLA-DR的表达来鉴定DC;检测CIK细胞CD3+CD56+的表达。将hMSCs与DC-CIK细胞以1:10的比例共培养4d,用FCM检测培养上清中IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-6、IL-4和IL-2的含量。结果:hMSCs呈长梭形,表达CD29和CD44的阳性细胞数分别为96.6%,94.6%,分化为神经元样细胞的NSE阳性;脂肪样细胞的油红O染色为阳性。DC细胞表达CD1α,HLA-DR的阳性细胞数分别为(91.9±10.04)%,(88.80±8.92)%。DC与CIK细胞共培养第4天表达CD3+CD56+的细胞数为29.23±12.23%。hMSCs与DC-CIK细胞共培养第4天的培养上清中IFN-γ为(135.05±48.19)ng/L;TNF-α为(11.33±1.42)ng/L;IL-10为(10.15±2.25)ng/L;IL-6为(494.63±235.222)ng/L;IL-4为(7.07±2.30)ng/L;IL-2为(1074.63±303.74)ng/L。对照组(DC-CIK细胞)的IFN-γ为(717.60±248.15)ng/L;TNF-α为(17.78±7.52)ng/L;IL-10为(29.95±12.76)ng/L;IL-6为(8.03±0.21)ng/L;IL-4为(9.08±3.07)ng/L;IL-2高于1250ng/L。结论:DC-CIK细胞与hMSCs共培养后,IFN-γ分泌减少,IL-10轻微下调。表明hMSCs可能通过干扰DC-CIK细胞分泌细胞因子来发挥免疫调节作用。