新生小鼠缺氧缺血性脑损伤模型的建立

目的对经典Vannucci法进行改进,建立一种简便、稳定的新生小鼠缺血缺氧脑损伤模型。方法将新生11 d的KM小鼠分为正常对照组(N组,n=20)和缺血缺氧组(HIBD组,n=160),对HIBD组行左侧颈总动脉结扎,分别按照C1-C8条件缺氧建模。建模后通过比较各条件下小鼠死亡率、建模成功率和TTC染色脑梗死体积,选取最稳定的建模条件。建模后利用体重生长曲线分析小鼠生长发育情况;Longa、Grip test、悬吊试验评估小鼠神经运动功能;HE染色观察脑组织病理改变。结果新生小鼠行左侧颈总动脉结扎,8% O_2、35℃条件下缺氧45min,死亡率低(8.3%)且成模率高(47.92%);HIBD组较N组小鼠体重增长缓慢并出现严重的神经运动功能障碍;结扎侧出现脑梗死区,约占全脑体积(17.76±0.70)%;结扎侧大脑皮层及海马区神经元出现变性坏死。结论本实验采用新生小鼠行左侧颈总动脉结扎,在8%O2、35℃条件下缺氧45 min复制HIBD动物模型,简便且稳定性好,是用于新生儿缺血缺氧性脑损伤研究较为理想的动物模型。

滇西亚种树鼩血液学生理指标的测定及其初步分析

目的为建立和评价树鼩-人类疾病模型奠定血液生理学基础.方法滇西亚种树鼩92只,雌雄各半.禁食12 h后,非麻醉状态下心脏采血装入EDTA-K2抗凝管混匀后采用全自动血细胞分析仪进行血液学各项生理指标测定.用SPSS统计软件对测定的数据统计分析并与人的血液学生理指标参考值进行了比较.结果滇西亚种树鼩雌性和雄性血液学生理指标测定值中红细胞数、血红蛋白、红细胞压积、平均血红蛋白浓度、红细胞分布宽度变异系数有显著性差异(P<0.05),其余的指标无显著性差异(P>0.05).滇西亚种树鼩雌雄合并、雌性和雄性血液学生理指标测定值与人的血液学生理指标参考值比较得出:白细胞、中性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、中性粒细胞绝对值、单核细胞绝对值、红细胞平均体积、平均红细胞血红蛋白含量、平均血红蛋白浓度、红细胞分布宽度均低于人的参考值.淋巴细胞百分比、红细胞数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞分布宽度变异系数、血小板数均高于人的参考值.单核细胞百分比、嗜碱性粒细胞百分比、淋巴细胞绝对值、嗜碱性粒细胞绝对值均在人的参考值范围之内.结论测定了滇西亚种树鼩血液学各项生理指标.

滇西亚种树鼩心肌酶、部分肾功能指标的测定及其初步分析

目的：为建立和评价人类疾病树鼩模型奠定生理生化基础．方法滇西亚种树鼩92只，雌雄各半．禁食12 h后，非麻醉状态下心脏采血0.8～1.0 mL装入灭菌离心管用于分离制备血清并用Olympus AU5400全自动生化分析仪进行生化指标测定．每只树鼩人工挤尿1.5～2.0 mL存于灭菌离心管用Combi-scan500尿液分析仪进行尿液分析测定．用SPSS统计软件对测定的数据统计分析并与人的参考值进行了比较．结果滇西亚种树鼩雌雄间心肌酶与部分肾功能指标测定值中乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶、肌酐、尿酸、尿比重、酸碱度比较差异有统计学意义（＜0.05），其余的指标差异无统计学意义（＞0.05）．滇西亚种树鼩雌雄合并、雌性和雄性心肌酶与部分肾功能指标测定值与人的参考值比较得出：尿素、尿比重、尿糖、尿胆原、尿胆红素、尿亚硝酸盐均在人的参考值范围内，乳酸脱氢酶、肌酸激酶、α-羟丁酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶CKMB均高于人的参考值，肌酐、尿酸和尿酸碱度稍低于人的参考值．白细胞、尿蛋白、酮体、隐血多数与人的参考值一致为阴性，但偶有阳性的，阳性率分别为3.95%、46.1%、39.5%、2.63%．维生素C与人的参考值相反为阳性，但也偶有阴性的，阴性率为6.6%．结论尿素、尿比重、尿糖、尿胆原、尿胆红素、尿亚硝酸盐可直接作为人类疾病树鼩模型的评价指标，其它指标参数可作为判断树鼩正常生理生化的依据．

新生SD大鼠血常规各项与发育时间的相关性分析及其与血清铁浓度变化的机制

目的:探讨经心脏穿刺和剪尾2种采血方式对新生SD大鼠血常规的影响;建立其血常规正常参考值范围;研究发育过程中血常规各项、血细胞形态和血清铁(SI)的消长变化及其相互关系,揭示SI变化的可能机理。方法:新生鼠出生后1、2、3、7和14 d,经全自动血液分析仪检测心脏血和鼠尾血中红细胞(RBC)计数、血红蛋白(HGB)含量、血小板(PLT)计数和白细胞(WBC)计数的改变;通过瑞氏-姬姆萨染色观察2种血液中血细胞形态的差别,及其在不同发育阶段的变化情况;选择心脏穿刺采血建立血常规正常值参考范围;经血液生化分析仪检测各时点心脏血SI含量变化;统计学分析发育时间、血常规各项及SI含量三者间的动态关系。结果:鼠尾血中RBC计数、HGB含量和WBC计数均高于心脏血,且RBC碎片较多;RBC形态随发育逐渐成熟稳定,其碎片亦明显减少;发育时间与心脏血中RBC和PLT计数呈正相关(P<0.01),与HGB含量、红细胞压积(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、WBC计数和SI含量呈负相关(P<0.01)。SI含量与RBC计数呈负相关(P<0.05),与MCV(P<0.01)和MCH(P<0.05)则呈显著正相关。结论:经心脏采血能建立相对完善的正常新生SD大鼠血常规参考值范围;新生鼠血常规各项与发育时间存在显著相关性;发育早期RBC的不稳定性可能是导致SI含量在发育早期较高的原因。