波生坦联合西地那非治疗先心病合并重度肺动脉高压的临床研究

目的观察内皮素受体拮抗剂波生坦+磷酸二酯酶抑制剂西地那非联合治疗先心病合并重度肺动脉高压的安全性及有效性.方法对2009年1月至2012年8月到昆明医科大学附属延安医院就诊的先心病合并重度肺动脉高压患者进行筛选,符合入组标准者10例,其中男性3例,女性7例,平均年龄(43.04±19.74)岁;均予以波生坦+西地那非联合治疗6月,主要研究终点为WHO肺动脉高压功能分级等临床指标,次要研究终点为肺动脉压力等血流动力学指标.结果波生坦+西地那非联合治疗6月,WHO功能分级等主要研究指标与基线相比较有显著改善,肺动脉压力、心输出量等次要研究指标亦有不同程度改善,同时红细胞、尿酸等理化指标均较治疗前显著好转,上述差异均具有统计学意义(P<0.05);而三尖瓣反流速度、转氨酶等理化指标较治疗前无明显变化;亦未发现影响治疗的严重副反应.结论波生坦+西地那非治疗先天性心脏病合并重度肺动脉高压安全有效.

剥脱性二氧化碳点阵激光在烧烫伤瘢痕中的临床应用研究进展

研究如何治疗烧伤后瘢痕,改善烧伤后瘢痕的颜色、厚度、柔韧性是众多研究者面临的难题。同时,对于烫伤后适当的激光参数的设置还没有很好地定义,激光治疗的总体疗效尚未明确。本文将针对剥脱性二氧化碳点阵激光在烧烫伤瘢痕中的临床应用现状、治疗后瘢痕状态的改善、治疗时间、激光相关参数设置、联合治疗和不良反应方面进行综述。旨在为临床治疗烧烫伤创面,减少瘢痕和改善瘢痕状态提供更好的依据。

脑缺血再灌注损伤研究进展

脑卒中是最常见的死亡原因之一,目前主要治疗方法是溶栓疗法[1-3].然而再灌注后进一步加重了损伤.脑缺血/再灌注损伤（I/R）可以导致患者产生神经损伤和身体功能缺损或残疾[4].脑I/R损伤的防治已成为研究热点.本文主要从脑缺血再灌注损伤机制及治疗方面进行综述.

急性髓系白血病FLT3基因突变研究进展

急性髓系白血病（acute myelocytic leukemia,AML）是由髓系造血干/祖细胞起源的一组在临床及遗传学上均有高度异质性的克隆性疾病,是成人急性白血病的主要类型,分类复杂,发病机制至今尚未完全明确。目前认为其发病机制主要包括染色体易位或缺失、原癌基因及抑癌基因突变等,但其独特的细胞遗传学和分子遗传学改变是分类的基础,对疾病诊断、预后分层、微小残留病灶监测,以及靶向治疗的开发等具有极为重要的意义。近年来人们在AML中发现了越来越多的分子异常,例如NPM1、FLT3的内部串联重复序列（FLT3-ITD）、C-KIT等基因突变,在AML的分层治疗中具有重要意义[1],而FLT3/ITD是AML中最常见基因突变之一.

不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究

目的详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞(neural stem cells,NSCs)所占比例,为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。方法分离不同胎龄小鼠全脑(胎龄12.5、14、16和18d)和大脑皮层(胎龄14、16和18 d)组织,消化成单细胞悬液,贴壁培养3~4 h,细胞免疫荧光标记NSCs特异性标记物Nestin,统计分析各组中NSCs所占比例。另外,通过实时荧光定量PCR技术检测Nestin mRNA在不同胎龄(12.5、14、16和18 d)小鼠大脑皮层中的表达水平。结果细胞免疫荧光结果显示,分离培养的不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中均有Nestin阳性细胞。在分离培养的小鼠全脑组织中胎龄12.5 d组NSCs所占比例最高,为53.42%±1.57%;胎龄18 d组NSCs所占比例最低,为25.96%±1.31%,而胎龄14 d组和16 d组位于二者之间。在分离培养的不同胎龄小鼠大脑皮层组织中,胎龄14 d组NSCs所占比例最高,为33.65%±0.29%;胎龄18d组比例最低,为25.29%±0.28%,胎龄16 d组位于二者之间(26.82%±0.30%)。实时荧光定量PCR结果显示,当把胎龄12.5 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA表达水平设定为1,胎龄14 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA的相对表达量为0.83±0.04,胎龄16 d组为0.77±0.05,胎龄18 d组为0.44±0.05。因此,随着小鼠胎龄增加,小鼠大脑皮层中的Nestin mRNA的表达水平逐渐下降。结论在小鼠大脑发育过程中,随着胎龄增加,分离培养的小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞比例逐渐降低。

血根碱对紫杉醇耐药卵巢癌A2780/taxol细胞生长及化疗敏感性影响的研究

目的:探讨血根碱对紫杉醇耐药卵巢癌A2780/taxol细胞生长及化疗敏感性的影响和机制。方法:培养A2780/taxol细胞,分为对照组、血根碱组、紫杉醇组、血根碱+紫杉醇组,对照组加0.9%氯化钠液,血根碱组加2.0μmol/L血根碱,紫杉醇组加2μg/ml紫杉醇,血根碱+紫杉醇组同时加2.0μmol/L血根碱及2μg/ml紫杉醇。应用MTT法、流式细胞仪和Western blot法检测血根碱对A2780/taxol细胞增殖、凋亡、克隆形成及Bax、β-tubulinⅢ蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,血根碱组、紫杉醇组及血根碱+紫杉醇组均能显著抑制A2780/taxol细胞增殖,血根碱+紫杉醇组抑制率最高(P<0.05);紫杉醇组、血根碱组及血根碱+紫杉醇组细胞克隆形成率[(35.67±7.37)%、(27.67±2.52)%和(8.87±3.38)%]明显降低,血根碱+紫杉醇组降低最为明显(P<0.05);紫杉醇组、血根碱组及血根碱+紫杉醇组细胞凋亡率[(18.01±7.13)%、(57.03±12.91)%和(81.68±11.23)%]明显增加,血根碱+紫杉醇组细胞凋亡率最高(P<0.05);紫杉醇组、血根碱组、血根碱+紫杉醇组Bax蛋白表达显著上调、β-tubulinⅢ蛋白表达显著降低,血根碱+紫杉醇组表达量变化最大(P<0.05)。结论:血根碱可下调β-tubulinⅢ表达,诱导肿瘤细胞凋亡,增强紫杉醇对耐药卵巢癌细胞的生长抑制作用,从而促进其对紫杉醇药物的敏感性。

高迁移率蛋白B1在严重烧伤中的作用研究进展

烧伤除了皮肤的毁坏外,还可引起病理、生化、免疫等复杂变化,严重烧伤常常会危及患者的生命。研究发现高迁移率蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB-1)作为一种炎症介质在免疫,炎症和癌症等方面扮演着重要的角色,特别是在急性创伤、伤口修复、脓毒血症的发生中有很强的警报作用。鉴于HMGB 1对烧伤患者的相关性,近几年来国内外烧伤学者对这个炎症因子进行了深入的研究,意在为烧伤的治疗及预后提供新的思路和方法。

急性髓系白血病中DNMT3A基因突变的研究进展

急性髓系白血病（AML）是一组异质性恶性血液系统疾病，无论在形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学及临床特点上都存在很大的差异。随着基因测序技术逐步成熟与推广，目前发现与AML相关的分子异常除Ⅰ类突变（主要是信号传导分子）和Ⅱ类突变（主要是转录因子）外，表观遗传调节对造血干细胞分化过程及功能也起着举足轻重的作用，与AML中表观遗传学有关的基因突变包括异柠檬酸脱氢酶-1（IDH1）、异柠檬酸脱氢酶-2（IDH2）、TET 家族羟化酶2（TET2）、混合系白血病基因（MLL）和蛋白转导结构域（PTD）突变等［1］。而甲基化转移酶3A（DNMT3A）基因突变是近年来在AML患者中发现的与表观遗传调节有关的突变，该基因的突变影响DNA甲基化水平，因此该基因突变可能在 AML 患者发病过程中起着非常重要的作用。现简要总结近年来与DNM T3A突变有关的研究结果。

基于数据挖掘分析KIF2C在肝细胞癌的表达及临床意义

目的:通过数据挖掘分析肝细胞癌中KIF2C基因的表达并探讨其临床意义。方法:使用Oncomine和GEPIA数据库分析KIF2C在肝细胞癌组织中的表达情况;通过GEPIA数据库进行KIF2C的表达程度与病理分级及肝细胞癌生存期的相关性分析;最后利用STRING数据库分析与KIF2C相互作用的蛋白。结果:通过Oncomine和GEPIA数据库分析显示,在mRNA水平上,KIF2C在肝细胞癌中显著高表达(P=0.000),表达水平与其预后为负相关(P=0.000),且肝癌病理分级越高,KIF2C表达水平越高。通过STRING数据库分析显示与KIF2C相关的蛋白有PLK1、AURKB、CENPA等。结论:通过对肿瘤基因数据库进行挖掘发现,KIF2C在肝细胞癌组织中明显高表达且与患者预后相关,为肝细胞癌的致病机制研究和抗肿瘤靶向治疗提供了理论支持。

基于数据库分析肝细胞癌细胞XPO5基因水平变化及其临床意义

目的利用数据库分析肝细胞癌(HCC)组织核转运蛋白XPO5基因水平及其与患者预后的关系。方法在Oncomine数据库,分析HCC组织XPO5基因水平,并在GEPIA数据库中选择TCGA数据进行验证。在MethHC数据库分析HCC组织XPO5基因甲基化水平。在GEPIA的TCGA数据库,分析XPO5基因水平对HCC患者生存期的影响以及不同病理学分级的HCC组织XPO5基因水平差异。在STRING数据库分析与XPO5相互作用的蛋白种类。结果与正常肝组织比,HCC组织XPO5基因呈高水平(P<0.01),且在病理学分级为III级组织XPO5基因水平最高;HCC组织XPO5基因高水平患者总体生存期和无病生存期较低水平患者显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.01);HCC组织XPO5基因较正常肝组织甲基化水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.005),甲基化降低区域主要位于基因体区域;蛋白相互作用网络分析显示,XPO5与DICER1和RAN等蛋白相互作用,并参与了miRNA的调控。结论XPO5基因在HCC组织中呈高水平状态,这种高水平状态可能与癌组织不同病理学分级有关,并影响患者的生存期。采用数据库进一步挖掘分析研究结果可能为临床采用生物学方法HCC患者提供参考依据。

皮肤癌中转化生长因子-β信号通路研究进展

皮肤癌是常见的恶性肿瘤,最常见的类型是皮肤鳞状细胞癌(SCC)、皮肤基底细胞癌(BCC)和皮肤恶性黑色素瘤(CM)。前两种类型的皮肤癌发病率大大超过黑色素瘤,但是大多数患者容易治疗,长期预后更好。BCC和SCC均来源于表皮角质形成细胞,它们不如黑色素瘤致命,主要是因为它们局限于其发病部位,这使得其治疗更加直接〔1〕。CM是皮肤癌最致命的形式,由表皮黑色素细胞产生,是一种难治疗性和倾向转移的恶性肿瘤。早期发现的黑色素瘤可以通过手术切除来治疗;但还是能很快侵袭和转移,是晚期治疗后存活时间不足的主要原因〔2〕。

淀粉样前体蛋白在神经发生中的作用与阿尔茨海默病关系的研究进展

阿尔茨海默病,俗称老年痴呆,由德国外科医生Alzheimer首次发现,是一种进行性发展、致死性神经系统退行性疾病。该病是目前最常见的一种失智症(俗称痴呆症,Dementia),但这种失智不同于正常老化。迄今为止AD具体的发病机制仍未明确、也没有精准的早期筛查和诊断手段及有效控制病情的治疗方法。近年来大量研究证实成年哺乳动物的中枢神经系统终身存在着神经发生。这为脑损伤和神经系统变性疾病的治疗带来了希望。文章将对成年中枢神经系统神经发生的过程及参与AD病程的关键分子APP在神经发生方面的最新发现进行综述,以期为本领域或相关研究提供借鉴或参考。

EP2受体在猕猴肾组织中的表达分布研究

目的研究前列腺素E2受体EP2在正常猕猴肾组织的表达和分布情况,讨论EP2的分布特点与肾功能之间的相关性。方法将制备好的猕猴肾脏石蜡切片进行HE染色,在光镜下进行肾脏组织结构的辨别。采用免疫组织化学SP法观察EP2在肾脏中的免疫阳性表达,用HP IAS1000高清图像分析系统对HE染色和免疫组化实验结果进行观察和图像采集。结果 EP2的免疫阳性表达产物为棕色,它在肾脏各个区域的表达分布情况不同。免疫组织化学结果表明,EP2在肾脏皮质迷路的远曲小管和皮、髓质交界处的弓形动脉壁平滑肌呈强阳性表达(+++),在髓质的远直小管呈弱阳性表达(+),此外,在肾脏组织其它区域中未见EP2阳性表达。结论 EP2在猕猴肾远曲小管、弓形动脉壁平滑肌和远直小管中有表达,提示EP2这种分布特征与肾功能相关。

内源性神经干细胞治疗多发性硬化的研究进展

多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)是一种以中枢神经系统(central nervous system,CNS)脱髓鞘病变为主要特点的自身免疫性疾病。髓鞘再生失败和轴突损害是MS患者遗留永久神经功能损害的病理基础,如何促进少突胶质细胞的再生以重建髓鞘的结构和功能并实现患者功能性恢复是迄今为止尚未解决的医学难题。在过去数十年中发现,具有自我更新和多向分化潜能的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)在成年中枢神经系统中分布广泛,不仅参与神经组织稳态的维持,且能够响应脱髓鞘损伤而增殖、迁移至损伤区域分化产生髓鞘化少突胶质细胞(oligodendrocytes,OLs)以参与髓鞘再生修复。故激活诱导内源性神经干细胞分化并参与髓鞘再生,从而修复MS神经损伤并实现功能性恢复,同时避免了免疫排斥及一系列伦理道德问题,在治疗脱髓鞘疾病以及中枢神经系统损伤方面将会有广阔的临床应用前景。

祛风胜湿方对变应性鼻炎小鼠免疫球蛋白E及水通道蛋白5的影响

目的观察祛风胜湿方对变应性鼻炎小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)及水通道蛋白5(AQP5)的影响。方法以卵清蛋白(OVA)+氢氧化铝基础致敏、局部以OVA激发复制变应性鼻炎小鼠模型,将其分为正常对照组、模型组、祛风胜湿方组、氯雷他定组。灌胃给药14天,观察各组对变应性鼻炎小鼠血清IgE、AQP5及鼻黏膜组织病理形态学的影响。结果与正常对照组比较,模型组小鼠血清IgE及AQP5均显著增高(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组的上述指标均显著降低(P<0.05)。结论祛风胜湿方作用机制可能与其抑制IgE及AQP5表达有关。本实验为揭示中医"风能胜湿"与"祛风止痒"理论提供了实验数据支持。

波生坦治疗先心病合并重度肺动脉高压的疗效观察

目的观察波生坦治疗先心病合并重度肺动脉高压的临床疗效.方法 5例先心病合并重度肺动脉高压患者服用波生坦治疗,观察服药6月后肺动脉压、肺血管阻力、6 min步行试验、右室收缩末期内径变化情况并进行统计学分析.结果服用波生坦后(1)肺动脉收缩压从(96±11)mmHg降为(86±10)mmHg(P<0.01),肺动脉舒张压(56±10)mmHg降为(46±9)mmHg(P<0.01).肺动脉平均压(73±11)mmHg降为(59±10)mmHg(P<0.05).肺血管阻力(17.8±1.9)Wood降为(13.1±1.7)Wood(P<0.01);(2)6 min步行试验从(136±40)m改善为(198±55)m(P<0.01);(3)右室收缩末期内径从(40±5)mm减为(36±6)mm(P<0.05).结论波生坦可降低先心病合并重度肺动脉高压患者的肺动脉压,提高患者的运动耐量,改善右室功能.

大鼠胚胎中脑腹侧来源神经干细胞的分离和培养

目的:体外培养大鼠胚胎中脑腹侧来源神经干细胞(NSCs),观察其生长及诱导分化培养特点。方法:取孕12.5~14.5 d的SD大鼠,采用机械分离法获取中脑腹侧组织,剪碎并吹打成单细胞悬液后,以2×10~5个细胞/ml的密度接种到无血清NSCs培养基中以神经球法培养。培养神经球5~7 d后,按原密度进行传代培养,并取第三代培养的神经球用含10%胎牛血清(FBS)分化培养液分化培养,分化培养7 d后行免疫细胞化学鉴定。结果:神经球呈巢蛋白(nestin)阳性,诱导分化后的细胞作分别呈微管蛋白(βIII-Tubulin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性。结论:经神经球法培养得到的大鼠胚胎中脑腹侧来源神经干细胞可自我增值,并可诱导分化成神经元和胶质细胞。

间充质干细胞对皮肤创面的改善作用

烧伤是一种严重的创伤，研究针对大面积烧伤的新的治疗方法，提高对患者的治疗及护理具有很交际的意义。创面愈合是个复杂的生物学过程，包括炎症、新组织形成和重建三个阶段以及不同的组织和渗透性细胞（中性粒细胞、眄噬细胞、肥大细胞、淋巴细胞）的相互作用。

人血管内皮生长因子A(VEGFA)的原核载体构建、蛋白表达及鉴定

目的克隆人VEGFA基因,与原核载体融合表达、纯化及其鉴定,并将其应用于肿瘤血管生长研究过程中.方法采用PCR方法扩增人VEGFA序列,将其克隆入p GEX-KG原核载体,获得p GEX-KG-h VEGFA重组质粒.将该质粒转化入E.coli菌株BL21(DE3),经IPTG诱导其表达,以GSTrap亲和层析柱纯化融合蛋白,采用SDS-PAGE电泳,Western Blot方法鉴定融合蛋白的表达.结果 PCR扩增获得了h VEGFA基因片段,经测序证实与Gen Bank公布的序列一致,重组的质粒载体经过PCR、酶切鉴定,证明重组质粒中已成功的插入了h VEGFA基因片段.成功构建了该蛋白的原核表达载体p GEX-KG-h VEGFA.结论融合蛋白在IPTG终浓度为0.5 mmol/L、25℃条件下诱导表达,并获得纯化融合蛋白.采用Western Blot的方法可检测到目的融合蛋白GST-h VEGFA的表达.

静注利多卡因对行乳腺癌根治术患者术后镇痛的干预效果

目的评估静脉输注利多卡因在乳腺癌根治术患者中对术后镇痛的完善作用。方法选择乳腺癌根治术患者60例,ASA I^II级。按随机原则进行分组,分为利多卡因组(L组)和生理盐水对照组(C组)。L组于麻醉诱导前按1.5 mg/kg静脉单次注射利多卡因,随后以2 mg/(kg·h)的速度输注,持续至术毕;C组给予等容量的生理盐水。两组均采用丙泊酚和瑞芬太尼全凭静脉维持麻醉。记录两组患者手术时间,术中瑞芬太尼用量,苏醒时间,术后疼痛评分(VAS评分),PCIA按压次数,以及恶心、呕吐的发生率。结果L组的术中瑞芬太尼用量低于C组(P<0.05),术后2、6 h的VAS评分也低于C组(P<0.05),48 h的PCIA按压次数较C组明显减少(P<0.05),而恶心、呕吐发生率也显著下降(P<0.05)。结论静脉注射利多卡因可减少乳腺癌根治术患者术中的阿片类药物用量,改善术后镇痛效果,并减少术后不良反应。