基于医学检验大数据建立与验证昆明地区人群胆红素的生物参考区间

生物参考区间是解释、分析检验结果的依据,可直接采用国家权威机构或权威刊物发表的适合实验室的生物参考区间,也可自行建立或直接引用试剂供应商提供的生物参考区间,但需对引用的生物参考区间进行验证确认[1,2]。随着计算机信息技术的发展,有众多学者提出利用实验室储存的大量数据,建立以数学统计模式为基础的生物参考区间(间接法)[3],并被美国临床实验室标准化委员会(CLSI)和国际临床化学联合会(IFCC)共同颁布的导则EP28-A3c所认可。2018年4月27日中华人民共和国国家卫生健康委员会发布了国家行业标准WS/T 404.4-2018《临床常用生化检验项目参考区间第4部分:血清总胆红素、直接胆红素》。该行业标准的参考样本选择了东北(沈阳)、华北(北京)、西北(西安)、华东(上海)、华南(广州)和西南(成都)6地区城乡居民。

Seminar联合案例教学法在血液科带教中的应用

目的分析Seminar联合案例教学法对血液科硕士研究生临床思维能力培养的效果。方法随机抽取2019年1月—2020年12月于昆明医科大学第一附属医院血液科实习的50名研究生作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组与对照组。对照组均采用传统讲授式教学,观察组采用Seminar联合案例教学法实施教学。对比两组入科前、后理论知识与病例分析成绩考核结果差异,对比两组对教学模式满意程度差异。结果观察组入科后理论知识考核评分明显高于对照组,成绩优异率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组入科后病例分析成绩明显高于对照组,成绩优异率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组对教学方案的总满意率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Seminar联合案例教学法在血液科硕士研究生带教中的应用效果较好,可稳固学科研究生基础理论知识,并能提高其临床思维能力,改善其对病例资料的分析能力。

PDCA循环法在医学检验进修医生教学中的应用

医学检验进修医生培养是提升基层医院医学检验从业人员技术能力的重要方式之一,是推进我国医疗卫生体制改革的重要保障之一。进修医生具有一定工作经验,个人能力、进修目的差异大,个性化、科学化、规范化、制度化的培训方案是培训效果的重要保障。本文总结了PDCA循环法在进修医生培养中的详细应用,通过PDCA循环法,实现因材施教、按需施教,提高进修医生的培训质量。

100例昆明地区社区和医院获得性革兰阴性杆菌血流感染患者临床特征和病原菌分析

目的 回顾性分析社区和医院获得性血流感染(BSI)血培养分离得到革兰阴性杆菌者临床特征及病原菌分布,比较社区和医院获得性血流感染之间的差异,为临床综合诊疗和病原学诊断提供科学理论依据。方法 收集和分析2020年5月—2021年7月昆明医科大学第一附属医院入院收治的100例诊断为社区获得性血流感染(50例)和医院获得性血流感染(50例)患者的临床资料和血培养分离得到的革兰阴性杆菌病原学资料。结果 社区获得性血流感染组男34例,女16例,平均年龄(60.65±21.25)岁。基础疾病以心脏疾病、肾脏泌尿疾病和糖尿病最为常见。原发感染部位以泌尿系统(20例)为主,其次为呼吸道感染(15例)。血流感染时,31例患者均出现发热情况。患者病原菌检出主要为大肠埃希菌(68%)和肺炎克雷伯菌(18%)。医院获得性血流感染组男27例,女23例,平均年龄(53.82±20.81)岁。基础疾病以心脏疾病和肿瘤性疾病最为常见。原发感染部位主要为呼吸道(29例),其次为腹腔感染和肠道感染等。43例患者在血流感染期间均出现发热情况。患者病原菌检出主要为大肠埃希菌(50%)和肺炎克雷伯菌(24%)。所有大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)株分别占45.8%和47.6%。社区获得性血流感染组白细胞(WBC)和C反应蛋白(CRP)水平显著高于医院获得性血流感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 社区和医院获得性革兰阴性杆菌血流感染常见病原菌均以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,但原发感染部位有显著性差异。应重视原发感染部位、近3月内是否有医疗机构入住史等因素对医院获得性BSI的影响,及时了解血流感染病原菌及临床特征,为临床抗感染治疗提供依据和提高治愈率。

昆明地区耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌的分子流行病学特点及耐药特征分析

目的研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌分子流行病学规律及耐药机制,为临床预防和治疗铜绿假单胞菌的感染提供理论依据。方法对多中心收集的耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌(carbapenems-resistant Pseudomonas aeruginosa,CRPA)开展多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和遗传信息研究,并对碳青霉烯酶基因与外膜孔蛋白OprD编码基因进行序列分析。结果多位点序列分型方法将81株CRPA分为36个ST型,总体以ST3390(41.98%,34/81)为主,其中有5种为新发现的ST型别;CRPA菌株中碳青霉烯酶基因的检出率较高(65.43%,53/81),尿液标本检出率最高(80.00%,28/35),其中IMP、VIM和NDM型碳青霉烯酶基因检出率分别为37.04%、27.16%和1.23%,未检测到KPC、GES、SPM和OXA-40型碳青霉烯酶基因;oprD基因的序列比对分析发现,高达96.29%(78/81)CRPA临床分离株发生了各种类型的突变,以单个或者多个碱基的插入或缺失为主(76.54%,62/81)。结论81株CRPA主要的耐药机制为膜孔蛋白基因突变和产碳青霉烯酶;存在ST3390克隆株的局部流行,应加强医院感染防控措施,防止暴发流行。

利用CRISPR/Cas9构建敲除小鼠模型研究PPP2R3A基因对心脏功能的影响

目的 应用CRISPR/Cas9技术构建蛋白磷酸2调节亚基B″家族α亚型(PPP2R3A)基因敲除小鼠,从分子水平及组织水平上研究PPP2R3A缺失对心脏的影响。方法 将Cas9 mRNA和两个靶向PPP2R3A第3外显子翻译起始密码子附近区域的单导向RNA微注射到C57BL/6小鼠受精卵中。小鼠出生后取其基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)和测序以鉴定基因型,鉴定后,基因PPP2R3A缺失型小鼠为KO组,野生型C57BL/6小鼠为WT组(雄性3只,雌性2只)。小鼠心脏组织经甲醛固定并制成切片后分别进行苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色。提取小鼠心脏组织总RNA和蛋白,应用荧光定量PCR和Western印迹验证基因敲除小鼠的有效性和检测互作蛋白表达。结果 获得F1代PPP2R3A杂合小鼠,PCR和测序结果表明突变小鼠的基因型存在113 bp的缺失突变。与WT组相比,KO组心脏组织中PPP2R3A mRNA和蛋白表达量明显下降(均P<0.05),参与心脏发育的G蛋白信号转导调控因子(RGS)19表达量明显升高(P<0.05)。PPP2R3A蛋白表达受损引起了心脏组织病理学变化。结论 PPP2R3A在体内可能通过与RGS19蛋白互作来参与心脏的发育并对心脏功能产生影响。

2013—2015年云南省三级医院尿培养病原菌分布及耐药性分析

目的分析云南地区尿路感染患者病原菌分布和对常见抗菌药物的耐药状况,为合理选用抗菌药物提供客观依据。方法按统一方案,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行细菌鉴定及抗菌药物敏感试验,判定标准按CLSI 2016年版,统计分析使用WHONET 5.6软件进行。结果 2013年1月—2015年12月云南省35家三级医院临床尿标本分离出病原菌42232株,女性患者尿标本占55.4%,其中65.0%为大肠埃希菌,男性患者尿标本占44.6%,其中39.6%为大肠埃希菌。42232株菌中革兰阴性菌32786株,占77.6%,革兰阳性菌9446株,占22.4%;以大肠埃希菌最常见(53.8%),其余依次为肠球菌属细菌(13.9%)、克雷伯菌属细菌(8.3%)和变形菌属细菌(3.5%)等。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为52.3%和44.4%。大肠埃希菌对抗菌药物的敏感率前9位依次为:厄他培南(99.7%)、美罗培南(99.7%)、亚胺培南(99.6%)、头孢替坦(97.6%)、阿米卡星(96.7%)、磷霉素(94.3%)、哌拉西林/三唑巴坦(87.4%)、呋喃妥因(83.3%)和头孢哌酮/舒巴坦(64.9%);耐药率最高的抗菌药物为氨苄西林(89.9%)。肺炎克雷伯菌对厄他培南(6.5%)和美罗培南(9.9%)耐药率低于10.0%。除阿米卡星和呋喃妥因外,住院患者分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对各种抗菌药物的耐药率均高于门诊患者。除利奈唑胺和四环素外,屎肠球菌对其他抗菌药物的耐药率均明显高于粪肠球菌。不同抗菌药物3年耐药率变化趋势有所不同。结论云南地区尿培养病原菌以大肠埃希菌、肠球菌属和肺炎克雷伯菌为主。不同年份、不同地区、不同科室、不同年龄、不同性别及不同标本中病原菌对抗菌药物的耐药率各不相同。临床应依据药敏结果或参照当地细菌耐药性资料合理选择抗菌药物。

DNMT1与T淋巴细胞因子在急性髓系白血病中的表达水平及相关性分析

目的分析DNA甲基转移酶1(DNMT1)与T淋巴细胞因子在急性髓系白血病(AML)中的表达水平及相关性。方法选取昆明医科大学第一附属医院2020年1月至2022年12月收治的初诊AML患者作为AML组(38例),另选取同期在昆明医科大学第一附属医院进行骨髓穿刺的缺铁性贫血患者作为对照组(21例)。检测并比较两组骨髓DNMT1的信使RNA(mRNA)表达水平及T淋巴细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)]水平,以及比较不同临床特征AML患者DNMT1表达水平。采用Pearson相关分析AML患者DNMT1表达水平与T淋巴细胞因子水平的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析DNMT1、T淋巴细胞因子单独及联合检测对AML的诊断效能。结果AML组DNMT1 mRNA表达水平高于对照组(P<0.001)。白细胞计数(WBC)≥5.0×10^(10)/L、骨髓幼稚细胞比例≥60%、外周血幼稚细胞比例≥60%、乳酸脱氢酶(LDH)≥300 U/L、骨髓外浸润、染色体核型预后不良患者DNMT1表达水平分别高于WBC<5.0×10^(10)/L、骨髓幼稚细胞比例<60%、外周血幼稚细胞比例<60%、LDH<300 U/L、无骨髓外浸润、染色体核型预后良好患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。AML组血清IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ水平高于对照组,TGF-β水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,DNMT1表达水平与IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ水平呈正相关(r=0.574、0.619、0.527、0.483,P<0.05),与TGF-β水平呈负相关(r=-0.475,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,DNMT1联合IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ检测诊断AML的曲线下面积分别为0.918、0.711、0.756、0.726。结论AML患者的DNMT1表达水平升高、T淋巴细胞因子表达失衡,二者存在一定相关性,DNMT1与部分T淋巴细胞因子联合检测对AML具有诊断价值。

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染的预防和治疗研究进展

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌在世界范围内广泛传播,其中碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌最为显著,这些细菌通常对临床常用抗菌药物耐药。在新药的研发和应用有限,以及对联合治疗疗效不明确的背景下,该文分析了有关碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染的预防、单一及联合治疗的相关文献,在碳青霉烯酶流行和抗菌药物耐药性增加的情况下,通过预防和抗感染治疗联动来延缓耐药的发生,为预防耐药菌的传播和抗感染治疗提供新的策略。

2012年3家教学医院无菌体液病原菌分布和耐药性

目的了解2012年中国西南地区三家教学医院临床分离自无菌体液病原菌的分布及耐药状况,为感染的预防与控制提供依据。方法运用WHONET5.5和SPSS16软件对3所西南地区三级甲等教学医院2012年无菌体液病原菌进行回顾性分析。结果脑脊液中共分离病原菌266株,包括革兰阳性菌161株、革兰阴性菌90株和真菌15株。分离最多的为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS),其次为金黄色葡萄球菌和鲍曼不动杆菌。其他无菌体液标本(除脑脊液)中共分离病原菌720株,包括革兰阳性菌297株、革兰阴性菌411株和真菌12株。分离最多的为CNS、大肠埃希菌和克雷伯菌属。脑脊液标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别为39.1%和75.9%。其他无菌体液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为45.8%和78.9%。分离自无菌体液的肠球菌出现了对万古霉素和利奈唑胺耐药的现象,其中屎肠球菌对万古霉素的耐药率高达11.5%。在肠杆菌科细菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌属细菌对亚胺培南的耐药率较低,而肠杆菌属细菌对亚胺培南的耐药率则较高(为23.5%)。非发酵菌对碳青霉烯类抗生素耐药率较高,其中鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率已大于60%。结论我国西南地区无菌体液病原菌构成与全国监测数据基本一致。无菌体液中MRSA检出率均低于全国监测水平,MRCNS检出率则较高。对万古霉素耐药的屎肠球菌分离率较高。非发酵菌特别是不动杆菌的耐药形势严峻。合理应用抗菌药物,加强医院感染控制应成为减少细菌耐药发生的重要策略。

循环肿瘤在肿瘤诊疗中的研究进展

肿瘤是严重威胁人类健康的重大公共卫生问题,液体活检因其具有高灵敏度、高特异度和高安全性等特点,在肿瘤早期诊断、指导临床靶向治疗、耐药监测及预后评估等方面发挥着至关重要的作用。循环肿瘤RNA(ctRNA)作为液体活检的一部分,不仅携带有肿瘤的遗传信息,还能反映肿瘤相关蛋白的转录表达及相关表型的调控机制。随着对ctRNA认识的深入,其在肿瘤中发挥作用的机制日渐清晰,展现出良好的临床应用价值,ctRNA有望成为肿瘤临床诊疗中值得信赖的工具。

昆明地区2563例人群维生素D营养的状况

目的通过测定健康体检人群血液25-羟维生素D[25(OH)D]水平,以昆明地区为例分析目前云南高原地区维生素D水平状况并探讨分析其相关影响因素。方法收集在昆明医科大学第一附属医院进行体检的健康人群血清样本,分别按性别、季节和年龄进行分组。采用电化学发光免疫分析法检测血清25(OH)D水平。结果2563例体检者的25(OH)D的平均水平为(62.79±23.33)nmol/mL,维生素D正常、不足、缺乏率分别为26.06%、42.84%和31.10%。性别、季节和年龄对血清25(OH)D均有影响。女性维生素D水平明显低于男性(P<0.05),女性维生素D缺乏者也显著多于男性。秋季维生素D水平明显高于其他三季(P<0.05)。各年龄组间25(OH)D水平,差异有统计学意义(P<0.05)。结论云南高原地区人群存在不同程度的维生素D缺乏,与性别、季节和年龄相关。开展25(OH)D检查可以为临床评估、诊断、治疗维生素D缺乏所致相关代谢疾病提供重要参考依据。

无菌体液中耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的临床分布及耐药性分析

目的分析昆明医科大学第一附属医院无菌体液中分离出的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的临床分布情况和耐药性,为临床抗菌药物的合理使用提供依据。方法采用标准纸片法或仪器法,按照统一技术方案,鉴定并完成细菌耐药性检测。药敏结果依据CLSI2020标准进行判读,数据分析用WHONET5.6完成。对表型确定的CRE菌株进行测序分析,确定基因型。结果无菌体液中共分离出46株CRE,其中肺炎克雷伯菌43株,大肠埃希菌1株,产气克雷伯菌1株,阴沟肠杆菌1株。耐碳青霉烯的肺炎克雷伯菌中检出携带bla_(KPC)基因32株、bla_(OXA-48)基因7株、bla_(IMP)基因1株,检出同时携带bla_(KPC)、bla_(OXA-48)基因2株,检出未携带bla_(KPC)、bla_(OXA-48)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(VIM)基因的菌株1株。46株CRE除对碳青霉烯类抗菌药物耐药外,也对β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类、磷霉素等抗菌药物耐药,未发现对替加环素耐药的菌株。结论无菌体液中分离的CRE以肺炎克雷伯菌为主,酶型以KPC为主,有多种耐药基因同时存在的情况,对常用抗菌药物普遍耐药。医院需加强对CRE的防控,实验室应结合自身条件及临床需求开展碳青霉烯酶型的检测。

miR-551在恶性肿瘤中的研究进展

肿瘤的发生、进展过程中涉及多种癌基因、抑癌基因的变化,当前肿瘤的研究热点是基因靶向治疗。在肿瘤的发生发展中,miRNA发挥着重要的调节功能,其重要性是毋庸置疑的。肿瘤的发生发展、细胞凋亡、侵袭和转移、以及抗癌药耐药等过程均受到miRNA的影响。作为miRNA之一,miR-551在多种肿瘤细胞或组织中差异表达,参与多种肿瘤的发生发展,发挥抑癌或促癌基因的作用,是一种重要的生物标志物。

ISO15189在临床微生物学检验技术教学管理中的应用

目的探讨ISO15189质量管理体系在临床微生物学检验技术专业进修医生教学管理中的应用,以提高检验医学专业的教学质量,培养高素质、复合型检验医学专业人才,不断持续改进检验医学教学质量。方法参照国内外医学实验室广泛认可的ISO15189质量管理体系培训和管理进修医生。首先,通过鼓励教师间经验交流、参加讲课比赛,提高教学质量;鼓励教师参加相关学术会议,并参与检验新项目的开展与科研项目的申报,强化师资队伍建设。其次,完善进修医生管理制度,优化进修医生档案管理细则,定期组织培训学习,进行问题式教学和立体化教学,完善导师带教制,规范结业鉴定。结果本科室培养的进修医生工作能力均较强,临床微生物学专业教学质量得到明显提高。结论应用ISO15189质量管理体系的进修医生能够掌握ISO15189的各要素,可以发现并解决临床工作中常见的专业问题,同时具备一定的科研能力。

急诊检验设立总值班的必要性探讨

急诊检验是一个24 h运转的部门,为了保障其能快速、准确地为患者和临床医生提供各项急需的检查结果,在必要时及时与科室、医院、临床有效沟通,保证医疗工作顺利进行,应由科室选择专人负责急诊检验的工作,这就需要科室设立急诊检验总值班这一职务。急诊检验总值班需从人员培训、仪器的管理、试剂和耗材的准备、检验质量等各方面,保障急诊检验工作有效、安全、无间断进行。

凝血检验报告自动审核系统的建立与应用评价

目的建立凝血检验报告自动审核系统并进行应用效果评价。方法制定凝血检验报告审核规则写入LIS程序。抽取试运行期间自动审核的6281份报告人工验证,评价规则的可行性。结果凝血检验报告自动审核通过率71.34%,假阳性率4.49%,假阴性率0.032%,阳性符合率24.14%,阴性符合率71.34%,一致率95.48%,通过正确率99.96%。结论23条拦截规则,APTT项目的Delta Check规则需进一步完善,其余22条拦截规则通过正确率达100%。

云南省检验人员现状调查与分析

目的通过调查云南省公立医疗机构检验人员的工作现状,分析目前云南省检验人才配置所存在的问题。结合国内相关情况探索解决问题的对策和具体措施,为改进云南省现有检验人才配置及培养策略提供数据支持和实证依据。方法对云南省32家公立医疗机构661名检验从业人员进行问卷调查。结果这32家主要公立医疗机构共有661名检验工作者反馈调查问卷;男、女性比例为1∶2.19;男性年龄中位数为34岁,女性年龄中位数为32岁;其中,检验医师比例为7%,职称构成为正高13.9%、副高19.4%、中级33.3%、初级33.3%,学历构成为博士11.1%,硕士55.6%,本科30.6%,专科2.7%,检验技师比例为93%,职称构成为正高1.9%、副高10.4%、中级26.0%、初级61.7%,学历构成为博士0.9%,硕士7.6%,本科73.0%,专科16.4%,中专2.2%。另外,其中21家大型公立医疗机构科主任对各学历层次员工能力综合评价(10分制)博士(9.02±0.79)分,硕士(8.57±0.76)分,本科(8.04±1.02)分,专科(7.09±1.14)分,中专及以下(6.91±1.23)分。结论云南省公立医疗机构检验工作者配备基本合理,检验医师学历较高、职称配置合理,但其设置率不足,人才缺乏;检验技师学历、职称结构有进一步优化的空间。

ACSM蛋白家族在肿瘤中的研究进展

酰基辅酶A合成酶中链家族(Acyl-CoA Synthetase Medium Chains,ACSMs)是一类可以活化C6~C10脂肪酸,并参与中链脂肪酸的合成与分解的酶,对于细胞的存活具有重要意义。肿瘤发生时,由于肿瘤细胞增长快速,需要高出正常细胞所需的更多的能量供给,除外糖酵解途径,脂肪酸供能也是肿瘤细胞获取能量的重要途径。研究中链脂肪酸合成与代谢的关键酶ACSMs,对于深入探究肿瘤的发生发展及预后等方面均具有重要意义。主要介绍近年来ACSMs家族成员与肿瘤发生发展的研究进展。

妊娠期糖尿病宫内高血糖环境对子代外周炎症反应的影响

目的探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM))宫内高血糖环境对子代脐血外周炎症反应的影响。方法选择2019年11月至2023年5月在昆明医科大学第一附属医院出生的GDM母亲及孕期血糖正常母亲的子代作为研究对象,其中选择孕期血糖控制良好的GDM组108例,男67例,女41例,对照组150例,男82例,女68例。采用流式CBA技术测定脐静脉血血清(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17、TNF-α、IFN-α、IFN-γ及IL-12P70)水平。结果GDM组脐静脉血血清IL-6、IL-8、TNF-α水平高于对照组,差异有统计学意义[(6.65±0.51)vs(4.02±0.40),P=0.007;(13.96±1.10)vs(7.36±0.50),P=0.040;(1.27±0.10)vs(0.56±0.01),P=0.020]。GDM组IFN-γ水平低于对照组[(5.67±0.50)vs(10.54±0.90),P=0.038]。GDM组脐静脉血血清IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-12P70、IL-17、IFN-α与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论孕期血糖控制良好的GDM子代先天免疫系统仍被过度激活,并过度释放促炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α,这将为进一步明确GDM宫内高血糖环境子代外周先天免疫系统被激活是否会诱导脑内神经炎症的发生的研究提供了临床依据及基础。