骨髓间充质干细胞对心肌梗死治疗的研究进展

骨髓间充质干细胞拥有心肌再生的能力,移植后能够产生心肌样细胞,促进血管生成,分泌多种生长因子与细胞因子。本文总结了心肌修复的分子机制,探讨了心肌梗死后心肌潜在的再生能力,回顾了以往研究中干细胞移植对心肌梗死后心肌修复的治疗效果,为制定临床策略提供了新的思路。

高压氧治疗对创伤性脑损伤大鼠的神经功能及CyclinD1表达的影响

目的研究高压氧治疗对创伤性脑损伤大鼠的神经功能及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。方法用随机数字表法将24只成年Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、脑创伤组及高压氧治疗组,每组8只。采用自由落体打击法制作中度脑创伤大鼠模型,高压氧治疗组大鼠在脑创伤后给予高压氧治疗,每天1次,连续10 d;假手术组大鼠仅行开颅而不致脑损伤。在伤后第1 d、5 d、10 d对各组大鼠进行神经功能缺损(NSS)评分。在伤后第10 d将大鼠处死,取右侧大脑损伤皮质区组织;采用免疫组织化学法检测Cyclin D1蛋白的表达水平,逆转录聚合酶链式反应(rt-PCR)检测Cyclin D1 mRNA的表达水平。结果脑创伤组大鼠伤后各时间点的NSS评分均明显高于假手术组(均P<0.01),而高压氧治疗组大鼠伤后第5 d、10 d的NSS评分明显低于脑创伤组(均P<0.05)。免疫组化染色检测显示,Cyclin D1阳性染色产物主要分布于胶质细胞和神经元的胞核。与假手术组比较,脑创伤组的Cyclin D1阳性细胞数明显增多(P<0.01);而高压氧治疗组的阳性细胞数比脑创伤组明显减少(P<0.01),但仍高于假手术组。脑创伤组的Cyclin D1阳性染色相对光密度值与假手术组比较明显升高,而高压氧治疗组的相对光密度值与脑创伤组比较则明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.01)。脑创伤组的Cyclin D1 mRNA表达水平与假手术组比较明显升高,而高压氧治疗组的Cyclin D1 mRNA表达水平则明显低于脑创伤组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论高压氧治疗能显著促进创伤性脑损伤大鼠的神经功能恢复,并抑制了Cyclin D1的表达。

CXCR4基因慢病毒载体及其过表达骨髓间充质干细胞株的建立

目的构建表达大鼠CXCR4基因的慢病毒载体,建立CXCR4基因过表达骨髓间充质干细胞株。方法 PCR克隆CXCR4基因,将其连接到慢病毒表达载体PGMLV-6751上,转染293细胞,将构建的重组慢病毒载体与包装质粒混合物共转染293T细胞,收集病毒悬液,测定滴度,转染SD大鼠骨髓间充质干细胞,以嘌呤霉素进行筛选,定量PCR和Western blot检测转染后细胞目的基因mRNA和蛋白的表达水平。结果成功构建了表达CXCR4基因的慢病毒载体,病毒滴度为2×10^(8 )TU/mL,建立了CXCR4基因过表达的大鼠骨髓间充质干细胞株,经定量PCR和Western blot检测,过表达细胞株CXCR4基因的mRNA和蛋白表达水平均较对照组明显升高(均P<0.05)。结论成功构建携带CXCR4基因的慢病毒载体及CXCR4基因过表达的骨髓间充质干细胞株。

高迁移率族蛋白 B1在多器官功能障碍综合征中炎症调控作用的研究进展

高迁移率族蛋白B1（HMGB1）作为一个晚期炎症因子参与多器官功能障碍综合征（ MODS）的发生与发展，其与RAGE／TLRs受体的结合引发系列信号转导最终激发NF－κB的核内转移引发全身炎症反应综合征（ SIRS ）为主要机制。本文从HMGB1的几个受体以及其与MODS发生、发展的关系方面就HMGB1在MODS中炎症调控方面的作用做一综述。

血管内皮糖萼的研究进展

血管内皮糖萼是覆盖在血管内皮上的带有负电荷的绒毛状结构,是血管内皮与血浆之间的天然屏障,主要起调节血管的通透性、调节炎症反应(白细胞的黏附与流动)、转导血管机械剪切力、抑制血管内凝血等作用,本文阐述了糖萼的结构、生理功能、影响因素及保护方面的相关研究进展。

高压氧治疗脑外伤的研究进展

脑外伤(TBI)是由外伤引起的脑组织结构和功能严重损害的疾病,其发生率以及严重程度受到世界各国医学界的广泛重视。如何降低TBI的致残率、病死率及减轻后遗症成为急救医学研究的一个重要课题。高压氧治疗TBI在临床上广泛应用,涉及维护脑组织功能、减轻并发症及后遗症等领域。了解高压氧的合理应用及相关机制有利于评估高压氧对TBI的利弊,更好地应用并发挥其治疗效果。文章就高压氧治疗TBI的研究进展作一综述。

间充质干细胞源性外泌体抗炎免疫调节机制的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)是一种具有自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞,不仅能促进损伤组织的再生修复,还具有一定的抗炎及免疫抑制作用。然而,移植后的MSC存活数量有限,存活期短,定向分化为受损细胞起到直接修复作用的能力非常有限。而间充质干细胞来源的外泌体(mesenchymal stem cell derivrd exosomes,MSC-Exo)通过携带各种生物活性因子(mRNA、microRNA、细胞因子、趋化因子、免疫调节因子等),调节免疫细胞表型、功能和归巢,抑制炎症,对促进损伤组织修复起主要作用[1]。

连续肾脏替代治疗对脓毒症炎症因子清除作用的研究进展

连续肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)是治疗脓毒症的主要方式之一,结合血液透析原理,能够有效地清除激活全身炎症反应的炎症介质、内毒素及细胞因子、补体、炎症细胞等,阻止脓毒症的发生与进展。国内外的大量研究已证实CRRT治疗脓毒症的高效性,但目前尚无可靠的生物标志物来评估其对脓毒症炎性因子的清除作用及预后。文章通过分析近年来CRRT治疗脓毒症的相关文献,总结不同炎性因子的表达特点以及脓毒症患者炎症反应的进展过程,深入了解CRRT对不同炎性因子的清除作用,以期进一步明确CRRT对脓毒症的治疗效果,从而为临床危重病中CRRT的应用提供理论基础。

骨髓间充质干细胞来源外泌体在疾病中的应用研究进展

骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)是来源于中胚层具有多向分化潜能的干细胞[1],在特定条件下,可分化为不同类型的细胞[2],如骨、软骨、心肌细胞、上皮细胞和肝细胞等。BMSCs主要存在于全身结缔组织中,骨髓中含量最丰富,来源充足,容易获得,能在体外培养扩增。

多器官功能障碍综合征动物模型制作方法新进展

多器官功能障碍综合征(MODS)是当今危重症医学研究的重点,因病死率极高,研究其发病机制是有效治疗的根本,建立可重复性经济标准的动物模型是研究的基础。国内外对MODS的研究方向不同,所依据的模型制作原理也不尽相同,因此其动物模型的制作方法也有较大差别。该文对MODS的相关动物模型制作方法及优缺点予以综述,为相关实验研究提供参考。

骨髓间充质干细胞治疗脓毒症相关性器官损伤的研究进展

脓毒症一直是医疗界的难题,尽管目前有良好的监护措施和诊断方法,但近数十年来,脓毒症的发病率仍居高不下,病死率高达25%~30%,发展为脓毒性休克的患者的病死率高达40%~50%[1]。脓毒症病因较多,感染、创伤、休克等均可诱发。脓毒症爆发后,机体呈现出炎性因子大量释放、免疫功能紊乱、凝血功能异常的状态,甚至诱发脏器的损伤,包括脑、肺、心、肝、肾等重要脏器的损伤。

间充质干细胞向胰岛样细胞诱导分化的研究进展

胰岛细胞的移植是最有希望治疗糖尿病的方法之一,近年来研究取得了一些进展,但供体缺乏和免疫排斥仍是限制其发展的两大难题。骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)在体外可通过多种方法诱导分化为胰岛样分泌细胞,为细胞移植治疗糖尿病提供了新的思路与方法。近年来,干细胞理论和实验技术得到了进一步发展,通过自体移植同时避免了供体缺乏和免疫排斥两大难题。利用干细胞治疗糖尿病成为临床上最近研究的热点。该文对间充质干细胞向胰岛样细胞分化诱导的现状及研究进展作一综述。

人单纯疱疹病毒PDGF-BB转基因重组体的构建、转染及活性研究

目的研究构建人单纯疱疹病毒(HSV)血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)转基因重组体(HSV-PDGF-BB),转染大鼠脑星型胶质细胞后其表达水平及生物活性。方法采用聚合酶链式反应合成大鼠PDGF-BB基因,克隆并构建HSV-PDGF-BB重组体,构建成功后转染大鼠脑星型胶质细胞,并进行筛选鉴定。用免疫组化、蛋白印迹反应检测星型胶质细胞中PDGF-BB的定位及表达水平,并观察转染后星型胶质细胞的增殖能力。结果成功构建了HSV-PDGF-BB重组体,转染后星形胶质细胞的PDGF-BB表达水平明显上调(P<0.05),且明显促进星形胶质细胞的增殖(P<0.05)。结论构建的HSV-PDGF-BB重组体能有效转染大鼠脑星型胶质细胞,并促进PDGF-BB的表达,增强转染后细胞的增殖能力。

骨髓间充质干细胞通过调节IL-4和RAGE表达调控MODS大鼠的炎症反应

目的 探讨骨髓间充质干细胞（BMSC）调节多器官功能障碍综合征（MODS）炎症反应的潜在机制,特别是相关炎性因子的表达,为临床治疗MODS提供新的理论及实验依据.方法 提取并培养4周龄雌性SD大鼠BMSC,以第4代BMSC用于实验.按照随机数字表法将60只雌性SD大鼠分成假手术（Sham）组、MODS组和BMSC组,每组20只.经股静脉注射脂多糖（LPS）1 mg/kg复制大鼠MODS模型;Sham组注射等量磷酸盐缓冲液（PBS）;BMSC组于制模后2 h经尾静脉输注BMSC（1×10^6/只）0.5 mL.观察各组大鼠72 h存活情况;术后72 h取腹主动脉血行血常规和生化检查;应用蛋白芯片检测34种相关炎性因子,以信号比值〉2.0或者〈0.5为差异表达因子,用酶联免疫吸附试验（ELISA）验证有明显变化的炎性因子表达;留取心、肾、小肠组织,苏木素-伊红（HE）染色后观察病理学改变.结果 Sham组、MODS组和BMSC组术后72 h分别存活20、12、16只大鼠.与Sham组比较,MODS组血常规、肝肾功能及心肌酶指标出现明显异常,心、肾、小肠组织明显损伤;经BMSC治疗后各器官功能明显改善,组织损伤减轻.细胞因子芯片分析显示,34个目标因子中白细胞介素-4（IL-4）和晚期糖基化终末产物受体（RAGE）为差异表达细胞因子,MODS/Sham组、BMSC/Sham组、BMSC/MODS组IL-4信号比值分别为0.397、1.124、2.826,RAGE信号比值分别为6.197、1.552、0.250.ELISA验证结果也显示,与Sham组比较,MODS组IL-4明显下降（ng/L：3.59±1.21比29.10±5.78）,RAGE明显升高（ng/L：1.09±0.04比0.11±0.03,均P〈0.01）;与MODS组比较,BMSC组IL-4明显升高（ng/L：9.59±2.21比3.59±1.21,P〈0.01）,RAGE明显降低（ng/L：0.29±0.07比1.09±0.04,P〈0.05）.结论 BMSC移植治疗可以调节MODS大鼠炎性因子IL-4及RAGE的表达,促进组织器官功能修复,从而提高存活率;BMSC有望作为炎症性疾病细胞疗法的种子细胞.

重楼治疗脓毒症研究进展

脓毒症是由于机体对感染的反应失控引起的致命性器官功能障碍,在ICU中发病率、病死率都较高。中药重楼具有止血、免疫调节、抗肿瘤、抗菌抑菌等作用,可深入脓毒症的发病机制,从分子水平多靶点、多成分、多途径阻断全身炎症反应。重楼提取物及其活性成分的抗炎作用表现为抑制炎症细胞活化,抑制炎症因子表达,拮抗凝血异常,诱导血小板聚集、改善毛细血管通透性,免疫调节与抗细胞凋亡,抗氧化,抑制肠道细菌/细菌内毒素移位等。目前,《中华人民共和国药典》已将薯蓣皂苷类重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ和偏诺皂苷类重楼皂苷Ⅵ、Ⅶ含量作为重楼质控指标,然而重楼属植物的化学成分多达211个,除皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ外,其他成分也表现出抗炎作用,结合中药功效多成分、多靶点的特点,仅凭几种化学成分难以反映重楼治疗脓毒症的药理作用,而且前期研究发现,重楼在发挥抗炎作用的同时可能会表现出一定的致畸、致死的毒性反应。因此,建立一套符合中医药理论体系的质量标准,完善重楼药材的质量评价,规定治疗脓毒症的安全有效剂量,成为下一步研究的重要课题。