致敏大鼠肝移植后抗体介导的排斥反应的模型研究

目的建立同种异体致敏大鼠原位肝移植模型,研究该模型发生的排斥反应是否符合抗体介导的排斥反应(antibody-mediated rejection,AMR)的病理学特点。方法以12只雄性Lewis大鼠为受者,250~290 g,6只雄性Brown Norway(BN)大鼠为供者,250~280 g。将Lewis大鼠采用随机数字表法随机分为4组(n=3);Lewis对照组(LC组,未做任何处理)、直接移植组(T组,BN大鼠的肝脏直接移植于Lewis大鼠体内)、致敏组(S组,Lewis大鼠体内输入BN大鼠的脾脏淋巴细胞)和致敏后移植组(TS组,Lewis大鼠体内输入BN大鼠脾脏淋巴细胞2周后,进行肝移植)。于肝移植后大鼠存活第14天,收集受者非致死量血液3~4 mL,检测天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、总胆红素(total bilirubin,TB)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和肌酐(creatinine,CRE)水平,并检测Lewis大鼠体内供者特异性抗体(donor-specific alloantibody,DSA)及补体C4d表达情况。采用苏木精-伊红染色和Masson染色评定4组大鼠肝脏组织的形态学指标,采用CK-19、C4d和CD20免疫组织化学染色方法评定4组大鼠肝脏发生排斥反应的程度并进行排斥反应活性指数(rejection activity index,RAI)评分。结果与T组相比,TS组Lewis大鼠的血清AST、TB和ALP水平以及DSA(IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c)和C4d表达阳性率升高。与LC组相比,T组的Lewis大鼠出现部分胆管水肿及淋巴细胞浸润,但未见明显毛细血管结构的破坏;与T组相比,TS组Lewis大鼠的胆管前毛细血管出现大量的淋巴细胞或单核细胞浸润及毛细血管的严重破坏;TS组的RAI评分和C4d评分均高于T组。结论致敏大鼠肝移植后肝脏发生更严重的急性排斥反应和移植肝失功能,且致敏大鼠的急性排斥反应符合AMR的特点。由于本研究样本量较少,对AMR模型的探索还有待深入。