特利加压素联合FK-409通过减少IL-10和TNF-α释放保护移植肝的机制

目的在大鼠减体积肝移植模型中联合应用特利加压素和FK-409,检测术后移植肝组织中IL-10和TNF-α浓度及相关调控基因表达,了解联合应用特利加压素和FK-409对移植肝保护作用的相关机制。方法使用30%体积供肝行SD大鼠同系肝移植,根据不同的干预手段将受体大鼠分为特利加压素处理组、FK-409处理组、特利加压素处理联合FK-409处理组和对照组,术后第10天取移植肝组织,使用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测IL-10和TNF-α,使用逆转录定量PCR (reverse transcription-quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-qPCR)和Westernblot检测炎性因子相关基因Bax,Egr-1,ET-1,NF-κB表达水平,统计各处理组炎性因子及相关基因水平。结果在减体积肝移植模型中,特利加压素联合FK-409处理组与对照组比较,移植肝组织中IL-10和TNF-α浓度降低(P <0.05),炎性因子相关基因Bax,Egr-1,ET-1,NF-κB在转录水平和蛋白表达水平较对照组降低(P <0.05)。结论特利加压素联合FK-409可有效降低炎性因子相关通路基因表达并减少移植肝组织中IL-10和TNF-α含量。

钙离子/钙调蛋白/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ信号通路在肝纤维化调控中作用的研究进展

目的总结钙离子(ionized free calcium,Ca^(2+))/钙调蛋白(calmodulin,CaM)/Ca M依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaM-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)信号通路在肝纤维化中的作用,为治疗肝纤维化提供理论支撑。对近年来国内外关于Ca^(2+)/CaM/CaMKⅡ信号通路在肝纤维化进程中作用研究的相关文献进行综述。结果Ca^(2+)/CaM/CaMKⅡ信号通路在肝纤维化过程的作用表现为双向调控,可能通过协同血小板源性生长因子或转化生长因子-β1相关途径促进肝星状细胞激活和诱导肝细胞凋亡实现双向调控。结论目前对Ca^(2+)/CaM/CaMKⅡ信号通路在肝纤维化进程中作用研究较少,相关认识仍存不足,未来研究应聚焦于该信号通路在肝纤维化中的作用机制研究,特别是其上游基因或下游靶标蛋白,这将有助于制定出针对性强、效果显著的治疗策略,以期实现肝纤维化甚至肝硬化的逆转,从而为肝纤维化患者提供更有效的治疗选择。

CaMKⅡ表达调控对大鼠肝移植术后肝功能的影响

目的探讨钙调素依赖蛋白激酶家族(calmodulin-dependent kinases casades,CaMK)Ⅱ表达调控对大鼠肝移植术后肝功能的影响。方法采用经典二袖套法建立SD至SD大鼠同种异体原位肝移植模型,并构建CaMKⅡγ蛋白和CaMKⅡγsh RNA的慢病毒表达体系。分别将表达CaMKⅡγsh RNA的慢病毒载体及表达CaMKⅡγ蛋白的慢病毒载体灌注至肝移植术后大鼠体内,同时予以灌注相应的空载体及生理盐水形成对照,分别于术后不同时间点取大鼠下腔静脉血测定其血清ALT及AST水平。结果灌注表达CaMKⅡγsh RNA的慢病毒载体的移植术后大鼠血清ALT及AST降低(P<0.05);灌注表达CaMKⅡγ蛋白的慢病毒载体的移植术后大鼠血清ALT及AST升高(P<0.05);灌注空白载体及生理盐水的移植术后大鼠血清ALT及AST均无明显差异(P>0.05)。结论特异性阻断CaMKⅡ信号通路可有效降低大鼠肝移植术后的血清ALT及AST水平;而增强的CaMKⅡ信号通路则升高大鼠肝移植术后的血清ALT和AST水平。