中波紫外线对HaCaT细胞NF-κB及miRNA表达的影响及调控机制研究

目的研究中波紫外线(UVB)对HaCaT细胞核因子κB(NF-κB)和微小RNA(miRNA)表达谱的影响,进一步探讨UVB损伤人角质形成细胞的分子生物学机制。方法根据UVB的能量密度将HaCaT细胞分为未处理组、100 mJ/cm^(2)UVB组、200 mJ/cm^(2)UVB组和400 mJ/cm^(2)UVB组,选择12h和24h两个时间点,用流式细胞仪技术检测细胞存活率,用real-time PCR和western blot检测NF-κB的表达,用Agilent微阵列芯片筛选差异miRNA,并采用TargetScan进行靶基因预测及基于KEGG数据库的靶基因功能富集性分析。结果UVB可引起细胞存活率的明显下降以及NF-κB表达显著下调(P<0.05)。各处理组的HaCaT细胞均存在miRNA差异性表达,并以400 mJ/cm^(2)UVB组最为明显,其靶基因功能显著富集于30条基因代谢途径或信号通路,其中花生四烯酸、mTOR、NOD样受体、TGF-β和Hedgehog等基因的代谢可能参与了UVB引起的氧化应激、炎症损伤、光老化及肿瘤形成等过程。结论UVB作用HaCaT细胞后引起细胞存活率下降、NF-κB表达下调,以及明显的miRNA差异性表达,可能参与了皮肤的光损伤作用。