昆明地区汉族人群载脂蛋白B基因多态性频率分布与高脂血症关系研究

目的探讨昆明地区汉族人群载脂蛋白B(ApoB)基因中,MspI、XbaI、EcoRI基因型及等位基因频率分布及其与原发性高脂血症的相关性。方法采用病例-对照相关性研究策略,选择昆明地区汉族人群作为研究对象,对91例高脂血症患者及76例健康对照者进行基因多态性检测。结果 1)76例健康者中,MspI位点的+/+、+/-基因型频率分别是0.618、0.382,未检出-/-基因型;+和-的等位基因频率分别是0.809、0.191;XbaI位点的+/+、+/-、-/-基因型频率分别为0.013、0.145、0.842;+和-等位基因频率分别是0.086、0.914;EcoRI位点的+/+、+/-基因型频率分别是0.961、0.039,未检出-/-基因型;+和-等位基因频率分别是0.980、0.020。2)91例高脂血症患者中,XbaI位点的+/+、+/-及-/-基因型和等位基因频率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);MspI位点+/+基因型频率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),Odd Ratio=27.40(95%CI:6.28～120.12);EcoRI位点的+/+基因型频率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),Odd Ratio=0.247(95%CI:0.068～0.901)。结论 1)昆明地区汉族健康人群ApoB基因MspI、XbaI、EcoRI基因多态性有地区特征;2)该地区汉族高脂血症患者中的MspI基因位点的+/+基因型与高脂血症易感性相关,而EcoRI基因位点+/+基因型与高脂血症发病保护性可能相关。

3种方法对临床菌血症样本细菌DNA提取的比较

目的寻找一种简单、有效的提取临床菌血症样本细菌DNA的方法.方法分别用碱液加热裂解法、溶菌酶法和商品DNA提取液法提取细菌DNA,用临床常见病原菌特异性引物,进行PCR扩增.结果 (1)商品DNA提取液法提取革兰阴性菌DNA,经PCR扩增后得到特异性目的片段,但未扩增出革兰阳性菌的特异性目的片段;(2)碱液加热裂解法、溶菌酶法提取革兰阴、阳性菌DNA,经PCR扩增后均得到特异性目的片段,但碱液加热裂解法比溶菌酶法能扩增到更低浓度的细菌DNA目的片段.结论碱液加热裂解法是3种方法中最简单有效的细菌DNA提取方法,适用于临床病原菌基因组DNA提取.

昆明地区汉族人群载脂蛋白E基因多态性频率分布及与高脂血症患者关系的研究

目的探讨ApoE112/158基因中,E3/E3、E2/E3、E2/E4、E3/E4、E4/E4、E2/E2基因型及等位基因频率及其与原发性高脂血症患者的相关性。方法采用病例-对照相关性研究策略,选择昆明地区汉族作为研究对象,对91例高脂血症患者及76例健康对照者进行了上述基因多态性检测。结果 (1)76例健康者中E3/E3、E2/E3、E2/E4、E3/E4、E2/E2基因型频率分别是0.263、0.421、0.237、0.066、0.013,未检出E4/E4基因型;E2、E3和E4等位基因频率分别是0.342、0.506、0.152。(2)91例高脂血症患者中,E3/E3等位基因频率高于对照组,差异有显著性意义(P<0.001),Odd Ratio为7.392(95%CI:3.710～14.699)。E2/E3等位基因频率低于对照组,差异有极显著性意义(P<0.001),Odd Ratio为0.209(95%CI:0.098～0.446)。而E2/E4、E3/E4基因型频率与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论昆明地区汉族健康人群ApoE112/158基因多态性有地区特征。该地区汉族高脂血症患者中的E3/E3基因型与高脂血症的易感性相关,而E2/E3基因型与高脂血症发病保护性可能相关。

昆明地区汉族人群高脂血症患者载脂蛋白B，CⅢ，E基因多态性频率分布研究

目的探讨高脂血症患者载脂蛋白B，CⅢ，E中ApoB MspI，ApoB XbaI，ApoB EcorI，ApoCⅢ3175，ApoCⅢ3206，ApoE112／158等6个位点基因多态性的频率分布。方法采用病例一对照相关性研究策略，选择昆明地区汉族作为研究对象，用基因芯片检测技术，对91例高脂血症患者及76例健康对照者进行上述6个位点基因多态性检测，用直接计算法计算其基因型及等位基因频率。结果昆明地区汉族76例健康人群及91例高脂血症患者检测结果：①ApoBMspI位点的＋／＋，＋／一基因型频率分别是0．618，0．382及0．978，0．022，差异有统计学极显著性意义（z。=35．42，P=0．000），未检出-／-基因型；＋和-的等住基因频率分别是0．809，0．191及0．989，0．011，差异有统计学极显著性意义（妒=31．80，P=0．000）。②ApoBXbaI住点的＋／＋，＋／-，-／-基因型频率分别为0．013，0．145，0．842及0．000，0．077，0．923，差异无统计学显著性意义（x^2=3．259，P=0．195）；＋和-等住基因频率分别是0．086，0．914及0．038，0．962，差异无统计学显著性意义（x^2=3．70，P=0．071）。（9ApoBEcorI住点的＋／＋，＋／-基因型频率分别是0．961，0．039及0．857，0．143，差异有统计学显著性意义（x^2=5．109，P=0．024），未检出-／-基因型；＋和-等位基因频率分另4是0．980，0．020及0．929，0．071，差异有统计学显著性意义（x^2=4．852，P=0．028）。④ApoCⅢ3175位点的CC，CG，GG基因型频率分别是0．363，0．560，0．077及0．421，0．553，0．026，差异无统计学显著性意义（x^2=2．336，P=0．311）；C和G等位基因频率分别是0．643，0．375及0．697，0．303，差异无统计学显著性意义（x^2=1．109，P=0．292）。⑤ApoCⅢ3206位点的GG，GT，TT基因型频率分别是0．527，0．396，0．077及0．671，0．276，0．053，差异无统计学显著性意义（x^2=3．538，P=0．171）；G和T等位基因频率分别是0．7250．275及0．809，0．191，差异无统计学显著性意义（x^2=3．231，P=o．072）。⑥ApoE112／158位点的E3／E3，EZ／E3，E2／E4，E3／E4，E2／E2基因型频率分别是0．725，0．132，0．022，0．110，0．011，0．000及0．263，0．421，0．237，0．066，0．000，0．013，差异有统计学极显著性意义（x^2=49．21，P=o．ooo），其中E3／E4及EZ／E3基因频率差异有统计学极显著性意义（x^2=35．41，17．85，P=0．000，0．000）；E2，E3和E4等位基因频率分别是0．077，0．846，0．077及0．342，0．506，0．152，差异有统计学极显著性意义（x^2=47．42，P=0．000），未检出E4／E4基因型。结论①昆明地区汉族健康人群上述6个位点基因型多态性有地区特征。②昆明地区汉族高脂血症患者ApoE112／158位点基因型频率（E3／E3，E2／E3，E2／E4，E3／E4），AopBMpsI基因住点的基因型（＋／＋，＋／-）与ApoCⅢ3175位点（CC，CG）基因型，ApoCI3206位点的（GG，GT，TT）基因型与高脂血症易感性相关。

熔解曲线分析检测临床常见5种革兰阴性菌的方法建立

目的:构建熔解曲线分析法检测5种临床常见革兰阴性病原菌。方法:选取临床最常见的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽单胞菌作为目标检测菌种。对目标菌种设计种特异性引物。构建熔解曲线法,并进行特异性验证。检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析。检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价。结果:(1)经预实验后,对Tm值差异较大的铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、鲍曼不动杆菌三对引物同时进行熔解曲线分析,对大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌两对引物同时进行熔解曲线分析。(2)特异性验证显示,目标菌种均有特异性的熔解曲线,各自的Tm值依次为88.37、86.32、80.86和87.56、86.32℃。(3)可检测到的拷贝浓度稀释液约为3.0×103copies/mL。(4)稳定性评价的结果显示,Tm值变化范围窄小,差异有统计学意义。结论:所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性。

熔解曲线分析检测临床常见4种革兰阳性菌的方法建立

目的构建熔解曲线分析法同时检测4种临床常见革兰阳性病原菌，为临床感染性疾病的诊疗提供快速、敏感的分子生物学检测信息。方法选取临床最常见的革兰阳性病原菌：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌做为本课题研究的检测菌种。根据检测菌种的不同，分别选取不同菌种的特异性靶序列，设计种特异性引物。对种特异性引物分别用标准菌株、临床分离目标菌株、临床分离非目标菌株、非细菌性病原体以及人源基因组DNA进行常规PCR扩增以及扩增产物测序，验证引物的特异性。对目标菌种引物进行荧光PCR预实验，筛选Tm值差异较大的多对引物，进行熔解曲线分析法实验，并对熔解曲线法的反应条件与反应体系进行优化。对优化后的熔解曲线法进行特异性验证。通过检洲加入人血液中的不同细菌浓度对该方法进行敏感性分析。应用所构建的方法分别检测临床分离目标菌种各20株，分析每种菌种的熔解曲线图，熔点温度（Tm值）及其标准差（SD）的变化，评价所构建方法的稳定性。结果①对所设计的种特异性引物经常规PCR扩增产物电泳分析显示，目标菌株均有目的特异性扩增产物，非目标菌株、非细菌性病原体以及人源基因组DNA未出现特片性电泳条带。特异性扩增产物测序所得序列比对分析显示与目的菌种序列相符。②对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌的4对引物同时进行熔解曲线分析和mecA基因熔解曲线分析的条什优化结果：预变性温度94℃、120s，变性温度94℃、20s：退火温度53℃、12s：延伸温度68℃、13s；扩增循环数为40个循环，熔解曲线分析温度75℃～95℃。最佳的引物浓度为300nmol／L。③所建立的方法经特异性分析显示，上述4种目标菌种均有特异性熔解曲线，Tm值依次为81．02℃；80．32℃；82．37℃；83．10℃，峰高（cm）／峰宽（cm）均大于2．6，以此为典型的熔解曲线判断标准，则非目标菌、非细菌性病原体以及人源基因组DNA分析未见典型的熔解曲线。④方法的敏感性分析显示，上述4种目标菌和mecA基因可检测到的血液细菌浓度依次为：550、520、470、500与203CFU／mL。⑤对上述4菌和MRSA的临床分离菌各20株进行检测，结果显示，其平均Tm值依次为（80．96±0．688）℃，（80.20±0．729）℃，（82．42±0．599）℃，（83．20±0．713）℃和（80．11±0．15）℃。结论本研究所设计的针对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌和HmecA基因检测引物具有较好的菌种特异性，可用于相应病原菌熔解曲线分析法的建屯；所构建的熔解曲线法具有较好的特异性、敏感性和稳定性；并具有快速、简便、成本低廉的特点，可用于临床样本的检测；但葡萄球菌属内和肠球菌属内的Tm值较接近，必要时，可进一步用单对引物检测分析以鉴定到种。

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究

目的探讨我院肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)基因分布规律。方法对20株经双纸片试验确证为ESBL s表型阳性的肺炎克雷伯菌进行blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组、TOHO-1组等4种基因PCR扩增,并对16株blaSHV-1基因PCR扩增阳性的菌株进行基因序列测定,在In ternet网上与G enB ank中的已知序列进行核苷酸相似性分析,并进行编码基因对位和氨基酸序列对比分析。结果产ESBL s肺炎克雷伯菌中blaTEM-1、blaSHV-1、CTX-M-1组等3种基因扩增阳性率分别是50.0%、95.0%、20.0%。16株肺炎克雷伯菌中有4株序列与SHV-1a(序列号:X 98101,74→934)氨基酸序列完全相同;有3株序列与SHV-2(序列号:AY 570959,42→812)100%相同;有2株序列与SHV-11(序列号:AY 293069,41→817)100%相同;有4株序列与SHV-27(序列号:AF 293345,2→821)氨基酸序列完全相同;有1株序列与SHV-28(序列号:AF 538324,12→823)100%相同;有2株序列在G enB ank中未找到与之完全相同的序列。结论本地肺炎克雷伯菌中有SHV-1a、SHV-11、SHV-28广谱β-内酰胺酶基因和SHV-2、SHV-27 ESBL s基因存在。

产ESBLs大肠埃希菌的耐药表型及水平传播研究

目的了解昆明市第一人民医院临床分离的大肠埃希菌超广谱p内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases，ESBLs）的耐药表型和水平传播情况。方法对2005年1月～12月昆明市第一人民医院临床分离的197株大肠埃希菌用表型确证试验检测ESBLs，用Kirby—Bauer琼脂扩散法做药物敏感试验；用接合试验了解产ESBLs基因是否定位于质粒，并对接合子进行KB法药敏试验和ESBLs表型确证。结果197株大肠埃希菌中共检出产ESBLs菌104株，检出率52．79％。在各类标本中产ESBLs菌株在纤维支气管镜（bronchofibroscope，BF）刷片中分离率最高（75％），就科别来看内分泌科标本的产ESBLs大肠埃希菌的分离率最高（78.57％）。除亚胺培南和阿米卡星外，产ESBLs菌株对其他15种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株（P〈0．01）。104株产ESBLs菌株中有91株符合供体菌的标准,64株接合成功，接合子均确证产ESBLs，其接合率为70．33％。64株供体菌及其相应接合子的药敏结果显示除复方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、庆大霉索、头孢吡肟和头孢西丁外，供体菌及其接合子对其他12种药物耐药率无显著性差异（P〉0．05）。结论昆明市第一人民医院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重，临床应加强对大肠埃希菌耐药性的监测，严格掌握抗生素的使用指征，防止耐药菌株的传播流行。

产ESBLs大肠埃希菌CTX-M型耐药基因分析

目的了解某院CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)在大肠埃希菌中的检出率,并确定其基因型。方法对该院2005年1—12月临床送检标本中分离的197株大肠埃希菌进行ESBLs表型确证试验和接合试验;采用聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M酶基因型,对PCR产物测序并确定其基因型。结果197株大肠埃希菌中有104株(52.79%)ESBLs表型检测阳性,其中91株符合供体菌标准,64株(70.33%)接合成功,接合子均确证产ESBLs。PCR扩增结果示104株产ESBLs大肠埃希菌中共有98株(94.23%)携带CTX-M型基因,其中38株(36.54%)检出blaCTX-M-1组基因,69株(66.35%)检出blaCTX-M-9组基因。64株接合子中共有51株(79.69%)携带CTX-M型基因,其中18株(28.13%)检出blaCTX-M-1组基因,35株(54.69%)检出blaCTX-M-9组基因。基因测序确定存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15、CTX-M-14、CTX-M-27五种基因亚型,以CTX-M-14为主。结论该院大肠埃希菌产ESBLs和耐药质粒水平传播情况严重,产ESBLs细菌基因型以CTX-M-9组的CTX-M-14亚型为主,同时存在CTX-M-22、CTX-M-28、CTX-M-15和CTX-M-27等多种亚型。

产ESBLs大肠埃希菌的耐药性分析

目的了解昆明市第一人民医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的检出及耐药情况。方法对该院2006年1—12月临床分离的293株大肠埃希菌,用表型确证试验检测ESBLs,K-B琼脂纸片扩散法做药物敏感试验。结果 293株大肠埃希菌中,检出产ESBLs菌168株(57.34%)。各类标本中,产ESBLs率以痰标本分离株(64.71%)最高,其次为血液(62.50%)和脓液标本(57.14%);各科室中,产ESBLs率以重症监护室(ICU)分离株(65.22%)最高,其次为内分泌科(65.00%)和肿瘤科(63.33%)。除亚胺培南和阿米卡星外,产ESBLs菌对其他14种常用抗菌药物的耐药率均明显高于非产ESBLs菌(均P<0.01);产ESBLs菌株不仅对青霉素、头孢菌素、氨曲南等抗生素广泛耐药,同时对喹诺酮类、氨基糖苷类、磺胺类等多种抗菌药物耐药,仅对亚胺培南、阿米卡星的耐药率<5%(分别为0.00%、3.30%)。结论昆明市第一人民医院临床分离大肠埃希菌产ESBLs率较高;产ESBLs菌株对临床常用多种抗菌药物严重耐药,可经验选用的药物十分有限。临床医生应根据病原菌药敏结果合理选用抗菌药物,以提高治疗效果。

ICU与非ICU患者感染病原菌分布及耐药性对比分析

目的分析重症监护室(ICU)与非ICU患者感染病原菌的分布和耐药情况,为临床抗感染治疗提供依据,促进临床合理用药.方法对昆明医科大学附属甘美医院2013年1月至2013年12月ICU与非ICU送检标本、药敏实验结果、耐药率等进行对比分析,所有数据采用WHO NET5.3软件及SPSS进行统计分析.结果(1)从ICU患者标本中分离培养出病原菌469株.非ICU患者标本分离培养出病原菌3715株;(2)ICU患者分离的主要病原菌依次为鲍曼不动杆菌(Aba)、产超广谱β-内酰胺酶克雷伯氏菌(Esk)、屎肠球菌(Efm);(3)非ICU患者分离的主要病原菌依次为产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌(Esd)、大肠埃希菌(Eco)、肺炎克雷伯氏菌(Kpn);(4)ICU菌株耐药率普遍高于非ICU,ICU分离的Aba对大部分β-内酰胺类抗生素耐药率大于80%,明显高于非ICU科室.结论 ICU分离菌株耐药情况严重,加强抗菌药物临床应用管理,是控制医院感染,降低细菌耐药性的重要手段.

大肠埃希菌耐药机制的研究进展

大肠埃希菌的耐药机制主要是产生β-内酰胺酶、药物作用靶位的改变、主动外排活跃及外膜通透性的下降。自耐药大肠埃希菌被报道以来,大肠埃希菌耐药株在世界各地引起了广泛感染、传播和流行,由其产生的耐药问题已成为当前全球最重要的耐药问题之一。现对大肠埃希菌耐药机制的研究作简要综述。

云南汉族原发性高血压与HLA-DQA1等位基因的相关性研究

目的 探讨云南汉族人群 HL A- DQA1等位基因与高血压病的相关性。方法 应用病例 -对照相关分析方法 ,采用 PCR- SSP基因分型技术对云南汉族健康个体 91例和高血压病患者 83例 (均无血缘关系 ) ,进行 HL A- DQA1位点 10个有表达的等位基因分型 ,并进行遗传相关分析。结果 原发性高血压患者中 DQA1* 0 30 2的频率为0 .12 8,显著高于对照组 (0 .0 11) ,χ2 =19.4 0 9,P<0 .0 1,相对危险率 RR=11.4 2 ,EF为 0 .2 3。DQA1* 0 2 0 1的频率(0 .0 6 1)显著低于对照组 (0 .170 ) ,χ2 =9.876 ,P<0 .0 5。相对危险率为 0 .35。 PF为 0 .18。结论 云南汉族 HL A-DQA1等位基因与高血压病的相关性与北方汉族存在部分差异 ,HL A - DQA1* 0 30 2可能与原发性高血压易感相关 ;DQA1* 0 2 0 1可能在云南汉族原发性高血压发病中有保护作用。

云南汉族健康人群6个原发性高血压候选基因多态性分布

目的探讨RAS、血管内皮和钠肽系统中血管紧张素原（AGT），血管紧张素转化酶（ACE），内皮型一氧化氮舍酶（eNOS），内皮素-2（ET-2），心钠素（ANP）和钠肽受体C（NPRC）等6个高血压候选基因多态性在云南汉族健康人群中的分布，为进一步研究它们在原发性高血压等心血管疾病发生中的作用提供当地信息.方法用基因芯片检测技术，对97例健康者进行AGTM235T（MM，MT，TT）;ACEI/D（II，ID，DD）;eNOSGlu298Asp（EE，ED，DD）;ET-2A985G（AA，AG，GG）;ANPT2238C（TT，TC，CC）和NPRCA-55C（AA，AC，CC）等位点基因多态性检测.结果云南汉族97例健康人群中：①AGTM235T住点的MM，MT，TT基因型频率分别是0．052，0．381，0．567;M和T的等住基因频率分别是0．242，0．758.②ACEI/D突变的II，ID，DD基因型频率分别为0．340，0．598，0．062;I和D等位基因频率分别是0．680，0．320.③eNOSGlu298Asp位点的EE，ED，DD基因型频率分别是0．845，0．144，0．011;E和D等位基因频率分另q是0．918，0．082.④ET-2A985G位点的AA，AG，GG基因型频率分别是0．020，0．258，0．722;A和G等位基因频率分别是0．149，0．851.⑤ANPT2238C位点的TT，TC基因型频率分别是0．959，0．041，未检出CC基因型;T和C等住基因频率分别是0．979，0．021.⑥NPRCA-55C的AC，CC基因型频率分别是0．763，0．237，未检出AA基因型;A和C等位基因频率分别是0．381，0．619.结论云南汉族健康人群AGTM235T，ACEI/D，eNOSGlu298Asp（E298D），ET-2A985G，ANPT2238C和NPRCA一55C等6个位点基因多态性有地区特征.

CYP2C19遗传多态性与药物代谢及疗效的研究进展

CYP2C19是一种重要的药物代谢酶,参与多种药物的体内代谢。该酶的活性在不同个体和种族之间存在着显著的差异。本文综述了CYP2C19酶的遗传多态性对药物代谢及疗效的影响,将为临床确定最佳治疗剂量、制定合理用药方案、发挥最大疗效、避免和减少不良反应提供指导依据。

熔解曲线分析检测大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌方法的构建

目的构建熔解曲线分析法检测大肠埃希菌、嗜麦芽单胞菌。方法针对大肠埃希菌的16SrRNA、嗜麦芽单胞菌的促族酶B亚单位(gyrB)基因设计种特异性引物。构建熔解曲线分析法,并进行特异性验证。检测不同拷贝浓度稀释液进行敏感性分析。检测临床分离目标菌各20株,进行稳定性评价。结果特异性验证显示,目标检测菌种均有特异性的熔解曲线,融点温度(Tm)值分别为84.73、82.84℃。可检测到的拷贝浓度稀释液分别为3.56×103、1.21×104 copy/mL。稳定性评价的结果显示,Tm值(x±s)变化范围窄小,差异有统计学意义。结论所构建方法具有较好的特异性、敏感性和稳定性。并具有快速、简便、成本低廉的特点,可用于临床样本的检测。

云南汉族高血压病6个候选基因相互作用研究

目的探讨AGT、ACE、eNOS、ET-2、ANP和NPRC等6个基因多态性与高血压病的相关性及其相互作用。方法用基因芯片检测技术,对100例高血压病患者及97例健康对照者进行AGTM235T、ACEI/D、eNOSGlu298Asp、ET-2A985G、ANPT2238C和NPRCA-55C等位点基因多态性检测。结果 NPRCA-55C位点的CC基因型频率(0.540)与对照组(0.237)比较差异有极显著性意义(χ2=18.973,P=0.0000),OddRatio=3.777(95%CI:2.050～6.960);ET-2A985G位点G等位基因频率(0.925)与对照组(0.851)比较,差异有显著性意义(χ2=5.507、P=0.0190),OddRatio=2.648(95%CI:1.073～6.536)。用MDR方法分析以上6个位点基因-基因交互作用,显示两位点ET-2/NPRC模型为最佳模型,该模型的OddRatio为4.002(95%CI:2.1597～7.4159)。结论云南汉族NPRCA-55CCC基因型和ET-2A985GG等位基因可能与高血压病易感性相关。ET-2A985G和NPRCA-55C两个基因多态性之间可能存在基因-基因交互作用。

ANP和NPR-C基因多态性与高血压病的相关性研究

目的探讨ANP和NPR-C基因多态性与高血压病的相关性。方法用病例-对照相关性研究,选择3代居住云南的汉族为研究对象,用基因芯片技术,对100例高血压病患者及97例健康对照者进行ANP T2238C和NPR-CA-55C位点基因多态性分析。结果 (1)云南汉族97例健康人群中ANP T2238C位点的TT、TC基因型频率分别是0.959、0.041,未检出CC基因型;T和C等位基因频率分别是0.979、0.021。(2)NPR-CA-55C的AC、CC基因型频率分别是0.763、0.237,未检出AA基因型;A和C等位基因频率分别是0.381、0.619。(3)ANP T2238C(TT、TC、CC)基因型多态性频率与对照组比较,差异无显著性意义。(4)NPR-CA-55C位点的CC基因型频率(0.540)与对照组(0.237)比较差异有极显著性意义(χ2=18.973,P=0.000),OR=3.777(95%CI:2.050～6.960)。结论云南汉族NPR-CA-55CCC基因型可能与高血压病易感性相关。

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及其基因分析

目的了解临床分离菌中产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率,分析其耐药表型,探讨其ESBLs基因类别。方法采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法,对364株大肠埃希菌和71株肺炎克雷伯菌进行产ESBLs菌株初筛试验,并用双纸片确证试验和双纸片协同试验进行产ESBLs菌株确证。按照NCCLS文件标准,用KirbyBauer纸片扩散法进行产ESBLs株21种抗生素药敏试验。用PCR方法扩增168株ESBLs表型阳性菌中blaTEM1、blaSHV1、CTXM1组、TOHO1组等4种基因。结果(1)大肠埃希菌和克雷伯菌中产ESBLs的检出率分别为46.7%和32.4%。(2)产ESBLs菌对青霉素类100%耐药;对第1、2代头孢菌素耐药率达85%～100%;对除头孢他定以外的第3代头孢菌素,产ESBLs大肠埃希菌耐药率为80%以上,产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药率为65%～75%以上;产ESBLs菌对复方新诺明的耐药率为75%～85%;产ESBLs大肠埃希菌对环丙沙星耐药率为80%～90%、庆大霉素耐药率为50%～75%;产ESBLs菌对阿米卡星、头孢替坦、亚胺培南有较好的敏感性(80%～90%以上)。(3)产ESBLs大肠埃希菌中,blaTEM1、blaSHV1、CTXM1组等3种基因扩增阳性率分别为93.9%、7.4%和53.4%。51.4%的菌株同时携带2种耐药基因,2.7%的菌株同时携带3种耐药基因。产ESBLs肺炎克雷伯菌中blaTEM1、blaSHV1、CTXM1组等3种基因扩增阳性率分别为50.0%、95.0%和20.0%。同时携带2种耐药基因的菌株占35.0%,同时携带3种耐药基因的菌株占15.0%。两种细菌中均未检出TOHO1组基因。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,大肠埃希菌中产ESBLs菌比例有逐年上升趋势。产ESBLs菌对头孢噻肟的耐药率远高于头孢他定,且多数菌株对青霉素类,第1、2、3代头孢菌素、喹诺酮类、磺胺类、氨基糖甙类等抗生素呈多重耐药。大肠埃希菌中以TEM型和CTXM型基因为主。肺炎克雷伯菌以SHV型基因为主,同时存在TEM型和CTXM型基因。