受体来源未成熟树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫低反应性的实验研究

目的研究不负载供者抗原的受者未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)对大鼠肝移植的保护作用,探讨imDC抑制排斥反应的机理。方法以SD大鼠作为供体,雄性Wistar大鼠作为受体,随机分为4组,每组10只,建立肝移植急性排斥反应模型,移植前对受体进行不同的处理。对照组:受体未接受任何处理;环孢素A(CsA)组:术后第2 d开始给予CsA〔10 mg/(kg.d)〕灌胃;成熟树突状细胞(mDC)组:受体术前1 d经阴茎背静脉注射受体来源的mDC 1×106个/只;imDC组:受体术前1 d经阴茎背静脉注射受体来源的imDC1×106个/只。模型建立后10 d各组随机处死5只,取移植肝脏组织行HE染色和免疫组化(FasL/Fas)染色,观察肝脏组织形态结构和排斥反应,根据Banff评分系统判断排斥反应程度;Western blot分析检测各组Foxp3编码的Scurfin蛋白的表达。另留5只大鼠观察术后存活时间;收集血标本,全自动生化分析仪测定ALT、TBIL;双抗体夹心ELISA法检测血清IL-2、IFNγ-、IL-4和IL-10水平。结果CsA组和imDC组术后大鼠中位生存时间明显长于对照组和mDC组,差异有统计学意义(P<0.05)。移植术后各组大鼠血清生化检查:对照组和mDC组ALT及TBIL明显高于CsA组和imDC组(P<0.05);且IL-2和IFNγ-也明显高于CsA组和imDC组(P<0.01),但IL-4和IL-10明显低于CsA组和imDC组(P<0.01)。移植肝脏形态学检测:对照组和mDC组与CsA组和imDC组比较,排斥反应更严重(P<0.05)。Western blot检测:imDC组Foxp3编码的Scurfin蛋白的表达明显高于其他3组(P<0.05)。结论imDC通过阻断间接识别能明显延长移植物存活时间。imDC可能通过以下机理诱导免疫低反应:诱导T细胞凋亡;选择性激活Th2细胞亚群,诱导Th1/Th2偏移;诱导调节性T细胞产生。

女性受者肝移植后早期妊娠并成功分娩一例

肝移植受者妊娠对母体和胎儿来说，均存在一定危险，这些一直是移植医师和产科医师关注的问题。2004年国内报道了首例肝移植术后妊娠、分娩的病例^[1]，近年来国内报道的女性受者妊娠均发生在肝移植术后19个月以上。我中心有1例女性受者在原位肝移植后第4个月受孕，妊娠39周后，顺产健康男婴1名，现报告如下。

原位肝脏移植术后胆道狭窄的病因分析与治疗方法

目的探讨原位肝移植术后胆道狭窄的病因及治疗方法。方法回顾性分析2006年5月至2008年9月间90例肝移植受者的临床资料，对术后发生胆道狭窄的病因和治疗方法进行了探讨。结果90例肝移植受者中，术后有8例发生胆道狭窄并发症（8．89％），其中吻合口狭窄5例，非吻合口狭窄3例。吻合口狭窄中，有3例因炎症水肿引起狭窄，经内镜逆行胆管造影（ERC）球囊扩张或置入胆道支架治疗后痊愈；另2例因吻合口胆漏疤痕收缩导致狭窄，经ERC置入胆道塑料支架，1例狭窄消失，1例好转。3例非吻合口狭窄者，均为弥漫性肝内胆管狭窄，经ERC或经皮肝穿刺胆道造影（PTC），采用球囊扩张和胆道支架置入治疗效果不佳，2例行二次肝脏移植后获救，1例治疗无效死亡。结论吻合口狭窄和非吻合口狭窄的病因对治疗的反应存在差异，因此，要重视肝移植术后胆道狭窄的病因诊断和分析。只要及时采取适当的治疗措施，均可有效地治疗肝移植术后胆道狭窄。

大鼠galectin-9基因重组腺病毒载体的构建和鉴定

目的克隆大鼠galectin-9基因全长cDNA,构建含大鼠galectin-9基因的重组腺病毒载体,并予以鉴定。方法从大鼠的肝脏组织中用RT-PCR的方法克隆扩增大鼠galectin-9基因,再定向插入到带NotⅠ和HindⅢ酶切的pDC316-GFP穿梭质粒中,获得穿梭质粒pDC316-GFP-galectin-9。经PCR、NotⅠ和HindⅢ酶切及测序鉴定后,用脂质体将穿梭质粒pDC316-GFP-galectin-9与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1.3Cre共转染HEK-293细胞。经位点特异性重组获得含目的基因的重组腺病毒Ad5-galectin-9,行PCR鉴定,经HEK-293细胞扩增及纯化制备高滴度病毒液,用细胞培养方法测定病毒TCID50滴度。结果 PCR、酶切及测序证实穿梭质粒构建正确,PCR鉴定证实大鼠galectin-9基因重组腺病毒载体构建正确,病毒的感染滴度为1.4×109U/ml。结论成功构建了含大鼠galectin-9基因的重组腺病毒表达载体,为进一步研究大鼠galectin-9基因的功能奠定了基础。