4例重症恶性疟疾合并新冠感染患者的医护一体化护理

对本院隔离病区4例重症恶性疟疾合并新型冠状病毒感染患者的医护一体化护理措施进行总结。护理内容包括基础护理、隔离防护措施、咳嗽与呼吸道护理、急性肾衰竭护理、贫血与输血护理、意识障碍护理及健康教育,通过成立医护一体化护理小组,达到医护分工明确、信息资源共享、专业知识互补的目的,进而提高新型冠状病毒感染及疟疾防控工作效率和医疗护理质量,保障患者安全。

Trim26/ZNF173条件性基因敲除小鼠的制备

目的:制备Trim26/ZNF173条件性基因敲除小鼠,为研究Trim26基因在肝癌发生中的作用及其机制提供动物模型。方法:设计基因敲除策略,Trim26的外显子5~7缺失引起的移码突变会破坏蛋白结构域,进而导致Trim26蛋白功能丧失。为此,我们拟删除Trim26基因的外显子5~7,以借助Cre/lox P系统构建Trim26基因条件性敲除的小鼠。简单地说,先获得嵌合体小鼠,选择高嵌合率小鼠与B6/N小鼠交配获得F1代Trim26fl/wt基因型的杂合子小鼠。F1代杂合子小鼠自交得到F2代Trim26fl/fl基因型的纯合小鼠和对照野生型小鼠。提取鼠尾基因组DNA并行PCR鉴定基因型,在DNA水平确定小鼠的基因型。结果:成功构建了打靶载体,打靶载体经限制性内切酶线性化后,成功电转导入了B6/BLU ES 细胞中,ES克隆经过LR-PCR初筛及Southern blot进一步验证,确定得到了3株中靶ES细胞(即3D、6A和10F),将中靶ES细胞扩增后进行囊胚注射,获得了12只Trim26的嵌合体小鼠(嵌合率不小于50%)。选择性成熟后的高嵌合率小鼠与B6/N小鼠交配繁育,得到F1代小鼠,PCR鉴定基因型确认获得了Trim26fl/wt基因型的F1代杂合子小鼠。性成熟后的F1代杂合子小鼠合笼交配后得到F2代小鼠,PCR鉴定基因型确认获得了纯合的Trim26条件性基因敲除小鼠(基因型为Trim26fl/fl)。结论:成功制备了Trim26条件性基因敲除小鼠,为进一步解析Trim26在肝癌发生中的作用及机制打下了良好基础。

携带人MST4或人dnMST4转基因的肺癌细胞株构建

目的:利用慢病毒感染分别建立稳定过表达MST4和dnMST4的人肺癌细胞株。方法:分别以pcDNA3.1-MST4、pcDNA3.1-MST4 T178A质粒为模板,PCR分别扩增MST4、MST4 T178A序列(均为1.251 kb),片段两侧分别添加EcoR I/BamH I和Xba I/BamH I酶切位点,分别In-Fusion克隆至pCDH-RFP和pHEZG中,次日挑选单克隆菌落,提取质粒并进行测序和酶切鉴定;所构建的载体分别命名为pCDH-MST4-RFP和pHEZG-dnMST4。按标准程序进行慢病毒包装,并确认是否成功生产慢病毒;用携带MST4和RFP基因的慢病毒分别感染人肺癌细胞A549和HCC827,用携带dnMST4和GFP基因的慢病毒分别感染人肺癌细胞A549和HCC827,以建立稳定过表达MST4和dnMST4的人肺癌细胞系。应用qRT-PCR和Westernblot检测所建立肺癌细胞系中MST4和dnMST4在RNA层面和蛋白层面的表达水平。结果:测序和酶切鉴定的结果均证实成功构建了pCDH-MST4-RFP和pHEZG-dnMST4,按标准程序生产的携带MST4和RFP基因以及携带dnMST4和GFP基因的慢病毒均能成功感染人肺癌细胞。结论:成功构建稳定过表达MST4或dnMST4的人肺癌细胞株,为进一步研究MST4在肺癌恶性进程中的生物学功能及机制打下了良好基础。

LINC01342靶向miR-367-3p调控OX-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡及细胞炎症反应的实验研究

目的 探究LINC01342靶向miR-367-3p调控氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的血管内皮细胞凋亡及细胞炎症反应的实验研究。方法 用MTT法检测OX-LDL细胞A值;采用100μg/mL OX-LDL处理HUVEC细胞,将细胞分为NC组(正常培养细胞)、OX-LDL组(OX-LDL处理细胞)、si-NC+OX-LDL组(转染si-NC,用OX-LDL处理细胞)、si-LINC01342+OX-LDL组(转染si-LINC01342,用OX-LDL处理细胞)、miR-NC+OX-LDL组(转染miR-NC,用OX-LDL处理细胞)、miR-367-3p+OX-LDL组(转染miR-367-3p,用OX-LDL处理细胞)、si-LINC01342+anti-miR-NC+OX-LDL组(共转染si-LINC01342和anti-miR-NC,用OX-LDL处理细胞)、si-LINC01342+anti-miR-367-3p+OX-LDL组(共转染si-LINC01342和anti-miR-367-3p,用OX-LDL处理细胞),qRT-PCR检测LINC01342和miR-367-3p含量;Western blot法和流式细胞术分别检测细胞凋亡和凋亡蛋白Cleaved-caspase-3;ELISA检测IL-1β、IL-6、TNF-α含量;双荧光素酶报告实验检测LINC01342和miR-367-3p关系。结果 与NC组比较,OX-LDL组LINC01342表达水平、Cleaved-caspase-3蛋白表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高,miR-367-3p表达水平显著降低。下调LINC01342或过表达miR-367-3p可下调OX-LDL诱导的HUVEC细胞Cleaved-caspase-3蛋白表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α含量。LINC01342靶向负调控miR-367-3p的表达,抑制miR-367-3p可以逆转下调LINC01342对OX-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡和炎症反应的影响。结论 LINC01342靶向负调控miR-367-3p抑制OX-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡、炎症反应。

肝爽颗粒联合恩替卡韦对乙型肝炎肝硬化患者血浆D⁃二聚体的影响

目的探讨肝爽颗粒联合恩替卡韦对乙型肝炎肝硬化患者血浆D⁃二聚体水平的影响。方法356例血浆D⁃二聚体升高的乙型肝炎肝硬化患者随机分为两组:观察组191例肝爽颗粒联合恩替卡韦疗程48周,对照组165例单用恩替卡韦。疗程均48周。采用重复测量方差分析比较两组基线、治疗6、12个月时血浆D⁃二聚体水平的变化。结果两组患者基线时血浆D⁃二聚体分别为(3.44±1.33)mg/L和(3.59±1.30)mg/L(P>0.05)。重复测量方差分析显示,组间的主效应显著,F=58.953,P<0.001,偏η2=0.143;时间的主效应显著,F=545.167,P<0.001,偏η2=0.606;时间与组别的交互效应显著,F=10.117,P<0.001,偏η2=0.028。治疗后6个月、12个月,观察组的血浆D⁃二聚体水平下降均高于对照组(P<0.05);每组内基线、6个月、12个月血浆D⁃二聚体水平下降两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。两组的门静脉血栓形成、腹水和消化道出血的发生率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肝爽颗粒联合恩替卡韦与单用恩替卡韦相比,能显著降低乙型肝炎肝硬化患者血浆D⁃二聚体水平,且随时间的延长效果更明显,有效预防门静脉血栓的形成。

干式荧光发光法在HIV感染初筛中的应用价值

目的探讨干式荧光发光法在HIV感染初筛中的应用价值。方法收集疑似HIV感染患者血清样本351例,分别采用干式荧光发光法、ELISA进行检测,以免疫印迹法作为HIV的确证试验(金标准),分析2种检测方法的敏感度、特异性、准确性、阴性预测值、阳性预测值、符合率和一致性。结果ELISA的S/CO值显著高于干式荧光发光法(P<0.001)。趋势分析结果显示,干式荧光发光法的S/CO值随ELISA S/CO值的升高而升高,呈正相关(r=0.658,P<0.001)。351例样本中,干式荧光发光法阳性165例、阴性186例,ELISA阳性168例、阴性183例。2种方法的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义(P>0.05)。干式荧光发光法与ELISA的阳性符合率为95.83%,阴性符合率为97.27%,总符合率为96.58%,一致性好(Kappa=0.931)。结论干式荧光发光法检测快速、操作简便,与ELISA有较高的一致性,适用于基层医疗机构对HIV感染的快速筛查。

输入性恶性疟疾与合并COVID-19病例临床特征的对比分析

目的分析输入性恶性疟疾病例与合并新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病例的临床特征、临床分型、预后、化验资料及影像学改变。方法选取昆明市第三人民医院2022年8月收治的10例确诊为输入性恶性疟疾病例,收集一般资料、临床特征、实验室检查指标、影像学表现、临床分型及预后,依据有无合并新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染分为感染组(n=4)与合并感染组(n=6),对比分析两组资料差异性。结果与感染组比较,合并感染组平均发病时间缩短1 d,病程延长5 d,高热与超高热均在感染组出现(100%,4/4),严重贫血、精神障碍与肾功能损伤危重病例表现均出现在合并感染组,感染组4例病例中2例患者出现轻、中度肝损害及黄疸,而合并感染组6例病例中、重度肝损害及黄疸占83.33%,肾功能不全占50.00%。恶性疟原虫检测结果显示,合并感染组环状体3例,小滋养体3例;感染组环状体1例,小滋养体3例。感染组1例、合并感染组2例伴有影像学改变。结论恶性疟疾患者合并SARS-CoV-2感染除了出现发热热型改变、合并肝功能损伤以外,还出现咳嗽、贫血、精神障碍及肾功能损伤,实验室资料出现淋巴细胞百分比升高、肝功能损伤程度加重、疟原虫密度显著升高,影像学改变与COVID-19相符,结合临床表现变化与早期借助特异性病原学及疟原虫筛查可减少延迟诊断及漏诊。

云南地区新发艾滋病合并其他病原微生物感染患者外周血T淋巴细胞亚群分布特征初探

目的:初探云南地区新发艾滋病(AIDS)合并机会性感染病原微生物患者外周血T淋巴细胞亚群分布特征,为今后云南地区AIDS防治工作提供一些数据参考。方法:收集昆明市第三人民医院感染科2018年6月至2020年1月收治的初次确诊的AIDS患者抗凝血样本220例,其中33例AIDS合并结核分枝杆菌(AIDS/TB),30例AIDS合并HCV(AIDS/HCV),31例AIDS合并马尔尼菲青霉菌(AIDS/TM),剩余样本中45例AIDS合并其他1种病原微生物(AIDS/1),30例AIDS合并其他2种病原微生物(AIDS/2),51例AIDS合并其他3种及以上病原微生物(AIDS/≥3),用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群,对比分析各组间患者外周血T淋巴细胞亚群分布特征。结果:AIDS/TB、AIDS/HCV患者的外周血CD4^(+)T淋巴细胞计数、CD4^(+)/淋巴细胞百分比和CD4^(+)/CD8^(+)比值要远高于AIDS/TM患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。AIDS/1患者的外周血CD3^(+)T淋巴细胞计数、CD3^(+)/淋巴细胞百分比和CD4^(+)T淋巴细胞计数、CD4^(+)/淋巴细胞百分比及CD4^(+)/CD8^(+)比值要远高于AIDS/2和AIDS/≥3患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:AIDS/TM患者的细胞和体液免疫机能都处于一个极其低的水平,随着HIV感染者进入AIDS期,合并感染的病原微生物种类越多,T淋巴细胞亚群的各项指标越低,导致患者免疫水平急剧下降、免疫功能丧失更加严重,是否与患者在无症状期T淋巴细胞亚群的水平或是病原微生物间的拮抗和协同作用有关,有待进一步研究。

丙型肝炎的诊疗进展

丙型肝炎(丙肝)是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)引起的一种常见传染病,2019年全球有慢性HCV感染者5800万人,29万人死于HCV感染引起的肝硬化,2019年全球新发感染者约150万人.丙肝危害严重,早发现、早诊断、早治疗在其中起到重要意义.因此,本文作者总结了丙肝的诊断、治疗方法.丙肝的诊断需结合流行病学史、临床表现和实验室检查等进行.应根据基因型、肝脏损伤严重程度、适应症和禁忌症等选择合适的方案.

肺内成熟畸胎瘤误诊肺结核1例并文献复习

目的探讨肺内畸胎瘤(IPT)的诊治要点。方法回顾性分析昆明市第三人民医院1例IPT患者的临床资料, 并进行文献复习。结果该女性患者10年前曾因咯血于外院诊断为肺结核并接受抗结核治疗, 3年前及该次入院前咯血均复发, 均于外院再次接受抗结核治疗。入院后经支气管镜检查疑似畸胎瘤, 外科胸腔镜下切除术后病理组织学结果为成熟畸胎瘤。给予充分引流及有效抗感染治疗后患者病情好转。结论 IPT临床少见, 因其临床表现缺乏特异性, 需要与肺结核进行鉴别诊断。仅依靠影像学诊断容易误诊, 应尽早做病理学检查确诊后行手术治疗, 以减少误诊误治。