肝清宁调控肝癌MHCC97细胞及肿瘤恶化的影响

目的探讨中药肝清宁对MHCC97细胞增殖、凋亡、迁移侵袭及肿瘤恶化的影响。方法不同浓度肝清宁(20、40、80μg/ml)处理MHCC97细胞,灌胃(55.36、27.68、13.84 g生药/kg)异种移植肿瘤裸鼠。对照组为正常MHCC97细胞或灌胃0.9%氯化钠溶液的荷瘤裸鼠。CCK8法、克隆形成实验检测细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞的凋亡能力;Transwell实验、划痕实验检测细胞的迁移侵袭能力;裸鼠成瘤实验检测肿瘤的生长情况。结果与对照组相比,肝清宁(低、中、高)浓度组细胞在24、48、72 h的存活率均显著降低,细胞的克隆形成量、迁移侵袭数和划痕愈合率均显著降低,细胞凋亡率显著升高,Cleaved caspase-3和Cleaved PARP的蛋白表达量均显著升高,MMP-3、MMP-9蛋白表达均显著降低,肿瘤的重量和体积均显著降低(P<0.05);与肝清宁低浓度组比较,肝清宁中浓度组、肝清宁高浓度组细胞的上述指标发生相同的变化(P<0.05)。结论中药肝清宁可抑制肝癌细胞增殖、迁移侵袭,促进凋亡,并抑制裸鼠体内肿瘤的生长。

长链非编码RNA LINC00662/微小RNA-16-5p/wee1信号通路对肝细胞癌细胞增殖及凋亡的作用研究

目的探讨长链非编码RNA linc00662(LncRNA linc00662)通过微小RNA-16-5p(miR-16-5p)[/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(wee1)]信号轴在肝细胞癌(HCC)细胞增殖及凋亡中的作用。方法该研究时间为2019年8月至2020年10月,体外培养正常肝细胞株LO2和肝癌细胞株SK-HEP-1、HepG2、Huh-7和Li-7。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中linc00662、miR-16-5p和wee1的表达。以HepG2细胞作为研究对象,设置shRNA阴性对照(sh-NC)组、linc00662-shRNA干扰(sh-linc00662)组、抑制剂阴性对照(inhibitor-NC)组、miR-16-5p抑制剂(miR-16-5p inhibitor)组、siRNA阴性对照(si-NC)组、wee1-siRNA干扰(siwee1)组、linc00662-shRNA干扰联合miR-16-5p抑制剂(sh-linc00662+miR-16-5p inhibitor)组和miR-16-5p抑制剂联合wee1-siRNA干扰(miR-16-5p inhibitor+si-wee1)组。CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白基因(Bax)]表达。双萤光素酶报告基因实验检测linc00662、miR-16-5p和wee1之间的相关性。结果PCR结果显示相比较LO2细胞,linc00662在SK-HEP-1、HepG2、Huh-7和Li-7细胞中普遍高表达[0.95±0.14比2.12±0.17、3.86±0.15、2.31±0.14、1.82±0.18,P<0.001]。与sh-NC组相比,敲低linc00662能抑制肝癌细胞增殖(P<0.001)并诱导细胞凋亡(P<0.001)。双萤光素酶报告结果显示linc00662直接靶向结合miR-16-5p并负调控miR-16-5p的表达。同时,miR-16-5p直接靶向结合wee1并负调控wee1的表达。下调miR-16-5p表达可以减轻敲低linc00662对肝癌细胞生长的抑制作用。此外,linc00662可能通过miR-16-5p/wee1通路发挥促癌作用。结论Linc00662是一种在肝癌细胞中上调的LncRNA,可以通过miR-16-5p/wee1轴促进肝癌细胞增殖并抑制细胞凋亡。

HIV感染女性发生宫颈癌的常见临床影响因素分析

目的 探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)感染女性发生宫颈癌的常见临床影响因素。方法 收集60例HIV/AIDS合并宫颈癌患者的临床资料,匹配年龄相同或相近、同期住院的HIV感染的非肿瘤女性患者60例,分析宫颈癌组的临床特点,比较两组常见的临床指标差异。根据是否人乳头瘤病毒(HPV)感染,将合并HIV感染的宫颈癌患者分为HPV感染组和未感染组,比较两组的年龄、肿瘤病理类型、宫颈上皮内瘤变和肿瘤分期,分析HPV感染的影响因素。结果 合并HIV感染的宫颈癌以鳞癌居多,Ⅰ期占45.0%,Ⅱ期占41.7%,HPV感染率为50.0%,感染的基因型主要为高危16型,占53.3%。单因素Logistic回归分析显示,HIV/AIDS组与宫颈癌组在HIV感染时间、HIV-RNA阳性率、抗病毒治疗、传播途径、CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值的差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,CD4+(OR=0.999,95%CI:0.997~0.999)和CD4+/CD8+比值(OR=0.187,95%CI:0.035~0.993)是影响HIV感染女性发生宫颈癌的独立危险因素。在宫颈癌人群中,HPV感染组CD4+计数高于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIV感染女性HPV感染率明显高于正常女性患者,HIV感染后CD4+T细胞的功能下降,而不是数量变化,可能是导致其发生宫颈癌的主要原因。

HBV DNA低水平患者肝组织炎症活动度和纤维化程度的影响因素分析

目的分析HBV DNA低水平患者肝组织病理特征及相关因素,为HBV DNA低水平患者的病情判断提供依据。方法选取2014年1月-2017年12月于云南省昆明市第三人民医院就诊的HBV DNA> 20 IU/ml且<2000 IU/ml者137例,对患者肝组织行病理检查,炎症分级:G1 44例,G2 84例,G3 9例;纤维化分期:S0 2例,S1 67例,S2 56例,S3 9例,S4 3例。分析患者肝组织炎症和纤维化程度与年龄、性别、感染HBV时间、血生化、HBsAg水平、HBV DNA等的关系。计量资料多组间比较采用Kruskal Wallis H检验,计数资料组间比较采用χ~2检验,使用单因素和多因素单向非条件logistic回归分析肝组织病理炎症活动≥G2和纤维化程度≥S2的影响因素。结果 G1、G2、G3 3组间HBsAg、PLT、脾静脉内径和脾脏厚度比较,差异均有统计学意义(H值分别为7. 135、7.458、7. 588、10. 150,P值均<0. 05); S0、S1、S2、S3、S4 5组间HBsAg、PLT、门静脉内径、脾静脉内径和脾脏厚度比较,差异均有统计学意义(H值分别为20. 564、12. 065、26. 171、14. 720、13. 725,P值均<0. 05)。137例患者无或轻度炎症坏死44例(<G2组),中重度炎症坏死93例(≥G2组),将单因素logistic回归分析有意义的年龄、ALT、ALP、WBC、脾静脉内径和脾脏厚度(检验水平调为0.15)纳入多因素分析显示年龄[比值比(OR)=1. 045)]、ALP(OR=1. 019)和脾脏厚度(OR=1. 150)是低水平HBV DNA者肝组织炎症≥G2的独立危险因素(P值均<0. 05)。137例患者无或轻度肝纤维化69例(<S2组),中重度肝纤维化68(≥S2组),将单因素logistic回归分析有意义的TBil、HBsAg、PLT和门静脉内径(检验水平调为0. 15)纳入多因素分析显示HBsAg(OR=2. 065)、PLT(OR=0. 988)和门静脉宽度(OR=2. 464)是低水平HBV DNA者肝组织纤维化≥S2的独立影响因素。结论绝大多数HBV DNA低水平患者均有抗病毒治疗指征,年龄、ALP和脾脏厚度与低水平HBV DNA者肝组织炎症程度密切相关; HBsAg、PLT和门静脉宽度与低水平HBV DNA者肝组织纤维化程度密切相关。

临终关怀多维度困境及解决思路——以晚期肝癌患者为例

针对晚期肝癌,临终关怀的目标是提高患者生活质量。论述临终关怀在晚期肝癌患者“身、心、社、灵”四个维度存在的问题及解决相应问题的应对策略,以及医疗机构和临终关怀机构存在的问题及对策,对于晚期肝癌患者“双重角色”问题,提出加强“身、心、社、灵”的支持,呼吁政府政策及资金支持、匹配相应的专业服务人员数量和在临终关怀科室开展多学科诊疗合作以及加强社区服务,推进临终关怀在晚期肝癌中的应用。

早期介入姑息治疗对肝炎相关性肝癌患者疼痛、焦虑影响分析

目的探索整合姑息治疗后减轻肝癌患者疼痛及焦虑的影响。方法选取60名昆明市第三人民医院肝炎相关性肝癌患者并记录基本情况,患者分为标准治疗组30例(对照组)和姑息介入治疗组(研究组)30例,进行介入治疗后对2组患者分别进行疼痛量表和焦虑量表测评,研究组加入姑息治疗,12周后对2组患者进行2个量表测评,对比2组患者12周前后疼痛及焦虑评分,分析影响肝炎相关性肝癌患者疼痛及抑郁的因素,分析有关因素在2组患者疼痛及焦虑评分之间的相关性。结果年龄、性别、文化程度、吸烟史、酗酒史、医保类型、肝功能分级、肝炎类型在2个治疗组之间,差异无统计学意义(P>0.05);家庭背景、既往有无疼痛史、肿瘤分期、ECOG评分、治疗前NRS评分、治疗后NRS评分、治疗前焦虑评分及治疗后焦虑评分在2个治疗组之间差异有统计学意义(P<0.05)。通过配对样本t检验对显著因素分析后得出12周后对照组的患者疼痛、焦虑评分明显高于研究组(P<0.05)。结论姑息治疗联合标准治疗对于缓解疼痛及焦虑有明显效果,并且越早进入姑息治疗程序对患者疼痛、焦虑的改善更有优势,因此姑息治疗不仅限于晚期肝癌患者。

ESAT-6蛋白及mRNA在肺结核诊断中的临床价值

目的探讨结核早期分泌靶向抗原6的蛋白及其信使核糖核酸在肺结核诊断中的临床价值。方法收集2018年1月-2019年1月就诊于昆明市第三人民医院确诊肺结核的患者41例,健康体检者20例,取外周血进行ESAT-6蛋白及mRNA检测,与痰检(痰涂片及培养)、X-pert及斑点试验等检查进行诊断阳性率比较。结果肺结核患者ESAT-6蛋白表达量及mRNA相对表达量均高于健康人群,差异有统计学意义(均为P<0.001)。肺结核患者ESAT-6的mRNA诊断的阳性率为87.80%,临界(cut off)值为2.004;ESAT-6蛋白的诊断阳性率为92.68%,cut off值为9.272 pg/mL,均高于痰检的36.59%和X-pert的24.39%,差异有统计学意义(均为P<0.001)。结论 ESAT-6蛋白及mRNA在肺结核患者中高表达,可用于肺结核的诊断,且诊断阳性率高于传统检测方法,可用于提高肺结核的临床诊断率。